Fehérjekoncentráció és puffercsere
A fehérjekoncentrációt és a puffercserét gyakran használják a fehérje- és antitesttisztítás, a biofeldolgozás és a proteomikai elemzési munkafolyamatok során. A makromolekuláris oldatok, például fehérjék, enzimek, antitestek és vírusok mintakészítése során gyakran nagy mennyiségű hígított fehérjék és más biomolekulák keletkeznek olyan pufferekben, amelyek nem kompatibilisek a későbbi folyamatokkal vagy detektálással. A minta extrakcióját követően a hígított fehérjéket gyakran koncentrálni és tisztítani kell az elemzés vagy felhasználás előtt.
Jellemzők kategóriái
Centrifugális és nyomás alatti ultraszűrő berendezések biológiai és környezeti minták fehérjekoncentrálására, sótalanítására, puffercserére, szeparálására és diafiltrálására a továbbfeldolgozó alkalmazások előkészítése céljából.
Tudjon meg többet a nagy tisztaságú biológiai pufferekről különböző formulákban és csomagolási formákban, hogy kiváló oldatstabilitást és pH-szabályozást érjen el a bioprocessz munkafolyamatok alkalmazásaihoz.
Dializátorok, centrifugális ultraszűrő berendezések és kevert cellák puffercseréhez...
Centrifugális és nyomás alatti ultraszűrő berendezések magas visszanyerési fehérjekoncentrációhoz...
Fehérje koncentrálás
A fehérje koncentrálására több módszer is létezik, többek között a porózus membránszűrőkkel történő szűrés, a dialízis hiperozmotikus oldatokban és a kicsapás/sózás. Az ultraszűrés olyan kényelmes módszert biztosít, amely félig áteresztő membránokat használ a fehérjék nyomás vagy centrifugális erő alatti koncentrálására, a fehérjék minimális denaturációja, inaktiválása és lebomlása mellett. Ezzel a technikával a felesleges folyadék áthalad a szűrőn, miközben a célfehérje visszatartásra kerül, így a minta térfogatának csökkentésével nő a fehérjekoncentráció.
Fehérje dúsítás
A fehérje dúsítás során a biológiai mintában lévő fehérjék meghatározott csoportjait vagy típusait koncentrálják további elemzés céljából. A fehérjedúsítási módszereket az alacsonyabundanciájú fehérjék izolálására és a minta összetettségének csökkentésére használják. A dúsítással a célfehérjéket elkülönítik és koncentrálják a jobb downstream proteomikai elemzés érdekében. Az ultraszűrést gyakran használják a fehérjedúsítás során a fehérjék molekulatömeg szerinti osztályainak elkülönítésére.
Puffercsere és sótalanítás
A purifikált fehérjéket gyakran át kell helyezni egy megfelelő pufferbe a további elemzéshez. A puffercsere, a sótalanítás és a detergens eltávolítása többek között a következő módszerekkel végezhető:
- Dialízis: Az olyan kis áteresztő molekulákat, mint a sók, mosószerek, oldószerek és egyéb szennyeződések eltávolítása a membránon való átjutási képességük alapján történik.
- oszlopkromatográfia: A sókat gélszűrő oszlopok segítségével távolítják el, amelyek méretkizárásra támaszkodnak az elválasztás során.
- Diafiltráció: A sókat, mosószereket és egyéb szennyeződéseket molekulaméretük alapján porózus ultraszűrő membránok segítségével nyomás vagy centrifugális erő hatására távolítják el.
Látogasson el dokumentumkeresőnkbe adatlapok, tanúsítványok és műszaki dokumentációk kereséséhez.
Kapcsolódó cikkek
- Large-volume centrifugal filter devices are a convenient alternative to stirred cell ultrafiltration devices for purifying proteins from large volumes of solution.
- Desalting at laboratory scale is a well-proven, simple, and fast method that will rapidly remove low molecular weight contaminants at the same time as transferring the sample into the desired buffer in a single step.
- Amicon Stirred Cells concentrate and buffer-exchange macrosolutes efficiently with pressure-driven filtration.
- For filtering large volumes of biological solutions, we manufacture specialized equipment including centrifugal filtering devices, discs, cells and solvents.
- Explore ultrafiltration membrane principles and benefits for protein sample preparation, including solvent exchange and sample concentration.
- Mindent látni (8)
Kapcsolódó protokollok
- Ezek a táblázatok segítenek eligazodni számos gyakori pufferoldat pH és pKa szerinti elkészítésében. Válasszon egy olyan puffert, amelynek pH-tartománya az adott vizsgálathoz megfelelő.
- This page shows how to perform sample desalting, buffer exchange and concentration for affinity chromatography of tagged proteins.
- User guide for Amicon® Stirred cells including features, operation, specifications, and troubleshooting.
- Detergents are frequently used to solubilize proteins and nucleic acids during purification, but the presence of detergents may interfere with downstream analyses.
- If an antibody must be purified from a small sample volume (0.5-10 mL), then the Amicon® Pro Purification System is recommended.
- Mindent látni (21)
További cikkek és protokollok keresése
Hogyan tudunk segíteni
Kérdés esetén kérjük, küldjön ügyféltámogatási kérelmet
vagy beszéljen ügyfélszolgálatunkkal:
Emailt küldjön [email protected]
vagy hívja a +1 (800) 244-1173-as telefonszámot
További támogatás
- Chromatogram Search
Use the Chromatogram Search to identify unknown compounds in your sample.
- Számológépek és alkalmazások
Web Toolbox - tudományos kutatási eszközök és források az analitikai kémia, az élettudomány, a kémiai szintézis és az anyagtudomány számára.
- Customer Support Request
Ügyfélszolgálat, beleértve a megrendelésekkel, termékekkel, számlákkal és a weboldal technikai kérdéseivel kapcsolatos segítséget.
- FAQ
Explore our Frequently Asked Questions for answers to commonly asked questions about our products and services.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?