T8003

Sigma-Aldrich

胰蛋白酶 来源于牛胰腺

Type I, ~10,000 BAEE units/mg protein

CAS号:
EC 号:
MDL编号:
NACRES:
NA.54

质量水平

200

类型

Type I

形式

solid

specific activity

~10,000 BAEE units/mg protein

分子量

23.8 kDa

组成

protein, 90-100%

溶解性

hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear

异质活性

Chymotrypsin ≤4 BTEE units/mg protein

运输

wet ice

储存温度

−20°C

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应用

对于胰蛋白酶消化肽,胰蛋白酶:肽 使用约为 1:100 至 1:20 的比例。从培养表面除去粘附细胞是本产品的一个典型应用。 从其底物中去除细胞所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物的年龄。 胰蛋白酶也被用于细胞培养期间细胞的再悬浮、蛋白质组学研究中的蛋白质消化和各种凝胶内消化。 其他应用包括:通过基于膜的技术评估结晶,用在确定动力学陷阱的存在会限制蛋白质的折叠速率和产量的一项研究中。

包装

1, 10 g in glass bottle
100, 500 mg in glass bottle

生化/生理作用

胰蛋白酶切割赖氨酸和精氨酸残基的 C 端肽。 如果酸性残基位于切割位点的任一侧,则该反应的水解速度减慢,并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧,则停止水解。 胰蛋白酶活性的最适 pH 为 7-9。 胰蛋白酶还可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键的作用。 将 EDTA 作为螯合剂添加到胰蛋白酶溶液中,用于中和钙离子和镁离子,这些离子遮蔽胰蛋白酶作用的肽键。 去除这些离子会增加酶活性。

丝氨酸蛋白酶抑制剂,包括 DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF 和抑肽酶等,将抑制胰蛋白酶。

组分

胰蛋白酶由 223 个氨基酸残基的单链多肽组成,通过从胰蛋白酶原去除 N-末端六肽而产生,胰蛋白酶原在 Lys-1le 肽键处被切割。 氨基酸序列通过 6 个二硫键交联。 这是胰蛋白酶,beta-胰蛋白酶的天然形式。 BETA-胰蛋白酶可以自溶,在 Lys-Ser 残基位点切割,产生 α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。

注意

1mM HCl 溶液以等分试样可稳定保存 1 年,储存于 -20℃。Ca2+ 的存在也会减少胰蛋白酶的自溶,并维持其在溶液中的稳定性。 在 2.0M 尿素,2.0M 盐酸胍或 0.1%(w/v)SDS 溶液中,胰蛋白酶也将保留其大部分活性。

单位定义

使用 BAEE 作为底物,一个 BAEE 单元,将在 pH 7.6,25℃ 下,每分钟产生 0.001 的 A253

制备说明

溶于 1 mM HCl,浓度为 1 mg/mL。

象形图

Exclamation markHealth hazard

警示用语:

Danger

hazcat

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

靶器官

Respiratory system

storage_class_code

11 - Combustible Solids

WGK Germany

WGK 1

个人防护装备

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

分析证书

原产地证书 (CofO)

Geraldine Delbès et al.
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实验方案
This technical article described the Enzymatic Assay of Trypsin Inhibitor.
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This procedure is for products with a specification for Trypsin activity using Na-Benzoyl-L-arginine ethyl ester (BAEE) as a substrate. The procedure is a continuous spectrophotometric rate determination (A253, Light path = 1 cm).
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相关内容
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