Pyrogen tesztelés
A pirogének vizsgálata kritikus lépés a parenterális gyógyszeripari termékek és orvostechnikai eszközök biztonságának biztosításában. Ez része a kötelező felszabadítási vizsgálatoknak a pirogén anyagok által kiváltott életveszélyes lázreakciók elkerülése érdekében. A monocita aktivációs teszt (MAT) képes mind az endotoxin, mind a nem endotoxin pirogének kimutatására egyetlen in vitro tesztben.
Termékek
Monocyta aktivációs teszt (MAT)
Az endotoxinok és a nem endotoxin pirogének kimutatására használt MAT a parenterális termékekben, például gyógyszerekben és orvostechnikai eszközökben, ad an in vitro alternatívát nyújt a hagyományos állatkísérletek helyett a szabályozási irányelveknek megfelelően.
A nyúl pirogén tesztet és a Limulus amőbocita lizátum (LAL) tesztet széles körben használják a pirogének kimutatására. Mindkét módszerhez állatokat használnak, és bizonyos korlátokat mutatnak. A nyúl pirogén teszt nem eléggé megbízható, mivel az állati reakció nagymértékben eltérhet az emberi reakciótól. A LAL-tesztben csak endotoxinokat mutatnak ki, ami biztonsági kockázatot jelent, mivel figyelmen kívül hagyja a vizsgált mintában esetleg jelen lévő nem endotoxin pirogéneket.
Ezek a korlátok kiküszöbölésére a European Pharmacopoeia 2010-ben a Nyúl-pyrogén-tesztet felváltó kompendialis módszerré (EP 2. fejezet.6.30) helyettesítésére, és az FDA iparnak szóló útmutatójában is megemlíti.
Kérem, vegye figyelembe: Az Európai Gyógyszerkönyv Bizottság a 3R-elvvel összhangban úgy döntött, hogy megszünteti a nyúl-pyrogén tesztet, mivel a MAT a legjobb alternatív lehetőség.
PyroMAT® in vitro in vitro teszt endotoxin és nem endotoxin pirogének kimutatására
A PyroMAT® rendszer a Mono-Mac-6 sejtvonalon és az IL-6 leolvasáson alapul. A monocita-aktivációs teszt minden előnyét kínálja a sejtvonal használatának előnyeivel kombinálva.
- A pirogének széles körének kimutatása: a betegbiztonság akkor biztosított, ha a pirogének teljes körét vizsgáljuk. A nyúl pirogénteszthez (RPT) hasonlóan a MAT is hatékony mind az endotoxin, mind a nem endotoxin pirogének kimutatására.
- A vizsgálható termékek körének bővítése: a leggyakrabban alkalmazott módszerek, az RPT, a bakteriális endotoxin teszt (BET) vagy a LAL korlátozottak az általuk vizsgálható terméktípusok tekintetében. A MAT nagyobb rugalmasságot kínál az alkalmazások tekintetében.
- In vitro vizsgálat, amely az emberi immunreakciót utánozza: a robusztus előrejelző modellhez, amely csökkenti az állatok fogyasztását.
- Megfelelés a nemzetközi előírásoknak és irányelveknek: összhangban az ipar és a szabályozó hatóságok etikai trendjeivel, hogy csökkentsék az állatokon végzett vizsgálatok használatát.
- Standardizált reaktivitás és nagy érzékenység (LOD 0,05 EU/mL). A használatra kész sejtvonal kényelme csökkenti a munkaigényes laboratóriumi munkát, és elkerüli a sejttenyésztő laboratórium szükségességét.
- Kvalifikált sejtek: amellett, hogy a MAT nemzetközi validálásában idézik, a Mono-Mac-6 sejtek az összes felszíni Toll-szerű receptor (TLR) expressziója szempontjából minősítettek, így biztosítva a pirogének széles körének kimutatását.
Non-endotoxin pirogén pozitív kontrollok
Az Európai Gyógyszerkönyv 2.6.30. fejezete (Monocita aktivációs teszt) előírja, hogy az előkészítő vizsgálatnak tartalmaznia kell "legalább 2 nem endotoxin ligandumot a toll-szerű receptorokhoz [...]. Az alkalmazott nem endotoxin pirogének kiválasztásának tükröznie kell a vizsgált készítmény legvalószínűbb szennyeződését (szennyeződéseit)."
Az e követelménynek való megfelelés érdekében a pozitív kontrollok kibővített választékát biztosítjuk:
- A gyógyszeripari gyártási folyamatokban általában előforduló többféle szennyeződést (Gram-negatív és Gram-pozitív baktériumok, vírusok és mikoplazma) tükröző pozitív kontrollok.
- Tárcsáznak több monocitikus, útdíjszerű receptort (TLR)
Ligand | Célpont TLR | A visszavert szennyezőanyag típusa | ||
|---|---|---|---|---|
HKSA | ||||
HKSA /p> | TLR2 | Gram-pozitív baktérium | ||
Flagellin | TLR5 | Gram-pozitív és Gram-negatív baktériumok | TLR5 | Gram-pozitív és Gram-negatív baktériumok |
PAM3CSK4 | TLR2/1 | Gram-pozitív és Gram-negatív baktériumok | ||
Reszikimod | TLR7/8 | Vírus | ||
FSL1 | TLR2/6 | Mykoplazma |
- A pirogének széles spektrumának kimutatása: A nyúl pirogénteszthez (RPT) hasonlóan a MAT mind az endotoxinokat, mind a NEP-eket kimutatja.
- A vizsgálható termékek kibővített köre: a leggyakrabban alkalmazott módszerek, az RPT, a bakteriális endotoxin teszt (BET) és a LAL korlátozottan alkalmazható terméktípusok. A MAT nagyobb rugalmasságot kínál az alkalmazások tekintetében.
- Az emberi immunreakciót utánzó in vitro vizsgálat: a robusztus előrejelző modellhez, amely csökkenti az állatok fogyasztását.
- Megfelelés a nemzetközi szabályozásoknak és irányelveknek: összhangban az ipar és a szabályozó hatóságok etikai trendjeivel, hogy csökkentsék az állatokon végzett kísérletek használatát.
- 8 donorból származó kriokonzervált vér összevontan: hogy a lehető legközelebb álljon a pirogénekre adott emberi immunreakcióhoz.
Optimalizálja vagy egyszerűsítse pirogén tesztelési módszerét a könnyű validálás és a költséghatékony tesztelés érdekében szolgáltatási ajánlatainkkal:
- Alkalmazási szolgáltatások
- Validálási szolgáltatások
- Képzési szolgáltatások
A nyúl, LAL és MAT pirogén tesztek összehasonlítása | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| nyúl | LAL | MAT (PyroDetect System) | MAT (PyroMAT® System) | MAT (PyroMAT® System) | |||
| Vizsgálat típusa | In vivo | Ex vivo | In vitro (kriokonzervált teljes vér) | In vitro (Monocita sejtvonal) | |||
| Élettani fogyasztás/th> | ++ | + | - | - | |||
| Szennyezőanyagok kimutatása | Endotoxinok e.g. Gram-negatív baktériumokból származó LPS | + | + | + | + | ||
| + | - | + | + | ||||
| Élesztők és penészgombák | + | - | + | + | |||
| Vírusok | +/- | - | + | + | |||
| Alkalmazás | gyógyszerek | + | + | + | + | + | |
| Biológiai termékek | + | +/- | + | + | + | ||
| Egészségügyi eszközök | + | +/- | + | + | |||
| Sejtterápiák | - | +/- | + | + | |||
Hiányos erőforrások a MAT végrehajtásához és érvényesítéséhez. Mi megtesszük Önnek!
Megvalósíthatósági tanulmány, módszerfejlesztés, validálás & képzési szolgáltatások a pirogén tesztelés megvalósításának támogatására, beszélje meg Pyrogen Testing Experts.
.Kapcsolódó termékforrások
- Brochure: PyroMAT® and PyroDetect
Used to detect a broad range of pyrogens in parenteral products such as pharmaceuticals, biopharmaceuticals or medical devices, the MAT gives an in vitro alternative to conventional animal testing in accordance with regulatory guidelines.
- Non-endotoxin Pyrogen Positive Controls
Meet regulatory requirements for Monocyte Activation Test (MAT) with our non-endotoxin pyrogen controls designed for the PyroMAT® system
Kapcsolódó videók
Az olvasás folytatásához jelentkezzen be vagy hozzon létre egy felhasználói fiókot.
Még nem rendelkezik fiókkal?Ügyfeleink kényelme érdekében ezt az oldalt géppel fordítottuk le. Törekedtünk arra, hogy ez a fordítás pontos legyen. A gépi fordítás azonban nem tökéletes. Ha nem elégedett a gépi fordítással, kérjük, tekintse meg az angol nyelvű változatot.
