Szekvenálás
A DNS- vagy RNS-szálban lévő nukleinsavak összetételének és sorrendjének meghatározásának képessége mélyreható hatással van a modern genetika megértésére és számos olyan területre, amely elengedhetetlen a betegségek kutatásához és az összes szervezet jobb megértéséhez. A nukleinsavak szekvenálásának képessége nemcsak egy szervezet genetikai kódjának megfejtéséhez hasznos, hanem további molekuláris technológiákkal kombinálva a kutatók számára egy hatékony eszközt biztosít a DNS-szekvenciák egyszerű manipulálásához és e változások szekvenálással történő ellenőrzéséhez. Mivel a kódoló DNS a fehérjék kódolt információjaként funkcionál, a kutatók ma már olyan rekombináns fehérjéket tervezhetnek testre szabottan, amelyek számos funkcionális elemet tartalmaznak, és amelyeket széles körben használnak ugyanilyen nagyszámú fontos kutatási kérdés megválaszolására. A teljes genom szekvenáláshoz szükséges további reagensek és útmutatók a Next-Generation Sequencing forráson találhatók.
Kapcsolódó termékek
Sanger-szekvenálás
Az analitikai kémiai módszerekkel már korán meg lehetett határozni a nukleinsavak összetételét. Fred Sanger és munkatársai azonban olyan módszereket dolgoztak ki - kezdetben sugárzással jelölt emésztett fragmentumok és kétdimenziós frakcionálás segítségével -, amelyekkel az első teljes nukleinsekvenciák némelyikét meg tudták adni. A terület fejlődése több évtizeden át folytatódott, és minden egyes fejlesztés a szekvenált fehérjék és genomok egyre növekvő könyvtárát gyarapította. E fejlesztések közé tartozik a nukleotidok hossz szerinti elválasztása gélelektroforézissel, majd kapilláris elektroforézissel. Emellett a fluoreszcensen jelölt nukleotidok beépítése és az egyes nukleinsavtöredékek automatizált számítógépes elemzése ma már mind meghatározzák a modern Sanger-szekvenálási módszert.
DNS-szekvenálási módszertan
Míg a DNS-szekvenálás módszerei folyamatosan fejlődtek a technológia kezdete óta, számos alapvető összetevőre még mindig szükség van, és azokat a modern DNS-szekvenálási platformok is használják. A DNS-előkészítés jellemzően magában foglalja a DNS izolálását és tisztítását a gazdaszervezetből. További kritikus komponenseket, köztük a szabad DNS-bázisokat, a DNS-primereket, a fluoreszcens címkéket tartalmazó módosított DNS-bázisokat (terminátor bázisok) és a DNS-polimerázt egyetlen edénybe adják össze. Az ezeket a komponenseket tartalmazó edényben egy sor melegítési és hűtési lépésen keresztül a teljes hosszúságú DNS-szekvenciához képest kis DNS-szekvenciákból álló könyvtárat állítanak elő, amelyek mindegyike fluoreszcens végcímkézett terminátor bázissal végződik. A fluoreszcensen végcímkézett nukleotidokat tartalmazó új DNS-szálakat hosszuk szerint szétválasztjuk, egy kapilláris csövön keresztül vezetjük, és méret szerint rendezzük. Ezután lézerrel gerjesztik a fluoreszcens bázist az egyes szálakon, miközben egy kamera rögzíti a jelet. Végül pedig egy számítógépet használnak általában arra, hogy az összegyűjtött információt a teljes hosszúságú DNS-szekvenciává állítsák össze.
Látogasson el dokumentumkeresőnkbe adatlapok, tanúsítványok és műszaki dokumentációk kereséséhez.
Kapcsolódó cikkek
- Validate CRISPR gene editing experiments easily with Sigma-Aldrich® T7E1 mismatch detection kit, ensuring successful editing.
- Understand the benefits of ultrapure water versus DEPC treatment in DNA and RNA experiments to ensure high purity and integrity without risks.
- Improve NGS performance and reliability by optimizing water quality at every step of the workflow, from fragmentation to cleaning to sequencing.
- Amino Acid Codon Wheel for fast RNA translation. Find which amino acid is translated from your RNA sequence quickly and easily.
- Use of MULTI-seq lipid-modified oligos, protocol, and troubleshooting guide for PCR Assays and Sequencing applications.
- Mindent látni (7)
Kapcsolódó protokollok
- Ismerje meg a Sanger-szekvenálás lépéseit vagy a láncvégződési módszert, valamint a DNS-szekvenálás működését és a Sanger-szekvenálás eredményeinek pontos leolvasását a kutatásaihoz.
- Mindent látni (2)
További cikkek és protokollok keresése
Hogyan tudunk segíteni
Kérdés esetén kérjük, küldjön ügyféltámogatási kérelmet
vagy beszéljen ügyfélszolgálatunkkal:
Emailt küldjön [email protected]
vagy hívja a +1 (800) 244-1173-as telefonszámot
További támogatás
- Számológépek és alkalmazások
Web Toolbox - tudományos kutatási eszközök és források az analitikai kémia, az élettudomány, a kémiai szintézis és az anyagtudomány számára.
- Customer Support Request
Ügyfélszolgálat, beleértve a megrendelésekkel, termékekkel, számlákkal és a weboldal technikai kérdéseivel kapcsolatos segítséget.
- FAQ
Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?Ügyfeleink kényelme érdekében ezt az oldalt géppel fordítottuk le. Törekedtünk arra, hogy ez a fordítás pontos legyen. A gépi fordítás azonban nem tökéletes. Ha nem elégedett a gépi fordítással, kérjük, tekintse meg az angol nyelvű változatot.