Transzfekció és génszerkesztés
A transzfekció a nukleinsavak eukarióta sejtekbe történő bejuttatásának folyamata. A sejtek lehetnek stabilan transzfektáltak a DNS-nek a genomjukba történő integrálása céljából, vagy tranziens módon transzfektáltak az átmeneti ideig tartó fehérjeexpresszió céljából. A sejtek transzfektálására kémiai, fizikai és biológiai módszereket használnak, amelyek lehetővé teszik a génműködés és a génexpresszió tanulmányozását a sejtkörnyezetben. Az alkalmazások közé tartozik a génterápia, az indukált pluripotens őssejtek (iPSC) előállítása, a géncsendesítés RNS interferenciával (RNAi), valamint a terápiás antitestek és fehérjék előállítása.
Kapcsolódó termékek
Kiemelt kategóriák
Tekintse meg a transzfekciós reagensek, szelekciós eszközök és protokollok átfogó csomagját, amikor munkája megbízható sejttranszfekciós eredményeket követel meg.
A Sigma-Aldrich® Advanced Genomics a legmodernebb génszerkesztési és génmódosítási technológiákat kínálja, beleértve a CRISPR, Cas9 és RNAi technológiákat.
Gyakori transzfekciós módszerek
- Lipidek és liposzómák: A kationos lipidek DNS-t vagy RNS-t tartalmazó liposzómákat képeznek a szállításhoz. Ezek a liposzómák összeolvadnak a sejtmembránnal és nukleinsavat juttatnak a sejtbe.
- Kalcium-foszfát: A kalcium-foszfát megkönnyíti a DNS kötődését a sejtfelszínhez, így a genetikai anyag endocitózis útján juthat be a sejtbe.
- Kationos polimerek: A polimer alapú transzfekcióban az exogén DNS komplexeket képez kationos polimerekkel, például polietilénimin (PEI), amelyek endocitózissal jutnak be a gazdasejtbe.
- Lentivírusos transzdukció: A sejteket módosított lentivírusvektorokkal fertőzik meg, amelyek a vírus RNS-ét kettős szálú DNS-é alakítják át, hogy a gazdagenomba integrálódhassanak a transzportáláshoz.
- Mikroinjekció: A célsejteket először mikroszkóp alatt helyezik el. A nukleinsavat ezután egy finom üvegkapilláris tű segítségével közvetlenül a citoplazmába vagy a sejtmagba fecskendezik.
- Elektroporáció: A sejteket nagy intenzitású elektromos áramnak tesszük ki, amely destabilizálja a membránokat, így növelve azok áteresztőképességét a génszállításhoz.
A transzfekciót rutinszerűen alkalmazzák a génszerkesztési és géncsendesítési technikákban, amelyek javították a komplex biológiai folyamatok megértését, és lehetővé tették a génterápia alkalmazását a betegségek kezelésére.
- A CRISPR-Cas rendszerek egy olyan bakteriális védelmi mechanizmust használnak ki, amely a genetikai CRISPR-eket (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) Cas (CRISPR-asszociált) endonukleázokkal párosítva a genomi DNS célzott helyeken történő elvágására és a gének eltávolítására vagy cseréjére in vivo.
- A mesterséges cink-ujj nukleázok (ZFN-ek) DNS-kötő doménekből és endonukleázokból épülnek fel, és génszerkesztés céljából célzott helyeken hasítják a DNS-t.
- Az RNSi reagensek, mint például a rövid hajtű RNS-ek (shRNS-ek) és a kis interferáló RNS-ek (siRNS-ek) a génátírási szinteket korlátozzák a géncsendesítéshez a transzkripció elnyomásával vagy a szekvencia-specifikus RNS-lebontási folyamatok aktiválásával.
Látogasson el dokumentumkeresőnkbe adatlapok, tanúsítványok és műszaki dokumentációk kereséséhez.
Kapcsolódó cikkek
- A transzfekció genetikai anyagot juttat a sejtekbe, segítve a génexpresszió és a sejtbiológia kutatását.
- Browse our convenient transfection reagent selection guide to match the best reagent for your specific cell line and application needs.
- Automation ensures reproducible results in high-throughput assays like cell transfection, reducing manual handling variations.
- Small inhibitory RNAs offer easy gene expression knockdown in mammalian cells, revolutionizing gene research.
- Tippeket kaphat a lentivírusok kezeléséhez, a kísérlet beállításának optimalizálásához, a lentivírus részecskék titrálásához és a hasznos termékek kiválasztásához a transzdukcióhoz.
- Mindent látni (20)
Kapcsolódó protokollok
- Universal Transfection Reagent enables efficient nucleic acid delivery into various cells, compatible with different cell culture conditions.
- Jegyzőkönyvek az X-tremeGENE™ transzfekciós reagensekkel történő transzfekcióhoz gyakori sejtvonalak transzfektálásához
- Sejtek előkészítése a transzfekcióhoz A sejteket kb. 24 órával a transzfekció előtt lemezelje le, és győződjön meg arról, hogy a sejtek optimális koncentrációban vannak (70-90%-os konfluencia).
- Calcium phosphate transfection is a common method for the introduction of DNA into eukaryotic cells. This protocol can be optimized for use with a wide variety of cell types.
- A lipidhólyagok előállítása hidratálási és méretezési lépéseket foglal magában, amelyek a lipidösszetételtől függetlenül alkalmazhatók.
- Mindent látni (26)
További cikkek és protokollok keresése
Hogyan tudunk segíteni
Kérdés esetén kérjük, küldjön ügyféltámogatási kérelmet
vagy beszéljen ügyfélszolgálatunkkal:
Emailt küldjön [email protected]
vagy hívja a +1 (800) 244-1173-as telefonszámot
További támogatás
- Chromatogram Search
Use the Chromatogram Search to identify unknown compounds in your sample.
- Számológépek és alkalmazások
Web Toolbox - tudományos kutatási eszközök és források az analitikai kémia, az élettudomány, a kémiai szintézis és az anyagtudomány számára.
- Customer Support Request
Ügyfélszolgálat, beleértve a megrendelésekkel, termékekkel, számlákkal és a weboldal technikai kérdéseivel kapcsolatos segítséget.
- FAQ
Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?Ügyfeleink kényelme érdekében ezt az oldalt géppel fordítottuk le. Törekedtünk arra, hogy ez a fordítás pontos legyen. A gépi fordítás azonban nem tökéletes. Ha nem elégedett a gépi fordítással, kérjük, tekintse meg az angol nyelvű változatot.