Kit per il test immunoenzimatico (ELISA)

Un test ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) è un test immunologico basato su piastre multipozzetto in cui uno dei componenti del test, solitamente un anticorpo o un campione, viene adsorbito su una superficie solida, in questo caso una piastra. Grazie alla loro capacità di rilevare gli analiti in modo rapido, quantitativo e sensibile a costi relativamente contenuti, i test ELISA rappresentano uno dei formati di analisi più semplici da eseguire. Inoltre, la facilità di adattamento di un ELISA a un metodo di screening ad alta produttività consente ai ricercatori di analizzare un gran numero di campioni in un unico ciclo.
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ELISA a sandwich, diretti e competitivi
I nostri ELISA rappresentano un metodo pratico e intuitivo per lo studio dei biomarcatori proteici solubili in una varietà di matrici, tra cui siero, plasma, supernatante di coltura cellulare o lisato. La nostra offerta di ELISA comprende oltre 1.000 test per uso esclusivamente di ricerca, relativi a un'ampia varietà di specie, tra cui esseri umani, topi, ratti e vari altri modelli animali (da allevamento e da compagnia). Ogni test viene fornito con un protocollo specifico e i reagenti necessari per l'esecuzione su una piastra a 96 pozzetti. I test ELISA sono disponibili principalmente in formato a 96 pozzetti e il fornitore fornisce i reagenti necessari per rilevare e quantificare il target. Esistono diversi metodi ELISA, tra cui sandwich, diretto e competitivo.
Il test sandwich utilizza una coppia di anticorpi monoclonali (mAb) contro epitopi diversi dello stesso bersaglio. Il mAb primario, legato alla piastra, estrae la proteina dalla soluzione, mentre il secondo mAb viene utilizzato per completare il “sandwich” e fornire il segnale che indicherà la presenza del bersaglio. Una quantità nota della versione ricombinante della proteina è fornita con il kit, consentendo all'utente di creare una curva Standard rispetto alla quale verrà interpretato il segnale proveniente da uno dei campioni. La maggior parte del nostro portafoglio è in questo formato ELISA a sandwich.
I test ELISA diretti e competitivi sono più rari. Il test diretto utilizza un singolo mAb per rilevare il campione che è legato alla piastra. Il mAb viene quindi legato da un anticorpo secondario reporter per fornire il segnale.
Il test competitivo presenta una quantità nota del biomarcatore pre-legato alla piastra. Un anticorpo marcato viene co-incubato con il campione, il quale “assorbe” l’anticorpo a seconda della concentrazione del biomarcatore bersaglio nel campione. L’anticorpo libero è quindi in grado di legarsi all’antigene sulla piastra e fornire un segnale dopo che il campione è stato lavato via. In questo caso, il segnale è inversamente proporzionale alla concentrazione del biomarcatore bersaglio.
ELISA Conferma® e software di adattamento della curva immunologica Belysa®
Il marchio Conferma® ELISA comprende test sandwich progettati per ridurre al minimo la variabilità da lotto a lotto a livello dei reagenti critici, una preoccupazione fondamentale per gli utenti dei test. La valutazione dei singoli lotti di reagenti critici con una serie di tecniche analitiche allineate a un protocollo dettagliato di controllo qualità (QC) ci consente di controllare e limitare la variabilità nel tempo.
Per consentire agli scienziati di valutare la riproducibilità del loro metodo, abbiamo inoltre progettato il software Belysa® per l'adattamento delle curve di immunoanalisi. Con questo strumento, un utente può esaminare il proprio test immunoanalitico a sandwich per assicurarsi che parametri quali %CV (coefficiente di variazione) e %Recupero siano quelli previsti. Successivamente, può procedere al confronto delle curve standard di più piastre per confermare che il proprio metodo sia coerente.
Risorse correlate
- Article: ELISA Protocols
In questo articolo vengono presentati 4 protocolli ben noti per i saggi ELISA, ossia la procedura di ELISA a sandwich, il saggio ELISA per la determinazione della fosforilazione, il saggio EIA e il saggio ELISA su cellule.
- Article: ELISA Troubleshooting Guide
Troubleshoot and optimize ELISAs using this guide that includes solutions to some of the most common sources of problems for assay development.
- Brochure: ELISA Kits
There are several ELISA configurations, with the most common formats being sandwich, competitive and signaling assays.
- Article: Conferma® ELISAs
Learn about the Conferma® ELISA development and manufacturing methods that provide strong sample detection and long-term assay and lot consistency, giving you confidence in your research.
- Article: Belysa® Software
Explore how to effortlessly monitor immunoassay method reproducibility using Belysa® analysis software.
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