T1005

胰蛋白酶 来源于牛胰腺

Type XI, lyophilized powder, ≥6,000 BAEE units/mg protein

• Synonym(s): Serine Protease 1
• CAS Number: 9002-07-7
• Enzyme Commission number: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• EC 号: 232-650-8
• MDL编号: MFCD00082094

Properties

• 生物来源: bovine pancreas
• 质量水平: 200
• 类型: Type XI
• 形式: lyophilized powder
• specific activity: ≥6,000 BAEE units/mg protein
• 分子量: 23.8 kDa
• 组成: protein, 90-100%
• 杂质: salt, essentially free
• 溶解性: hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear
• 异质活性: Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein
• 储存温度: −20°C

Description

应用

对于胰蛋白酶消化肽，胰蛋白酶：肽 使用约为 1：100 至 1:20 的比例。从培养表面除去粘附细胞是本产品的一个典型应用。 从其底物中去除细胞所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物的年龄。 胰蛋白酶也被用于细胞培养期间细胞的再悬浮、蛋白质组学研究中的蛋白质消化和各种凝胶内消化。 其他应用包括：通过基于膜的技术评估结晶，用在确定动力学陷阱的存在会限制蛋白质的折叠速率和产量的一项研究中。

来自牛胰腺的胰蛋白酶已被用于：-

• 用于胰蛋白酶消化，以去除膜结合的同种异体抗原。
• 用于孵育20-kD淀粉酶结合组分，以评估其化学性质。
• 制备乳铁蛋白降解产物，以评估其抗脂肪形成活性。

生化/生理作用

胰蛋白酶切割赖氨酸和精氨酸残基的 C 端肽。 如果酸性残基位于切割位点的任一侧，则该反应的水解速度减慢，并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则停止水解。 胰蛋白酶活性的最适 pH 为 7-9。 胰蛋白酶还可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键的作用。 将 EDTA 作为螯合剂添加到胰蛋白酶溶液中，用于中和钙离子和镁离子，这些离子遮蔽胰蛋白酶作用的肽键。 去除这些离子会增加酶活性。

丝氨酸蛋白酶抑制剂，包括 DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF 和抑肽酶等，将抑制胰蛋白酶。

组分

胰蛋白酶由包含223个氨基酸残基的单链多肽组成，通过去除胰蛋白酶原（在Lys-lle肽键处被切割）中的N-末端六肽而产生。氨基酸序列通过6个二硫键交联。这是胰蛋白酶、β-胰蛋白酶的天然形式。β-胰蛋白酶可以自动裂解，在Lys-Ser残基处切割，产生α-胰蛋白酶。胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。

注意

溶液1 mM HCl的溶液能够以分装形式在-20℃稳定储存1年。Ca²⁺的存在也会减少胰蛋白酶的自溶并维持其在溶液中的稳定性。胰蛋白酶溶液2.0 M尿素、2.0M盐酸胍或0.1% (w/v)时，也能保留大部分活性。

单位定义

使用 BAEE 作为底物，一个 BAEE 单元，将在 pH 7.6，25℃ 下，每分钟产生 0.001 的 A₂₅₃。

制备说明

本品来源于新西兰的胰腺。它能够以1 mg/mL的浓度溶于1 mM HCl。

Safety Information

• 象形图: GHS07,GHS08
• 警示用语：: Danger
• 危险声明: H315 - H319 - H334 - H335
• 预防措施声明: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• 危险分类: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• 靶器官: Respiratory system
• 储存分类代码: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• 个人防护装备: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves