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T8802

Sigma-Aldrich

胰蛋白酶 来源于牛胰腺

TPCK Treated, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥10,000 BAEE units/mg protein

CAS号:
EC 号:
MDL编号:
NACRES:
NA.54

质量水平

200

无菌性

aseptically filled

形式

essentially salt-free, lyophilized powder

specific activity

≥10,000 BAEE units/mg protein

分子量

23.8 kDa

组成

protein, ≥95%

溶解性

hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear

异质活性

Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein

储存温度

−20°C

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相关类别

一般描述

胰蛋白酶分子有两个结构域:一个与酶活性位点和色氨酸残基有关;另一个与8-苯胺基萘-1-磺酸盐结合有关。

应用

对于胰蛋白酶消化肽,胰蛋白酶:肽 使用约为 1:100 至 1:20 的比例。从培养表面除去粘附细胞是本产品的一个典型应用。 从其底物中去除细胞所需的胰蛋白酶浓度主要取决于细胞类型和培养物的年龄。 胰蛋白酶也被用于细胞培养期间细胞的再悬浮、蛋白质组学研究中的蛋白质消化和各种凝胶内消化。 其他应用包括:通过基于膜的技术评估结晶,用在确定动力学陷阱的存在会限制蛋白质的折叠速率和产量的一项研究中。
胰蛋白酶可使贴壁细胞从组织培养板上脱落,以用于传代。胰蛋白酶用于研究评估大分子群集对人α-乳清蛋白结构稳定性的影响。 胰蛋白酶也用于研究哈茨木霉分泌组的BN-PAGE分析。

生化/生理作用

胰蛋白酶切割赖氨酸和精氨酸残基的 C 端肽。 如果酸性残基位于切割位点的任一侧,则该反应的水解速度减慢,并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧,则停止水解。 胰蛋白酶活性的最适 pH 为 7-9。 胰蛋白酶还可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键的作用。 将 EDTA 作为螯合剂添加到胰蛋白酶溶液中,用于中和钙离子和镁离子,这些离子遮蔽胰蛋白酶作用的肽键。 去除这些离子会增加酶活性。

丝氨酸蛋白酶抑制剂,包括 DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF 和抑肽酶等,将抑制胰蛋白酶。

单位定义

在25℃、pH 7.6条件下,使用BAEE作为底物,一单位BAEE每分钟可产生0.001的ΔA253 。反应体积= 3.2 ml(1 cm光程)。
使用 BAEE 作为底物,一个 BAEE 单元,将在 pH 7.6,25℃ 下,每分钟产生 0.001 的 A253

制备说明

TPCK处理

分析说明

E1%/280法测定蛋白

其他说明

象形图

Exclamation markHealth hazard

警示用语:

Danger

危险分类

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

靶器官

Respiratory system

储存分类代码

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

个人防护装备

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

分析证书

原产地证书 (CofO)

Piliang Hao et al.
Molecular & cellular proteomics : MCP, 10(10), O111-O111 (2011-07-26)
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实验方案

Procedure for Enzymatic Assay of Trypsin (EC 3.4.21.4)

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