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Merck

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CAS9GFPPRO

Cas9-GFPタンパク質

from Streptococcus pyogenes, fused with enhanced GFP, recombinant, expressed in E. coli, 3X NLS

別名:

Cas9-EGFP, SpCas9-EGFP, SpCas9-GFP

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この商品について

NACRES:
NA.51
UNSPSC Code:
12352202
Form:
lyophilized powder
Assay:
≥90% (SDS-PAGE)
Recombinant:
expressed in E. coli

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recombinant

expressed in E. coli

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≥90% (SDS-PAGE)

form

lyophilized powder

packaging

pkg of 1 kit (3 components)

reporter gene

GFP

shipped in

wet ice

storage temp.

−20°C

General description

Streptococcus pyogenes由来の組換えCas9-GFPタンパク質(約194 KD)は、ゲノム編集実験にすぐに使用できる試薬です。標的特異的なガイドRNAと併用すると、野生型Streptococcus pyogenes Cas9-GFPタンパク質は、培養細胞のトランスフェクションや、一細胞胚注入を介する遺伝子改変動物の迅速作成に適した、標的ヌクレアーゼとして働きます。
励起ピークが488 nm、発光ピークが509 nmのN末端に融合した増強型緑色蛍光タンパク質により、フローサイトメトリーアプリケーションの実用性に加えて、トランスフェクトされたRNP複合体を可視化できます。  本タンパク質は、最適な活性のために配置された3つの異なる核局在配列も含みます。

Application

  • 機能ゲノミクス
  • ターゲットバリデーション
  • ゲノム編集
  • 蛍光顕微鏡検査
  • フローサイトメトリー

Biochem/physiol Actions

CRISPR/Cas系は、細菌及び古細菌において、侵入するウイルスやプラスミドに対する防御として働いています。近年、単一Cas9タンパク質とノンコーディングのガイドRNA(gRNA)という2つの分子成分を用いて、真核細胞系で機能する、細菌Streptococcus pyogenes由来のII型CRISPR/Cas系が作られています。Cas9エンドヌクレアーゼをgRNAによりプログラムして、希望するゲノム位置でDNA二本鎖切断(DSB)を発生させることができます。ジンクフィンガーヌクレアーゼ(ZFN)によって誘導されるDSBと同様に、細胞は続いて、非相同末端結合(NHEJ)又は相同組換え修復(HDR)のいずれかの内因性DNA修復過程を活性化し、標的DSBを修復します。

Features and Benefits

  • 高特異性
  • 高活性
  • 注入/トランスフェクトにすぐ使用できます

Packaging

  • 50 μgパッケージ(≥260 pmol)
  • 250 μgパッケージ(≥1300 pmol)

Preparation Note

凍結乾燥したS. pyogenes Cas9-GFPタンパク質は、希望する濃度になるまで溶解液に再懸濁してください。チューブを穏やかに叩いて凍結乾燥粉末を完全に溶解させ、氷上で10分間インキュベートし、チューブを遠心して材料をチューブの底に移動させます。

Other Notes

gRNAの注文には、弊社のCRISPR選択ツールをご使用ください

弊社の他のMISSION® Cas9 Proteins(ミッションCas9タンパク質)については、SigmaAldrich.com/CRISPRproteinsでご確認ください。
各キットは以下で構成されています:
  • 凍結乾燥したCas9-GFP組換えタンパク質の1バイアル
  • 1 mLの1倍希釈バッファー 1バイアル
  • 1 mLのグリセロール含有ヌクレアーゼフリー水 1バイアル

Legal Information

MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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当該品目
PECAS9ESPCAS9PROCAS9D10APR
description

from Streptococcus pyogenes, fused with enhanced GFP, recombinant, expressed in E. coli, 3X NLS

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from Streptococcus pyogenes, recombinant, expressed in E. coli, 3X NLS

description

from Streptococcus pyogenes with mutations conferring enhanced specificity, recombinant, expressed in E. coli, 1X NLS

description

from Streptococcus pyogenes with D10A mutation, recombinant, expressed in E. coli, 1X NLS

assay

≥90% (SDS-PAGE)

assay

≥95% (SDS-PAGE)

assay

≥95% (SDS-PAGE)

assay

≥90% (SDS-PAGE)

recombinant

expressed in E. coli

recombinant

expressed in E. coli

recombinant

expressed in E. coli

recombinant

-

form

lyophilized powder

form

lyophilized powder

form

lyophilized powder

form

lyophilized powder

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

shipped in

wet ice

shipped in

wet ice

shipped in

ambient

shipped in

dry ice

packaging

pkg of 1 kit (3 components)

packaging

pkg of 1 kit (4 components)

packaging

pkg of 1 kit (3 components)

packaging

pkg of 1 kit (3 components)


保管分類

11 - Combustible Solids

wgk

WGK 3


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

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質問

1–2/2 質問  
  1. Is it also applicable to gram-positive bacterial gene editing?

    1 回答
    1. This product does not have in-house data demonstrating applicability to gene editing in gram-positive bacteria. In general, CRISPR-based approaches used in eukaryotic systems can be lethal to prokaryotic cells when generating frameshift mutations via non-homologous end joining. In bacterial systems, CRISPR is often used to manipulate microbial communities or target antibiotic resistance genes. Precise genome editing via homology-directed repair has been reported in some microbial systems, but these applications have typically been demonstrated in gram-negative bacteria. Therefore, applicability to gram-positive bacterial gene editing has not been established. The end user would have to determine suitability.

      役に立ちましたか?

  2. What are the net charge and isoelectric point of this protein?

    1 回答
    1. The isoelectric point of the protein is pH 9.33, and its net charge at pH 7 is 25.9.

      役に立ちましたか?

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