D4527

脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

Type II, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 units/mg protein

• Synonym(s): DNase I, 脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸-水解酶
• CAS Number: 9003-98-9
• Enzyme Commission number: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• EC 号: 232-667-0
• MDL编号: MFCD00130918
• NACRES: NA.54

Properties

• 类型: Type II
• 质量水平: 300
• 形式: lyophilized powder
• specific activity: ≥2,000 units/mg protein
• 分子量: ~31 kDa
• 纯化方式: chromatography
• 组成: Protein, ≥80%
• 溶解性: 0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear
• application(s): diagnostic assay manufacturing; diagnostic assay manufacturing
• 异质活性: Chymotrypsin ≤0.01%; Protease ≤0.005%; RNase ≤0.01%
• 运输: wet ice
• 储存温度: −20°C

Description

应用

DNAse I可用于切开DNA，作为将标记碱基插入DNA的第一步。来自Sigma的酶已在Madin-Darby犬肾（MDCK）II细胞系的细胞裂解物制备中与RNAse一起用于核酸酶的储备。它也用于从辛德比斯病毒中提取RNA。

来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I已用于两种类似于脱氧核糖核酸酶I的新型人类基因的鉴定、定位和表达。来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I也已用于研究可从牛胰腺中获得高活性RNase、DNase、胆固醇酯酶和胰蛋白酶的新方法。

用于从蛋白质样品中除去 DNA。

生化/生理作用

DNase I是一种内切核酸酶，可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg²⁺存在时，DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn²⁺存在时，两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。最适pH在7-8之间。二价阳离子如Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺以及Zn²⁺都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca²⁺可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A，B，C和D组成，它们的摩尔比分别为4:1:1。仅有少量的D被发现。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠（SDS）和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。

特点和优势

Effective for nicking DNA and removal of DNA from protein samples

单位定义

一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时，在 pH 5.0，25°C的条件下在每ml每分钟内可引起0.001的A₂₆₀变化。

外形

含有氯化钙

制备说明

酶粉可使用水或除磷酸盐缓冲液外任何pH 4.0-9.0的缓冲液进行重悬。应避免钙螯合剂。溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 °C一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 °C则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时，它可在60 °C维持活性最长达五小时，并在68 °C <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液（pH 5.0）和tris缓冲液((pH 7.2)，1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。

分析说明

蛋白由双缩脲法测定。

Safety Information

• 象形图: GHS08
• 警示用语：: Danger
• 危险声明: H334
• 预防措施声明: P261 - P284 - P501
• 危险分类: Resp. Sens. 1
• 储存分类代码: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• 闪点(F): Not applicable
• 闪点(C): Not applicable