Merck
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L8146

Sigma-Aldrich

レクチン ハリエニシダ(Ulex europaeus)由来

peroxidase conjugate, lyophilized powder

Synonym(s):
UEA-I, ハリエニシダ(Ulex europaeus)凝集素
NACRES:
NA.32

由来生物

Ulex europaeus

品質水準

200

結合体

peroxidase conjugate

アッセイ

70.00-90.00% (Lowry)

形態

lyophilized powder

有効性

<40 μg/mL agglutination activity

peroxidase activity

≥15 units/mg protein

組成

Protein, ~80% Lowry

technique(s)

western blot: suitable

保管温度

2-8°C

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包装

0.5, 1 mg in serum bottle
容量はタンパク質含量を基準にしています。

アプリケーション

General Western Blot Protocol:
  • Glycoprotein sample size: 500ng
  • Lectin Concentration: 0.1ug/ml

  1. Load samples at 500 ng of glycoprotein per lane
  2. Run 4-20% Bis-Tris SDS page gel
  3. Transfer gel to a PVDF membrane
  4. Block membrane for 1 hr at RT with RIPA buffer (R0278 Sigma)
  5. Incubate HRP lectin at 0.1ug/ml with RIPA buffer for 2 hours at RT
  6. Wash membrane 5 x 5 minutes with 25ml RIPA buffer
  7. Detect using chemiluminescent substrate (CPS1-120)

生物化学的/生理学的作用

ハリエニシダ凝集素は血液型H抗原に対する特異性があります。ハリエニシダ由来のレクチンには2種類あり、UEA IはL-フコ-スに親和性を有し、UEA IIはN,N′-ジアセチルキトビオ-スに親和性を有しています。UEA Iの分子量は当初170,000ダルトンとされていました。後の報告で、UEA Iが中性および塩基性のpHで凝集体を形成し、正確な分子量は68,000 ダルトンであることが示されました。

関連事項

コンジュゲ-トはアフィニティ-精製したレクチンから調製されます。

単位の定義

1 unitは、pH 6.0、20°C、20秒間に、1 mgのプルプロガリンをピロガロールから生成する酵素量です。

物理的形状

リン酸ナトリウムバッファ-塩含有。

調製ノート

Avrameas and Ternyckの2段階グルタルアルデヒド法により、VI型ペルオキシダ-ゼ(P8375)を用いて作製されています。
コンジュゲ-ションの後、アフィニティ-クロマトグラフィ-で再精製しています。

アナリシスノート

凝集活性は、1 mg/mL溶液をPBS(pH 6.8)で段階希釈して測定し、μg/mLの単位で表します。凝集活性は、25°Cで 1時間インキュベートした場合、ヒトO型赤血球の2%懸濁液を凝集させる最低濃度で示されます。

保管分類コード

13 - Non Combustible Solids

WGK

WGK 3

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable

個人用保護具 (PPE)

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)

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