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# シーケンシング
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DNAやRNAの鎖に含まれる核酸の組成や配列を特定する能力は、現代の遺伝学の理解だけでなく、疾患研究やあらゆる生物の理解を深める上で不可欠な数多くの分野においても、極めて重要な意味を持っています。核酸の配列決定技術は、生物の遺伝暗号を解読するのに役立つだけでなく、他の分子技術と組み合わせることで、研究者にDNA配列を容易に操作し、その変化を配列決定によって検証するための強力なツールを提供します。 コードを形成するDNAはタンパク質の設計図として機能するため、研究者は現在、多種多様な機能要素を含む組換えタンパク質を独自に設計することが可能であり、これらは数多くの重要な研究課題の解明に広く活用されています。その他の全ゲノムシーケンシング用試薬やガイドについては、「[](https://www.sigmaaldrich.com)[次世代シーケンシング（NGS）](https://www.sigmaaldrich.com/JP/ja/applications/genomics/next-gen-sequencing)リソース」をご覧ください。
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概要
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サポート
## サンガー法
当初、分析化学の手法によって核酸の組成を特定することは可能でした。しかし、フレッド・サンガーとその共同研究者たちは、当初は放射性標識された消化断片と二次元分画法を用いて、最初の完全な核酸配列の一部を解明する手法を開発しました。 この分野の進歩は数十年にわたり続き、改良が重ねられるごとに、配列決定されたタンパク質やゲノムのデータベースは拡大していった。こうした改良には、ゲル電気泳動に続いてキャピラリー電気泳動を用いることで、ヌクレオチドを長さごとに分離する方法が含まれる。さらに、蛍光標識ヌクレオチドの導入や、各核酸断片のコンピュータによる自動解析などが加わり、これらが現在のサンガー法シーケンシングを特徴づけている。
## DNAシーケンシングの手法
この技術の誕生以来、DNAの配列決定法は改良され続けていますが、いくつかの基本的な構成要素は依然として不可欠であり、現代のDNAシーケンシングプラットフォームでも使用されています。 DNAの調製には、通常、宿主生物からのDNAの単離および精製が含まれる。さらに、遊離DNA塩基、DNAプライマー、蛍光標識を含む修飾DNA塩基（ターミネーター塩基）、およびDNAポリメラーゼといった重要な成分を、単一の容器に混合する。これらすべての成分を含む容器を一連の加熱・冷却工程にかけることで、対象となる全長DNA配列に比べて短いDNA配列のライブラリが生成され、各配列の末端には蛍光標識されたターミネーター塩基が付加される。 蛍光末端標識ヌクレオチドを含む新しいDNA鎖は、長さごとに分離され、キャピラリー管を通過してサイズ順に配列されます。その後、レーザーを用いて各鎖上の蛍光塩基を励起し、カメラがその信号を捉えます。最後に、通常はコンピュータを用いて、収集された情報を組み立て、全長のDNA配列を再構築します。
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