Purificazione della proteina con tag di ricombinazione/fusione
La purificazione delle proteine ricombinanti mediante cromatografia di affinità tag-specifica è una tecnologia comprovata che consente di riconoscere e purificare in modo altamente specifico le proteine ricombinanti. L'espressione, la purificazione e il rilevamento di proteine ricombinanti possono essere un'impresa lunga e dispendiosa in termini di tempo. A seconda della proteina di interesse e del sistema di espressione, i tag proteici possono essere aggiunti per migliorare i risultati delle fasi comuni, tra cui la solubilità della proteina durante l'espressione, la purificazione mediante cromatografia di affinità o l'immunodetenzione dopo l'isolamento e la purificazione. Offriamo colonne e resine di affinità per tag di fusione multipli in numerosi formati, tra cui microsfere magnetiche, colonne impaccate e slurry di resina di agarosio, assicurando di avere prodotti per tutte le varie scale e applicazioni.
Prodotti
Colonne e supporti per cromatografia Cytiva™ Amersham
È disponibile un'ampia gamma di supporti per cromatografia Cytiva™ Amersham per la purificazione delle proteine con metodi manuali o automatizzati. I formati preconfezionati includono colonne a gravità, colonne di spin, piastre a 96 pozzetti e colonne preconfezionate per l'uso con sistemi cromatografici automatizzati.
- Proteine marcate con His: Purificazione rapida e conveniente di proteine ricombinanti istidina-taggate mediante cromatografia di affinità con ioni metallici immobilizzati (IMAC). I terreni Ni Sepharose sono precaricati con ioni nichel (Ni2+); il terreno TALON® Superflow™ è precaricato con ioni cobalto (Co2+).
- Proteine taggate con GST: I terreni cromatografici in glutatione sefarosio sono disponibili in confezioni da laboratorio, colonne GSTrap e GSPrep preconfezionate e piastre a 96 pozzetti. I moduli di purificazione GST sono disponibili per la purificazione di lisati batterici. I moduli GST SpinTrap comprendono colonne preconfezionate di glutatione sefarosio 4B SpinTrap e i tamponi necessari per la purificazione. I moduli di purificazione GST RediPack includono colonne a flusso di gravità e tampone.
- proteine taggate con Strep-tag™ II:Strep-tag II si lega specificamente a StrepTactin™ Sepharose High Performance resin, che ha StrepTactin ligand immobilizzato su una matrice di base di Sepharose per produrre proteine target pure.
- Proteine marcate MBP: Il mezzo cromatografico ad alte prestazioni Dextrin Sepharose purifica le proteine ricombinanti marcate con la proteina legante il maltosio (MBP).
Sfere di agarosio e gel di affinità
Le sfere di agarosio e i gel di affinità consentono la purificazione di proteine marcate da fusione utilizzando ligandi reticolati all'agarosio in perle. Adatte per la purificazione su piccola e grande scala in condizioni native, denaturanti o leggermente riducenti, queste resine sono adatte per la purificazione su colonna a flusso gravitazionale, per la centrifugazione a bassa velocità nell'elaborazione in lotti e per le procedure cromatografiche a bassa pressione, poiché le perle e i gel sono progettati per pressioni inferiori. I gel di affinità EZview™ incorporano un colorante rosso che consente all'utente di distinguere facilmente il pellet dal surnatante, riducendo la perdita di proteine durante la purificazione in lotti. I kit di immunoprecipitazione comprendono gel di affinità, colonne mini-spin e reagente di lisi e sono appositamente progettati per consentire il massimo recupero di proteine dagli immunoprecipitati.
Superflow Agarose and High-flow Affinity Gels
I gel di agarosio Superflow e i gel di affinità High-flow utilizzano microsfere di agarosio altamente reticolate che possono sopportare pressioni più elevate rispetto alle resine di agarosio standard. Ciò rende queste resine adatte ai metodi di purificazione rapida in cromatografia liquida delle proteine (FPLC). L'agarosio Superflow e i gel di affinità ad alto flusso sono consigliati per la purificazione su media e grande scala.
Sfere magnetiche
Le sfere magnetiche sono utilizzate per purificare le proteine di fusione ricombinanti etichettate utilizzando un rack o una piattaforma magnetica per separare le sfere dalle frazioni di lavaggio ed eluizione. Questa procedura consente un'elaborazione rapida in condizioni native o denaturanti in pochi secondi ed è adatta per una bassa produttività utilizzando singole provette per microcentrifuga o una maggiore produttività utilizzando piastre a 96 pozzetti e l'automazione.
BugBuster® Purification Kits
BugBuster® combinano resina di affinità, tamponi di lavaggio, tamponi di eluizione e reagenti di estrazione per una comoda preparazione di estratti cellulari solubili e per la purificazione per affinità di proteine di fusione taggate da E. coli.
Risorse correlate
- Brochure: Refine Protein Preparation - Tools for Better Protein Analysis
Today, researchers are challenged to create high quality samples for meaningful protein analysis, often using cumbersome traditional sample preparation methods. With over 50 years of experience in developing protein sample preparation technologies, MilliporeSigma is constantly innovating new tools to offer you rapid and efficient solutions that can be smoothly integrated into your workflow.
- Catalog: Recombinant Proteins – Purification and Detection Products
Why spend your time on arduous sample preparation protocols when you can focus your efforts on exciting experiments? With the right pure protein, in the buffer you need, at the concentration you want, your next discovery is only a step away. From protein isolation to purification, you can count on us to support your research with maximum yields of intact, functional proteins..
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