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低圧液体クロマトグラフィー

特定のクロマトグラフィーアプリケーション用に異なる充てん剤が充てんされたLPLCカラム。

低圧液体クロマトグラフィー(LPLC)システムでは、移動相はカラム内を低圧で移動します。LPLCは、重力を使って溶媒をオープンカラム内に「送液」します。このタイプのLPLCは、「オープンカラム液体クロマトグラフィー」として知られています。今日では通常、ポンプ駆動式機器を用いてLPLCを行います。

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関連技術資料

  • イオン交換クロマトグラフィーは、 Genopure Plasmid Midi Kit と Genopure Plasmid Maxi Kit で採用されています。
  • Affinity chromatography is the process of bioselective adsorption and subsequent recovery of a compound from an immobilized ligand. This process allows for the highly specific and efficient purification of many diverse proteins and other compounds. The process requires the utilization of an appropriately selective ligand which will bind the desired compound generally with a dissociation constant in the range of 10-4 to 10-8, while permitting recovery under mild conditions. The ligand is generally immobilized on a beaded and porous matrix which may be in the form of a column packing or batchwise adsorption medium.
  • このページではProtein GおよびProtein Aの各種免疫グロブリンへの結合力を比較しています。
  • This page describes the maintenance of media and storage conditions for multimodal chromatography using Cytiva products.
  • Ultra-high performance liquid chromatographic (UHPLC) separation of ephedrine and its three structural analogs based on polar retention effect on graphite (PREG) mechanism using Supel™ Carbon LC column.
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関連プロトコル

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LPLCは選択性の高い技術であり、タンパク質、ペプチドおよびモノクローナル抗体のような生体分子の研究で主に用いられます。LPLCは主として非破壊的な分取技術で、生体分子の分離や組換えタグ付きタンパク質の精製に有効です。LPLCは医薬品有効成分の精製、サンプルからの殺虫剤の除去および低分子の精製にも用いられます。

LPLC機器

LPLCシステムは、カラム、低圧ポンプ(多くはペリスタルティックポンプ)、インジェクター、検出器およびフラクションコレクターで構成されています。シンプルなペリスタルティックローラーポンプを使って、移動相をリザーバーから一定の流量で吸い出して、カラムに移動させます。

次に、サンプルの入ったインジェクター内に溶媒(移動相)を通して、サンプルを分離用カラムに移動させます。サンプル中の成分は、カラム内を通り抜ける間に分離し、異なる速度で検出器に到達します。インライン式のUV-Visまたは示差屈折率(RI)検出器でカラムからの溶出液をモニタリングすることにより、フラクションコレクターを使ったサンプル採取が可能です。サンプルは溶出順に採取されます。

LPLC用吸着剤・ハードウェア

カラムマトリックス材料は、機械的および化学的安定性に優れ、分析対象物質を変化させずに吸着を促進するための官能基を有しています。一般的に、カラムハードウェアの材料は、用いる溶媒に応じて、ガラスおよび不活性プラスチック素材でできています。






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