HPLC pufferek
A pufferek egy gyenge sav és konjugált bázisának, vagy egy gyenge bázis és konjugált savának oldatai. Az analitikai kémiában a puffereket általában a fordított fázisú nagy teljesítményű folyadékkromatográfiában (RP-HPLC) használják, amikor a minta savas vagy bázikus funkciós csoportokat tartalmaz. A pufferek mérséklik a hidrogén/hidrónia és a hidroxidionok hatását, és ezáltal csökkentik a pH-ingadozást.
Termékek
Kapcsolódó források
- Brochure: LC-MS Resource Guide
A Comprehensive Portfolio for Consistent Results in Routine and Advanced LC-MS applications
- HPLC módszerátviteli számológép
Könnyen átviheti a módszert a HPLC-oszlopok között (skálázás a mikrofurat és a preparatív tartomány között), a 2 oszlop mérete és az aktuális módszertani feltételek alapján.
Mobil fázisú pufferek
A pufferek megfelelő kiválasztása a pufferfajták, az ionerősség és a pH tekintetében a legkritikusabb lépés az RP-HPLC módszerfejlesztés során ionos analitok esetében. Az ionos analit visszatartását az RP-HPLC-ben alapvetően befolyásolja a mozgófázis pH-ja. Ezért a mobilfázis pH-jának szabályozása az RP-HPLC-ben az egyik legfontosabb paraméter a hatékony analit-elválasztáshoz.
A szilícium-dioxid-alapú oszlopokon végzett fordított fázisú elválasztások tipikus pH-tartománya 2 és 8 között van. A puffer pKa értékének közel kell lennie a kívánt pH-hoz, mivel a pufferek pKa értéküknél szabályozzák legjobban a pH-t. Ökölszabályként ideális olyan puffert választani, amelynek pKa értéke <2 egységgel nagyobb, mint a kívánt mobilfázis pH-ja. HPLC minőségű puffereket kínálunk széles pH-tartományban, minden laboratóriumi kromatográfiás követelményhez.
A HPLC-puffer kiválasztásakor figyelembe veendő tényezők
Kémiai tisztaság.
A mobilfázis adalékanyagok (pufferek, sók, savak és bázisok) minőségét a HPLC-kísérletben használt szerves oldószerekkel együtt a detektor érzékenységéhez és az elúciós protokollhoz kell igazítani. Az optimális kromatográfiához kiváló minőségű oldószerek és reagensek használata ajánlott.
Kémiai kompatibilitás
A puffer összetételét a mobilfázis pH-jával együtt az oszlopház anyagával és az állófázis jellegével összhangban kell megválasztani. Ezáltal elkerülhető az oszlop hardverének és ágyának károsodása.
Pufferoldhatóság
A puffer alapvetően teljesen vízoldható legyen, és ne csapódjon ki. A puffer koncentrációját gondosan kell megválasztani, hogy elkerülhető legyen a csapadék kicsapódása magasabb koncentrációknál, amikor a puffer a szerves oldószerrel keveredik. Ha elhanyagoljuk, ez működési problémákat okozhat a szivattyúkban és a HPLC-oszlop eltömődését idézheti elő.
Puffer erőssége
Az állófázissal gyenge kölcsönhatást mutató eluens csak a gyengén kötött analiteket képes eluálni az oszlopról, míg az erős kölcsönhatás az erősen kötött mintamolekulák eluálását okozza. A különböző oldószerek elúciós vagy oldószererőssége az alkalmazott állófázis típusától függ. Az elúciós erősség után a puffer viszkozitása és UV-abszorbanciája is fontos szerepet játszik a HPLC-analízisekben való alkalmazhatóság szempontjából.
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?Ügyfeleink kényelme érdekében ezt az oldalt géppel fordítottuk le. Törekedtünk arra, hogy ez a fordítás pontos legyen. A gépi fordítás azonban nem tökéletes. Ha nem elégedett a gépi fordítással, kérjük, tekintse meg az angol nyelvű változatot.