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DUO94004
Duolink® flowPLA Detection Kit - FarRed
Duolink® PLA kit for Flow Cytometry with FarRed Detection
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| 容量 | カタログ番号 | 在庫状況 | 単価 |
|---|---|---|---|
| 40 tests | 在庫from市川市大町368 | ￥142,000 |
この商品について
NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
41105331
Fluorescence:
λex 644 nm; λem 669 nm
Technique(s):
flow cytometry: suitable, immunofluorescence: suitable, proximity ligation assay: suitable
product line
Duolink®
technique(s)
flow cytometry: suitable, immunofluorescence: suitable, proximity ligation assay: suitable
fluorescence
λex 644 nm; λem 669 nm
suitability
suitable for fluorescence
shipped in
dry ice
storage temp.
−20°C
General description
Duolink® flowPLA Detection Kitには、フルオロフォアの付いた検出用オリゴヌクレオチドが含まれています（lex = 644 nm/lem = 669 nm）。
Application
Duolink® flowPLA Detection Kit–FarRedは、下記でin situ近接ライゲーションアッセイに使用されています：
- 細胞レチノイン酸結合タンパク質1（Crabp1）と急速進行性線維肉腫（Raf）キナーゼ- MAPK-Erkキナーゼ（Mek）シグナル伝達経路の要素の間の相互作用および複合体形成を検出するため[1]
- ヒト培養MOLT-4細胞とHeLa細胞のタンパク質相互作用を検討するため[2]
- Beclin-1タンパク質とニューロンの14-3-3tとの相互作用を可視化するため[3]
- 移植内皮細胞のタンパク質相互作用を検討するため[4]
近接ライゲーションアッセイ（PLA）で、Duolink®PLAを使用すれば、固定細胞でのタンパク質相互作用、翻訳後修飾、および1分子レベルでのタンパク質発現レベルの内在的検出が可能になります。
Duolink® flowPLA Detection Kitを使ったフローサイトメトリーにより、細胞集団内のタンパク、タンパク間相互作用、およびタンパク修飾を高感度で検出することができます。Duolink® flowPLA実験の実施には、固定細胞懸濁液、対象のタンパクを特異的に認識する2つの一次抗体、1組のPLAプローブ（100RXN PLUS 1つおよび100RXN MINUS 1つ）、洗浄バッファ、およびDuolink® flowPLA Detection Kitが必要です。flowPLA Kitでは、5つの異なるフルオロフォアを利用できます。バイオレット、赤、緑、橙、遠赤色。flowPLA Kitには、フローサイトメトリーにより、結合したPLAプローブの増幅および検出を行うために必要な試薬のすべてが含まれています。解析は、標準的なフローサイトメトリーアッセイ機器を用いて行います。固定済み細胞浮遊液、一次抗体、および対応するPLAプローブを用意します。
本製品はDuolink® PLAフローサイトメトリープロトコルに従って使用してください。
Duolink®を用いた実験方法、用途、トラブルシューティングなどの情報は、Duolink® PLAフローサイトメトリーのサイトをご覧ください。
アプリケーションノート
一次抗体が必要です。お客様の一次抗体（IgG-クラス、モノクローナルまたはポリクローナル）を標準免疫蛍光染色（IF）、免疫組織染色（IHC）または免疫細胞染色（ICC）アッセイで試験し、最適な固定、ブロッキングおよび力価条件を決定します。フロー検証済み抗体を推奨します。
Duolink®プロジェクトを推進するため、カスタムサービスプログラムで詳細をご覧になり、弊社にお申し付けください。
Duolink®製品の全てのリストを表示する。
Duolink® flowPLA Detection Kitを使ったフローサイトメトリーにより、細胞集団内のタンパク、タンパク間相互作用、およびタンパク修飾を高感度で検出することができます。Duolink® flowPLA実験の実施には、固定細胞懸濁液、対象のタンパクを特異的に認識する2つの一次抗体、1組のPLAプローブ（100RXN PLUS 1つおよび100RXN MINUS 1つ）、洗浄バッファ、およびDuolink® flowPLA Detection Kitが必要です。flowPLA Kitでは、5つの異なるフルオロフォアを利用できます。バイオレット、赤、緑、橙、遠赤色。flowPLA Kitには、フローサイトメトリーにより、結合したPLAプローブの増幅および検出を行うために必要な試薬のすべてが含まれています。解析は、標準的なフローサイトメトリーアッセイ機器を用いて行います。固定済み細胞浮遊液、一次抗体、および対応するPLAプローブを用意します。
本製品はDuolink® PLAフローサイトメトリープロトコルに従って使用してください。
Duolink®を用いた実験方法、用途、トラブルシューティングなどの情報は、Duolink® PLAフローサイトメトリーのサイトをご覧ください。
アプリケーションノート
一次抗体が必要です。お客様の一次抗体（IgG-クラス、モノクローナルまたはポリクローナル）を標準免疫蛍光染色（IF）、免疫組織染色（IHC）または免疫細胞染色（ICC）アッセイで試験し、最適な固定、ブロッキングおよび力価条件を決定します。フロー検証済み抗体を推奨します。
Duolink®プロジェクトを推進するため、カスタムサービスプログラムで詳細をご覧になり、弊社にお申し付けください。
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Biochem/physiol Actions
遠赤色蛍光検出試薬
λ ex 644 nm励起に適したレーザーを使用してください。
λ em 669 nm蛍光に適したフィルターを使用してください。
λ ex 644 nm励起に適したレーザーを使用してください。
λ em 669 nm蛍光に適したフィルターを使用してください。
Features and Benefits
- フローサイトメトリー読取り値を用いてタンパク間相互作用を解析します。
- 近接ライゲーションアッセイを用いて細胞集団を解析します。
- 少量のターゲットに対しローリングサークル型の増幅を行うことにより感度が向上します
- 過剰発現や遺伝子操作は不要
- 相対的な定量が可能
- あらゆるフローサイトメトリー機器を用いて操作できます
- 柔軟なプロトコルに沿って容易に実施できます
- 論文などにそのまま使用できる結果
Other Notes
本製品の構成は次のとおりです。
詳しくはデータシートを参照してください。
- 検出液- FarRed（DUO84004）5本入り
- ライゲーションバッファー（DUO82009）5本入り
- 増幅バッファー（DUO82050）5本入り
- リガーゼ（1U/μL）
- ポリメラーゼ（10U/μL）
詳しくはデータシートを参照してください。
Legal Information
Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
1 of 1
当該品目 | |||
|---|---|---|---|
| suitability suitable for fluorescence | suitability suitable for fluorescence | suitability suitable for fluorescence | suitability suitable for fluorescence |
| fluorescence λex 644 nm; λem 669 nm | fluorescence λex 594 nm; λem 624 nm | fluorescence λex 554 nm; λem 576 nm | fluorescence λex 495 nm; λem 527 nm |
| technique(s) flow cytometry: suitable, proximity ligation assay: suitable, immunofluorescence: suitable | technique(s) flow cytometry: suitable, immunofluorescence: suitable, proximity ligation assay: suitable | technique(s) flow cytometry: suitable, immunofluorescence: suitable, proximity ligation assay: suitable | technique(s) flow cytometry: suitable, immunofluorescence: suitable, proximity ligation assay: suitable |
| product line Duolink® | product line Duolink® | product line Duolink® | product line Duolink® |
| shipped in dry ice | shipped in dry ice | shipped in dry ice | shipped in dry ice |
| storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C |
signalword
Danger
保管分類
10 - Combustible liquids
wgk
WGK 3
hcodes
Hazard Classifications
Aquatic Chronic 2 - ED ENV 1 - Resp. Sens. 1
適用法令
試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。
キットコンポーネントの情報を参照してください
pdsc
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jan
資料
Considerations for proper experimental design, preparation and execution of the Duolink® PLA for flow cytometry protocol.
Learn how Proximity Ligation Assay technology works and how the protein-protein interaction control kit can confirm in situ detection of EGF-induced EGFR-HER2 dimerization.
General tips and tricks for proper experiment execution, aid in identifying potential problems, and provide solutions to ensure a successful Duolink® PLA experiment for flow cytometry.
Sofie Selmer Andersen et al.
Cytokine, 64(1), 54-57 (2013-06-04)
Many cytokine receptors are cell surface proteins that promiscuously combine to form active signalling homo- or heterodimers. Thus, receptor chain dimerization can be viewed as a direct measure of a high probability of intracellular signalling by specific cytokines. Proximity ligation
Adriana Cassaro et al.
Hematological oncology, 39(3), 364-379 (2021-01-27)
Wnt/Fzd signaling has been implicated in hematopoietic stem cell maintenance and in acute leukemia establishment. In our previous work, we described a recurrent rearrangement involving the WNT10B locus (WNT10BR ), characterized by the expression of WNT10BIVS1 transcript variant, in acute
Sung Wook Park et al.
Scientific reports, 9(1), 10929-10929 (2019-07-31)
The rapidly accelerated fibrosarcoma (Raf) kinase is canonically activated by growth factors that regulate multiple cellular processes. In this kinase cascade Raf activation ultimately results in extracellular regulated kinase 1/2 (Erk1/2) activation, which requires Ras binding to the Ras binding
グローバルトレードアイテム番号
| カタログ番号 | GTIN |
|---|---|
| DUO94004-40TST | 04061835515844 |
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Is it possible to just buy the 5x Detection Solution separately?
1 回答-
役に立ちましたか？
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Can I use this kit in conjunction with staining for other markers? If so, would you recommend staining with the PLA kit first, followed by staining with other primary-conjugated antibodies?
1 回答-
It is possible to counterstain after the Duolink in situ amplification. It is recommended to apply the counterstaining protocol after the completion of the Amplification step in section 7.3, step 5 of the Duolink In Situ Fluorescence User Manual.
Please see the protocol below:
https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/protocol/protein-biology/protein-and-nucleic-acid-interactions/duolink-counterstain役に立ちましたか？
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Hello, can I also dilute the 5 x detection stock in something else than high purity water? Maybe PBS?
1 回答-
It is not recommended to use any other solvent to dilute the 5x detection stock due to the sensitivity of this reaction. The Duolink kits have been optimized for use under the conditions described. Deviation from the protocol may not offer the best results. Please see the link below to view the full product information for the Duolink PLAFlow kits:
https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/technical-article/protein-biology/protein-and-nucleic-acid-interactions/duolink-pla-flow-cytometry-kits役に立ちましたか？
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