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D4527

Sigma-Aldrich

脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

Type II, lyophilized powder, Protein ≥80 %, ≥2,000 units/mg protein

别名:
脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸-水解酶, DNase I
CAS号:
EC 号:
MDL编号:
NACRES:
NA.54

质量水平

300

类型

Type II

形式

lyophilized powder

specific activity

≥2,000 units/mg protein

分子量

~31 kDa

纯化方式

chromatography

组成

Protein, ≥80%

溶解性

0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, clear

特色行业

Diagnostic Assay Manufacturing
Diagnostic Assay Manufacturing

异质活性

Chymotrypsin ≤0.01%
Protease ≤0.005%
RNase ≤0.01%

运输

wet ice

储存温度

−20°C

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应用

来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I已用于两种类似于脱氧核糖核酸酶I的新型人类基因的鉴定、定位和表达。来自牛胰腺的脱氧核糖核酸酶I也已用于研究可从牛胰腺中获得高活性RNase、DNase、胆固醇酯酶和胰蛋白酶的新方法。
DNAse I可用于切开DNA,作为将标记碱基插入DNA的第一步。来自Sigma的酶已在Madin-Darby犬肾(MDCK)II细胞系的细胞裂解物制备中与RNAse一起用于核酸酶的储备。它也用于从辛德比斯病毒中提取RNA。
用于从蛋白质样品中除去 DNA。

包装

10000 units in glass bottle
20000, 40000, 200000, 500000 units in poly bottle

生化/生理作用

DNase I是一种内切核酸酶,可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg2+存在时,DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn2+存在时,两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。最适pH在7-8之间。二价阳离子如Mn2+, Ca2+, Co2+以及Zn2+都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca2+可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A,B,C和D组成,它们的摩尔比分别为4:1:1。仅有少量的D被发现。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠(SDS)和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。

单位定义

一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时,在 pH 5.0,25°C的条件下在每ml每分钟内可引起0.001的A260变化。

外形

含有氯化钙

制备说明

酶粉可使用水或除磷酸盐缓冲液外任何pH 4.0-9.0的缓冲液进行重悬。应避免钙螯合剂。溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 °C一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 °C则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时,它可在60 °C维持活性最长达五小时,并在68 °C <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液(pH 5.0)和tris缓冲液((pH 7.2),1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。

分析说明

蛋白由双缩脲法测定。

象形图

Health hazard

警示用语:

Danger

危险声明

Hazard Classifications

Resp. Sens. 1

Storage Class Code

11 - Combustible Solids

WGK Germany

WGK 3

闪点(F)

Not applicable

闪点(C)

Not applicable

分析证书

原产地证书 (CofO)

David B N Lee et al.
American journal of physiology. Renal physiology, 287(3), F481-F491 (2004-04-29)
The tight junction has been characterized as a domain of focal fusions of the exoplasmic leaflets of the lipid bilayers from adjacent epithelial cells. Approximating membranes to within fusion distance is a thermodynamically unfavorable process and requires the participation of...
Tianxu Han et al.
EMBO reports, 17(12), 1814-1828 (2016-11-01)
Hematopoietic stem cells (HSCs) are capable of giving rise to all blood cell lineages throughout adulthood, and the generation of engraftable HSCs from human pluripotent stem cells is a major goal for regenerative medicine. Here, we describe a functional genome-wide...
Enzymes of Molecular Biology
Weir, A. F.
Methods in Molecular Biology, 16 (1993)
Y Shirako et al.
Journal of virology, 68(3), 1874-1885 (1994-03-01)
Nonstructural proteins of Sindbis virus, nsP1, nsP2, nsP3, and nsP4, as well as intermediate polyproteins, are produced from two precursor polyproteins, P123 and P1234, by a proteolytic enzyme encoded in the C-terminal half of nsP2. We studied the requirements for...
Sambrook, J., and Russell, D.W.
Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2(2), 5-5 (2001)

实验方案

Enzymatic Assay of Deoxyribonuclease I (EC 3.1.21.1)

To standardize a procedure for the enzymatic assay of Deoxyribonuclease I.

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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