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逆転写酵素AMV

solution, >50 units/μg protein, suitable for RT-qPCR, suitable for RT-PCR

• 別名: amv逆転写酵素
• UNSPSC Code: 41105600
• EC Number: 2.7.7.49 (BRENDA, IUBMB)
• NACRES: NA.54
• Specific activity: >50 units/μg protein

特性

• form: solution
• specific activity: >50 units/μg protein
• feature: dNTPs included: no, hotstart: no
• packaging: pkg of 1,000 U
• manufacturer/tradename: Roche
• storage condition: avoid repeated freeze/thaw cycles
• parameter: 42 °C optimum reaction temp.
• technique(s): RT-PCR: suitable, RT-qPCR: suitable
• input: purified RNA
• detection method: probe-based

詳細

General description

逆転写酵素AMVはトリ骨髄芽球症ウイルスRNAゲノムの遺伝子産物です。精製酵素の酵素活性がある型はα,ββとαβです。分子量は、α-サブユニットが68 kDa、β-サブユニットが92 kDaです。成熟したαβ型は逆転写酵素AMVの型の中で最も活性がある型であり、RNA依存性DNAポリメラーゼ、DNA依存性DNAポリメラーゼ、RNase H、巻き戻し活性が含まれます。逆転写酵素AMVは、cDNA合成、増幅反応やジデオキシDNAシークエンシングに使用するためのファーストストランドcDNA合成に使用されます。
またRNAシークエンシング、DNAフラグメントの3′末端標識、ゲノムフットプリンティング用のssプローブの生成にも使用されます。

逆転写酵素AMVの活性には、プライマーとMg²⁺又はMn²⁺が必要です。

Application

逆転写酵素AMVは以下の用途に適しています：

• 第1鎖cDNAと第2鎖cDNAの合成と、後続の増幅反応（RT-PCR）に使用する第1鎖cDNAの合成[1][2][3]
• ジデオキシDNAシーケンシング
• プライマー伸長[4]
• RNAシーケンシング
• DNA断片の3′-末端の標識
• ゲノムフットプリント実験用の一本鎖プローブの作製

Biochem/physiol Actions

AMV（トリ骨髄芽球症ウイルス）逆転写酵素はRNA依存性DNAポリメラーゼ及びDNA依存性DNAポリメラーゼです。AMV逆転写酵素の活性には、プライマーとMg²⁺又はMn²⁺が必要です。
熱失活：5分間、95℃

Features and Benefits

• 全RNA、mRNA、ウイルスRNA、および二次構造に富むRNAを効率的に転写します。
• 12kbまでの全長cDNA断片が得られます。
• M-MuLV逆転写酵素と比べ、熱安定性（最大60℃）と特異性が高いです。

Packaging

2コンポーネントを含む1キット

Preparation Note

−15～−25℃で保存してください（−70℃で保存すると、凍結融解の繰り返しにより酵素が劣化する可能性が高い）。

保存用バッファー：200 mMリン酸カリウム、2 mMジチオトレイトール、0.2％ Triton X-100（v/v）、50％グリセロール（v/v）、pH 7.2。

Analysis Note

混入物質の不在：最新の品質管理手順に従い、様々な核酸とインキュベートすることにより検出可能な非特異的RNase及び非特異的DNasesがないことが確認されています（ゲル電気泳動分析）。
性能試験：逆転写酵素AMVはcDNA合成キット及びRT-PCRにおいて性能試験が行われています。

Other Notes

1ユニットは、ポリ(A)⁺ · d(pT)₁₅をテンプレートプライマーとして＋37℃、10分間で、1 nmolの[³H]-dTMPを酸不溶性物質に取り込ませる酵素活性です。

体積活性：20～25 U/μL。さらに詳しい情報につきましては試験成績書をご参照ください。

ライフサイエンス研究専用。診断目的での使用はできません。

キットの構成要素のみ

• Reverse Transcriptase AMV 20-25 U/μl
• First-strand cDNA Synthesis Buffer 5x concentrated

安全性情報

• 保管分類: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: does not flash
• flash_point_c: does not flash