细胞解离试剂

解离试剂细胞分离过程明场显微镜图像

为还原贴壁细胞(例如上皮细胞)表型的天然环境,通常会将它们接种到经组织培养物处理的表面上,并在此附着存活和增殖。 如需进行增殖、计数和下游分析,必须解离贴壁细胞和来自实体组织的细胞,形成悬浮液。 单细胞悬液是细胞计数、传代培养再接种和细胞测定/分析必需成分。

解离试剂包括天然存在的酶、较为温和的非酶替代物;也可通过螯合钙防止钙粘蛋白的附着而实现解离,从而将细胞与表面或相互脱离。细胞解离试剂可能对细胞外基质(ECM)底物具有特异性。

我们全面的细胞解离试剂产品线包括:

StableCell™胰蛋白酶解离试剂可在室温下保持活性

胰蛋白酶,重组胰蛋白酶,StableCell™胰蛋白酶

胰蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,是最常用的贴壁细胞系和组织解离酶之一。粗制胰蛋白酶制剂通常同时适用上述两种应用,但胰蛋白酶浓度过高或细胞孵育时间过长时,可能会损伤细胞膜并杀死细胞。从培养基质上解离培养细胞的最常用方法是联合使用胰蛋白酶和EDTA(乙二胺四乙酸)处理,其中胰蛋白酶浓度范围为0.025%至0.5%。

和标准胰蛋白酶溶液一样,StableCell™胰蛋白酶溶液专用于细胞解离,但无需分液、冷冻和解冻。由于不再需要分液及等待胰蛋白酶解冻,此溶液为细胞传代或相关实验节省了大量时间,也腾出了更多宝贵的实验室冷柜空间。建议2-8 °C储存我们的StableCell™胰蛋白酶溶液,但我们自己开展的研究证明,37 °C储存的StableCell™胰蛋白酶仍可保留>90%的活性和性能。

胶原蛋白酶和分散酶

胶原蛋白酶可切割天然三螺旋胶原蛋白中的肽键。由于具有水解天然胶原蛋白的独特能力,其广泛用于动物组织细胞分离。胶原蛋白酶存在于多种微生物和不同的动物细胞中。最有效的胶原蛋白酶是由厌氧细菌溶组织梭状芽孢杆菌分泌的“粗制”胶原酶。

分散酶是一种快速、有效、温和且中性的蛋白酶,可培养物中的完整上皮薄层与基质的。分散酶I用于消化肺组织和处理细胞,适用于流式染色和鼠CD4 T细胞的分离。

特殊培养物解离试剂

针对需要更为温和酶活性的细胞和组织,可采用浓度更低、效率更高的Accutase®Accumax™酶溶液解离或分离。上述溶液:

  • 可有效分离胚胎和神经干细胞
  • 解离温和,可保留细胞活力并增加细胞产量
  • 无需中和

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