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用于科研、诊断和制药应用的细胞分离介质

在生物医学研究、诊断和制药领域,细胞分离介质被广泛应用于特定细胞群的分离和纯化。这些介质可以根据特定的特征或标记物,将目标细胞从复杂的混合物(如全血或组织样本)中分离出来。密度梯度离心法是根据梯度介质和样品颗粒的密度范围来分离生物颗粒中的特定细胞群。细胞分离工艺对于药物研发的各个领域都至关重要,包括药物发现、免疫疗法、再生医学和干细胞研究。

我们提供广泛的密度梯度介质产品组合,适用于白细胞、病毒、DNA、RNA、细胞器和许多其他应用的分离或提取。我们的产品线包括用于白细胞分离的Histopaque® 碘化梯度介质、用于哺乳动物细胞分离的多糖、用于哺乳动物细胞和细胞器分离的胶体二氧化硅介质以及用于DNA、病毒和蛋白质分离的无机盐。


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使用ACCUSPIN™ System-Histopaque® 介质分离细胞

搭配Histopaque®-1077的热销ACCUSPIN™系统采用辐照灭菌离心管,这些离心管可由多孔高密度聚乙烯屏障(“筛板”)分隔形成两个独立的腔室。这种系统可以将使用抗凝血剂处理过的全血添加到上层室中,而不会有与下层室所含Histopaque® 分离介质混合的风险。通过Histopaque® 密度梯度介质,可清晰地分离淋巴细胞和其他单个核细胞(如单核细胞)。随着红细胞聚集,粒细胞变得略微高渗,沉降速率加快,从而在ACCUSPIN™ 管底部形成沉淀。分离完成后,分离出的细胞可进一步表征、培养、分析或用于下游应用,如流式分析、细胞检测、分子分析、药物或细胞疗法开发。

Histopaque® 碘化梯度介质

Histopaque® 介质根据密度来分离不同类型的细胞,常用于制药和生物医学研究中特定细胞群的分离和纯化。Histopaque® 是一种无菌、经内毒素检测的聚蔗糖及泛影酸钠溶液,密度已精确调整。这些即用型分离介质有助于从少量全血中快速回收最多最好的活细胞。Histopaque® 分离介质常用于以下应用:分离外周血单核细胞(PBMC):Histopaque® 介质常用于从全血样本中分离 PBMC。PBMC 由淋巴细胞、单核细胞和其他有核细胞组成。在血液样本和离心管之间铺设 Histopaque® 介质,通过离心作用将 PBMC 与其他血液成分(如红细胞和血小板)分离。细胞分级分离:Histopaque® 介质可根据细胞密度不同将混合细胞群分为不同的层。先在离心管中铺上分离介质,然后小心地加入细胞悬浮液,离心作用会使不同类型的细胞明显分层。这种技术有助于分离和纯化细胞,以便进行进一步分析或实验。分离特定类型的细胞:Histopaque® 分离介质可以根据密度或特定标记物来分离特定的细胞群。小心地分层铺上分离介质和细胞悬浮液,离心分离出想要的目标细胞。对于研究特定细胞类型或需要富集稀有细胞群的研究人员而言,这项技术尤为重要。Histopaque® 产品在ISO 9001质量管理下生产,经过批次特定的性能测试,可始终如一地选择性分离血细胞系,优化分离存活的未畸变细胞,并将外来细胞干扰降至最低。

Percoll® 胶体二氧化硅介质

胶体二氧化硅介质是直径为 15-30 纳米并涂有聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的二氧化硅颗粒的胶体悬浮液,通常用于生物医学和制药研究中的细胞分离和纯化。PVP 可减少颗粒与生物材料的相互作用,并使胶体在等渗盐溶液中保持稳定。它的密度可以通过改变 Percoll® 溶液的浓度来调整,使得研究人员能够定制梯度以满足特定分离需求。我们的Percoll® 胶体渗透强度极低,随密度波动小,并且还可通过添加适量的蔗糖或缓冲液来轻松调节离心形成的梯度渗透压。Percoll® 梯度介质适用于细胞、细胞器、膜囊泡甚至一些病毒的等密度分离。

无机盐类

离子梯度介质也称为离子梯度或离子溶液,用于细胞分离技术中基于细胞的表面电荷或电学特性来分离细胞。这类介质会产生静电场或电荷差,使具有不同表面电荷的细胞得以分离。利用离子梯度介质的细胞分离技术包括电泳、介电泳(DEP)和等电聚焦(IEF)。具体介质和技术选择取决于待分离细胞的性质、所需的分离机制以及整体实验目标。我们由浓缩重金属盐组成的离子梯度介质专门用于核酸的等密度分离。其中氯化铯和硫酸铯是最广泛使用的重金属盐,梯度密度高达1.91 g/cm3。其他盐包括碘化钠、溴化钠和铷盐等。离子梯度介质和技术的选择与设计需要仔细考虑 pH 值、电导率、缓冲液成分和所研究细胞的电学特性等因素。

非离子碘化密度梯度介质

非离子碘化密度梯度介质是一种专用物质,适用于生物学、生物化学和临床诊断等多个领域的分离和纯化技术。这些介质通常以具有密度梯度的碘化化合物为基础,基于颗粒的不同密度将其分离。非离子碘化密度梯度介质的工作原理是密度梯度离心。在常规的密度梯度介质中,大多数碘化化合物的结构都是以三碘苯甲酸等碘化化合物为基础,带有亲水基团以增加其溶解度,从而在水溶液中形成连续的密度梯度。我们提供高密度的碘海醇溶液(如Nycodenz® 和Histodenz™),可最大限度降低生物颗粒的脱水。碘海醇无毒且不会被哺乳动物细胞代谢。

多元醇

我们的多元醇非离子梯度介质包括蔗糖梯度介质,广泛用于大分子的速率区带分离以及病毒和细胞器的等密度分离。其优点是性质稳定、惰性强和成本低,而缺点在于其溶液过于粘稠高渗。我们还提供甘油溶液,其密度低于相应的蔗糖溶液,有助于阻止某些酶发挥活性,并且极易通过真空处理去除。

多糖类介质

我们提供最常用的多糖介质Ficoll® ,可避免使用蔗糖溶液时出现的高渗透强度问题。Ficoll® 合成聚合物是一种聚乙烯吡咯烷酮包覆的聚乙二醇(PEG),常用于制备密度梯度溶液。Ficoll® 溶液广泛应用于各种生物和生化领域,特别是用于细胞分离。该溶液是由蔗糖分子与表氯醇聚合所得,可产生平均分子量为400,000的多糖。浓度低于20%(w/v)的Ficoll® 溶液密度为1.07 g/cm3 ,被认为具有渗透惰性。其主要缺点是Ficoll® 溶液比同类蔗糖溶液更粘稠。Ficoll® 溶液在各种制药研发过程中起到重要作用,有助于细胞、病毒和其他生物成分的分离、纯化和表征,从而推动药物发现、免疫疗法和其他制药应用的进步。该溶液通常用于细胞分离技术,尤其是从外周血或其他细胞源中分离单核细胞。将细胞悬浮液铺到 Ficoll® 密度梯度介质上并进行离心,可将淋巴细胞或单核细胞等目标细胞与其他细胞类型以及红细胞和粒细胞等不需要的成分分离开来。Ficoll® 溶液还可用于密度梯度离心技术,这是一种根据悬浮密度来分离颗粒或分子的技术。在离心过程中,颗粒或细胞通过 Ficoll® 梯度进行迁移,沉降在与其各自密度相对应的位置上,因此实现异质混合物中不同成分的分离和分馏。


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