Kis molekulák HPLC
Kismolekulák elemzése
A kismolekula kis molekulatömegű (jellemzően 900 daltonnál kisebb molekulatömegű) vegyületet jelent. A kismolekulák néhány gyakori példája az aminosavak, lipidek, cukrok, zsírsavak, alkaloidok és mások.
A kismolekulák elválasztására különböző módszerek állnak rendelkezésre, többek között Nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC), folyadékkromatográfia (LC), gázkromatográfia (GC), thin-layer-chromatography (TLC) és a kapilláris elektroforézis (CE). Továbbá az azonosításuk lehetőségei közé tartozik a nukleáris mágneses rezonancia spektroszkópia (NMR) vagy tömegspektrometria (MS). A tömegspektrometriával kapcsolt folyadékkromatográfia (LC-MS) az utóbbi években a kismolekulák azonosításának kulcsfontosságú technikájává vált.
A lehető legjobb eredmények elérése a nagy teljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC), UHPLC vagy LC-MS kis molekulák elemzése során a legmegfelelőbb állófázis és mobilfázis körülmények kiválasztásától függ. Az analit kémiája kulcsfontosságú a legmegfelelőbb oszlopkémia kiválasztásához. Egyéb szempontok, mint például a sebesség, a mintamátrix és a vegyületek száma határozzák meg a legmegfelelőbb alapanyagot az állófázishoz.
Kiemelt kategóriák
Folyékony, gázos szűrés: üveg, rozsdamentes acél, műanyag szűrőtartók folyadékhoz, gázhoz. Fecskendő, in-line, vákuum, nyomás választék vár.
Pontos elválasztásokat érhet el széles HPLC-oszlopkollekciónkkal. Növelje a visszatartást, a felbontást és a szelektivitást. Rendeljen még ma.
Optimalizálja a mintavételt: Precíziós mintavevő fecskendők - standard, kiváló minőségű. Válasszon az alkalmazás, a kompatibilitás és a preferenciák alapján.
Aldrich® kémiai üvegáruk standard főzőpoharak, lombikok, csövek, reakcióedények, kromatográfiás oszlopok és egyedi üvegfúvási szolgáltatások teljes választékát kínálja.
Kismolekulák HPLC-je
A kismolekulák HPLC-analízise leggyakrabban fordított fázisú elválasztási módban történik. A poláros vegyületek elválasztására a hidrofil kölcsönhatású kromatográfia (HILIC) és a normálfázisú kromatográfia is alkalmas, a HILIC a preferált módszer. Az ionos vegyületek elválasztására ioncserélő elválasztási módok, szervetlen anionok vagy kationok esetében pedig ionkromatográfia is alkalmazható.
A HPLC oszlop vagy teljesen porózus szilika részecskékkel, felületesen porózus szilika részecskékkel, polimer részecskékkel van megtöltve, vagy monolitikus szilícium-dioxid pálcát használunk állófázisként. Ezenkívül alumínium-oxid, cirkónium-dioxid részecskéket és szénrészecskéket is használnak. A kis molekulák elválasztásához használt állófázis anyagának tipikus pórusmérete 60 Å - 160 Å tartományban van. HPLC esetén az állófázis tipikus részecskemérete 3 µm és 5 µm között mozog, UHPLC esetén kisebb, jellemzően 2 µm vagy annál kisebb részecskeméretet használnak. Az állófázishoz különböző oszlopszelektivitások (módosítások) kapcsolhatók. A fordított fázisú (RP) kromatográfiában leggyakrabban használt oszlopkémia a C18-as alkilánc. Mindazonáltal más módosítások, mint a C30, C8, fenil, pentaflourofenil és a polárisabb módosítások széles skálája, valamint az ioncserélő vagy királis tulajdonságokkal rendelkező módosítások szinte minden folyadékban oldódó vegyület elválasztását lehetővé teszik. Az RP-HPLC mobilfázisa jellemzően vizes pufferből vagy vízből és vízzel keverhető szerves oldószerekből, például acetonitrilből vagy metanolból áll.
HPLC mintaelőkészítés
A komplex és mátrixban gazdag minták, mint például az élelmiszerek, italok, kozmetikumok, biológiai minták és mátrixban gazdag gyógyszerformulák (pl. krém, szirup) hatékony mintaelőkészítési protokollokat igényelnek a nem kívánt összetevők eltávolításához és a kívánt analit szelektív kivonásához. Ez kritikus, ha nagyon kis részecskeméretű állófázist használnak, mint az UHPLC-ben, ahol 2 µm-es vagy annál kisebb részecskéket használnak. Gyakori mintaelőkészítési módszerek a folyadék-folyadék extrakció, a szilárd fázisú extrakció (SPE) és biológiai minták esetében a szűrés mellett a fehérje kicsapása is. A célvegyület szelektív elúciója és az előkoncentrálás mellett a minta előkészítésének fő célja a HPLC állófázis védelme a minta mátrixa által okozott eltömődéstől. A monolitikus szilícium-dioxid nagymértékben tolerálja a mátrixot, és sokkal kevesebb mintaelőkészítést igényel, mint a részecskés oszlopok.
Derivatizáció
Egyes molekulák esetében derivatizációra van szükség, akár a HPLC elválasztás előtt (oszlop előtt), akár utána (oszlop után). A derivatizálás a molekulákat származékukká alakítja át a jobb érzékenység vagy kromatográfiás visszatartás érdekében a HPLC-ben. A kívánt derivatizáláshoz kívánatos fizikai és kémiai tulajdonságokkal rendelkező kémiai reagenseket használnak.
Látogasson el dokumentumkeresőnkbe adatlapok, tanúsítványok és műszaki dokumentációk kereséséhez.
Kapcsolódó cikkek
- Chromolith® HPLC and UHPLC columns are made from monolithic silica with a bimodal pore structure using sol-gel technology.
- Review the effects of efficiency (plate number), retention, and selectivity factors on HPLC resolution. See how factors relate to particle and column characteristics via the HPLC resolution equation.
- Supel™ Carbon LC U/HPLC columns facilitate high-temperature and high-pressure separation of polar or charged compounds.
- LC-MS sensitivity optimization tips minimize contaminations, enhancing detection limits and spectrum clarity for accurate analysis.
- This study demonstrates the impact of various mobile phase modifiers on the separation; formate modifiers outperform acetate in terms of MS signals (or sensitivity) and chromatographic resolution.
- Mindent látni (178)
Kapcsolódó protokollok
- Chromolith® HPLC and UHPLC columns are made from monolithic silica with a bimodal pore structure using sol-gel technology.
- Review the effects of efficiency (plate number), retention, and selectivity factors on HPLC resolution. See how factors relate to particle and column characteristics via the HPLC resolution equation.
- Supel™ Carbon LC U/HPLC columns facilitate high-temperature and high-pressure separation of polar or charged compounds.
- LC-MS sensitivity optimization tips minimize contaminations, enhancing detection limits and spectrum clarity for accurate analysis.
- This study demonstrates the impact of various mobile phase modifiers on the separation; formate modifiers outperform acetate in terms of MS signals (or sensitivity) and chromatographic resolution.
- Mindent látni (88)
További cikkek és protokollok keresése
Hogyan tudunk segíteni
Kérdés esetén kérjük, küldjön ügyféltámogatási kérelmet
vagy beszéljen ügyfélszolgálatunkkal:
Emailt küldjön [email protected]
vagy hívja a +1 (800) 244-1173-as telefonszámot
További támogatás
- Chromatogram Search
Use the Chromatogram Search to identify unknown compounds in your sample.
- Számológépek és alkalmazások
Web Toolbox - tudományos kutatási eszközök és források az analitikai kémia, az élettudomány, a kémiai szintézis és az anyagtudomány számára.
- Customer Support Request
Ügyfélszolgálat, beleértve a megrendelésekkel, termékekkel, számlákkal és a weboldal technikai kérdéseivel kapcsolatos segítséget.
- FAQ
Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?