Merck
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T3924

Sigma-Aldrich

胰蛋白酶-EDTA 溶液

1 ×, sterile; sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 0.5 g porcine trypsin and 0.2 g EDTA, 4Na per liter of Hanks′ Balanced Salt Solution with phenol red

Synonym(s):
Cell dissociation enzyme
Enzyme Commission number:
MDL编号:

生物来源

Porcine

质量水平

400

无菌性

sterile; sterile-filtered

产品线

BioReagent

形式

solution

分子量

23.4 kDa

浓度

1 ×

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

杂质

Porcine parvovirus, none detected (9 CFR)

pH值(酸碱度)

7.0-9.0

运输

dry ice

储存温度

−20°C

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应用

本品的典型用途是使贴壁细胞从培养表面脱落。 使细胞解离所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物代数。

生化/生理作用

胰蛋白酶可切割赖氨酸和精氨酸残基的C末端肽段。 如果酸性残基位于切割位点的任意一侧,则该反应的水解速度减慢,并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧,则水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH条件为7-9。 胰蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键。 将EDTA添加到胰蛋白酶溶液中作为螯合剂,用于中和钙离子和镁离子以防止其抑制胰蛋白酶活性。 去除这些离子会增加酶活性。

丝氨酸蛋白酶抑制剂(包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等)会抑制胰蛋白酶。

组分

胰蛋白酶是由含223个氨基酸残基的单链多肽组成的,它通过切割胰蛋白酶原的Lys-1le肽键以去除N-末端六肽而获得。 氨基酸序列通过6个二硫键交联。 这是天然形式的胰蛋白酶——β-胰蛋白酶。 β-胰蛋白酶可以自溶,在Lys-Ser残基处断裂,产生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。

注意

本品应置于-10至-40°C环境冷冻储存。避免反复冻融。

制备说明

本产品含有酚红。 由于在干冰上运输,包装中可能累积大量二氧化碳。 这些CO2可能会进入溶液并略微降低pH值,使溶液呈橙色而不是粉红色。 橙色溶液仍然可以使用,或者可以用氢氧化钠调节pH。 使用高浓度胰蛋白酶长时间孵育细胞,会破坏细胞膜并杀死细胞。 溶解胰蛋白酶或稀释浓缩胰蛋白酶溶液时,应使用不含Ca2+ 或Mg2+的缓冲盐溶液。

储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 1

闪点(F)

Not applicable

闪点(C)

Not applicable

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