Alacsony nyomású folyadékkromatográfia

Adszorpciós kromatográfia

Az adszorpciós kromatográfia, más néven folyadék-szilárd kromatográfia a hordozó, állófázis felületén történő adszorpció és deszorpció révén tartja vissza a vegyi anyagokat. Az adszorbens alkotja az állófázist, az oldott anyag pedig van der Waal-erők és sztérikus kölcsönhatások révén kötődik hozzá. Mivel az adszorpciós helyek általában az állófázis külső felületén vannak, viszonylag apró részecskéket használnak állófázisként. A szilícium-dioxid, a timföld, a faszén, a Florisil, a poliamidok, a kelit és a diatómaföld az általánosan használt adszorbensek.

Az osztott kromatográfia

A osztott kromatográfia úgy választja el a komponenseket, hogy két nem keverhető folyadék között osztja el őket. Az egyik a folyékony mozgófázis, míg a másik a szilárd hordozón álló folyadék. A szilárd hordozóként használt anyagok közé tartozik a szilikagél, a diatómaföld, a cellulóz, a politetrafluoretilén (PTFE) és a polisztirol. Az inert szilárd hordozó nagy felületet biztosít a folyadék állófázis számára.

Affinitáskromatográfia

Affinitáskromatográfia szelektív és reverzibilis kölcsönhatások, például antitest-antigén, enzim-szubsztrát vagy hormon-receptor párok révén választja el az összetevőket, a kölcsönhatásban lévő ágensek egyike az állófázis. Az "affinitásligandum" a kölcsönhatásba lépő faj szilárd hordozón, például akrilgyöngyökön, agarózon és Toyopearl-gyantákon immobilizálva van, és az affinitásoszlop állófázisaként szolgál.

Gélszűréses kromatográfia

Az "méretkizárásos kromatográfiaként is ismert módszer különböző méretű molekulákat, például különböző méretű és oligomer formájú fehérjéket választ el. Az állófázis egy gyantából álló, keresztkötésű gyöngyökből álló mátrix, amely meghatározott méretű pórusokat tartalmaz. A gélszűrő oszlopok poliakrilamid, agaróz, dextrán vagy ezek keverékéből készült gyöngyöket tartalmaznak. A kisebb analiteket úgy izolálja, hogy részleges vagy teljes hozzáférést biztosít az oszlopot töltő részecskék pórustérfogatához.

Hidrofób kölcsönhatás kromatográfia (HIC)

A hidrofób kölcsönhatás kromatográfia (HIC) a biomolekulákat a felületi hidrofobicitásuk különbségei alapján választja el. Alapja az oszlopgyantához kapcsolódó nem poláros hidrofób csoportok, például butil-, oktil- vagy fenilcsoportok kölcsönhatása a biomolekulák hidrofób csoportjaival. Széles körben használják a fehérjék elválasztására, miközben megőrzi biológiai aktivitásukat, mivel kevésbé denaturáló körülményeket és mátrixokat használ.

Ioncserélő kromatográfia (IEX)

Az ioncserélő kromatográfia a molekulákat a nettó felületi töltéseik különbségei alapján választja el. A mátrix, például cellulóz, szilícium-dioxid vagy sztirol-divinilbenzol felülete kovalensen kapcsolódik töltött funkciós csoportokhoz. A gyanta immobilizált ioncserélő csoportjai kölcsönhatásba lépnek az ellentétes töltésű molekulákkal. A kationcserélő kromatográfiában a mozgófázisban lévő pozitív töltésű fajok kötődnek a negatív töltésű ioncserélő gyantához. Az anioncserélő kromatográfiában a mobilfázisban lévő negatív töltésű fajok kötődnek az ioncserélő gyanta pozitív töltéseihez.

Kisnyomású folyadékkromatográfiás rendszer

A kisnyomású folyadékkromatográfiás (LPLC) rendszer általában egy oszlopból áll, amely az elválasztáshoz szükséges állófázissal van töltve, egy szivattyúból, amely a mobilfázist szabályozott áramlási sebességgel juttatja át az oszlopon, és egy detektorból, amely az oszlopból kilépő eluens mérésére szolgál.
Az LPLC-rendszerek egy injektáló rendszerrel is rendelkeznek a minta mozgófázisáramba történő bevezetéséhez, amely biztosítja a minta pontos és reprodukálható bevezetését. Néhány berendezés tartalmaz egy frakciógyűjtőt, amely összegyűjti az elválasztott komponenseket a további elemzéshez.