DN25

脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

lyophilized powder, Protein ≥85 %, ≥400 Kunitz units/mg protein

• Synonym(s): 脱氧核糖核酸酶, DNase I, 脱氧核糖核酸 5′-寡核苷酸-水解酶
• CAS Number: 9003-98-9
• Enzyme Commission number: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• EC 号: 232-667-0
• MDL编号: MFCD00130918

Properties

• 形式: lyophilized powder
• 质量水平: 300
• specific activity: ≥400 Kunitz units/mg protein
• 分子量: ~31 kDa
• 组成: Protein, ≥85%
• 溶解性: 0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, hazy
• application(s): diagnostic assay manufacturing; diagnostic assay manufacturing
• 异质活性: RNase ≤0.02%
• 运输: wet ice
• 储存温度: −20°C

Description

一般描述

DNase I（脱氧核糖核酸酶I）是一种从牛胰腺分离的核酸内切酶。

• 我们的DNase I可将双链和单链DNA酶解成寡核苷酸和单核苷酸。
• 牛胰腺DNase存在四种异构酶A, B, C和D，均具有不同的等电点：5.22, 4.96, 5.06及4.78.3。主要形式为A，其次为B和C，D所占的比例最小。
• DNase I结构类似于核酸外切酶III。其中包括两个中央β折叠。每个β折叠由六个β-链组成。这种复杂的β折叠被大量环形和螺旋形区域包围。该酶结构类似于核酸外切酶III。^[1]

应用

• 从原代细胞分离液中去除DNA，在降低粘度的同时提高产量：
• 将标记碱基掺入DNA：DNA缺口
• 放射性标记
• 生物工艺应用：DNA去除
• 在RT-PCR前从RNA制剂中去除基因组DNA
• 体外转录
• 缺口平移
• DNase足迹
• 肌动蛋白调控胞内肌动蛋白聚合和细胞凋亡
• 蛋白质与核酸紫外线交联
• DNase参与调控胞内肌动蛋白聚合，同时参与细胞凋亡过程 ^[1]

用于从蛋白质样品中除去 DNA。

生化/生理作用

DNase I是一种内切核酸酶，可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg²⁺存在时，DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn²⁺存在时，两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。二价阳离子如Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺以及Zn²⁺都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca²⁺可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。最适pH在7-8之间。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A，B，C和D组成，它们的摩尔比分别为4:1:1。仅发现少量D。2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠（SDS）和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。

特点和优势

我们的脱氧核糖核酸酶DNAse I基本属于不含RNAse产品，支持该产品应用。

单位定义

一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时，在 pH 5.0，37°C的条件下在每mL中每分钟可引起0.001的A₂₆₀改变。

外形

粗制品，含有氯化钙

制备说明

溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 °C一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 °C则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时，它可在60 °C维持活性最长达五小时，并在68 °C <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液（pH 5.0）和tris缓冲液((pH 7.2)，1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。

分析说明

通过缩二脲法测定的蛋白质。

Safety Information

• 象形图: GHS08
• 警示用语：: Danger
• 危险声明: H334
• 预防措施声明: P261 - P284 - P304 + P340 + P312 - P501
• 危险分类: Resp. Sens. 1
• 储存分类代码: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 3
• 闪点(F): Not applicable
• 闪点(C): Not applicable
• 个人防护装备: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)