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Merck

P6782

Sigma-Aldrich

ペルオキシダーゼ from horseradish

Type VI-A, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥250 units/mg solid (using pyrogallol), 950-2000 units/mg solid (using ABTS)

別名:

ドナー:過酸化水素オキシドレダクターゼ, 西洋ワサビペルオキシダーゼ

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About This Item

CAS番号:
Enzyme Commission number:
EC Number:
MDL番号:
UNSPSCコード:
12352204
eCl@ss:
32160410
NACRES:
NA.54

タイプ

Type VI-A

形状

essentially salt-free, lyophilized powder

比活性

≥250 units/mg solid (using pyrogallol)
950-2000 units/mg solid (using ABTS)

分子量

~44 kDa

溶解性

0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0)
H2O: soluble

アプリケーション

diagnostic assay manufacturing

保管温度

2-8°C

InChI

1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H

InChI Key

JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N

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詳細

西洋ワサビペルオキシダ-ゼは西洋ワサビ(Amoracia rusticana)の根から単離された酵素で、ペルオキシダ-ゼのフェロプロトポルフィリン類に属します。HRPは4個のジスルフィド架橋結合を有する1本のポリペプチドです。18%の糖を含む糖タンパク質です。糖の組成はガラクト-ス、アラビノ-ス、キシロ-ス、フコ-ス、マンノ-ス、マンノサミン、ガラクトサミンからなり、個々のアイソザイムによって異なります。 この酵素の分子量(約44 kDa)には、ポリペプチド鎖(33,890 Da)、ヘミン+Ca2+(約700 Da)、糖(約9,400 Da)が含まれます。HRPには少なくとも7種類のアイソザイムが存在します。 西洋ワサビペルオキシダ-ゼアイソザイムの等電点は3.0~9.0です。

アプリケーション

Sigmaの酵素は、ガラクトースを検出するための高速及び高感度の、長期的に安定なガラクトースオキシダーゼ‐ペルオキシダーゼバイオセンサーの開発に使用されています。Lactobacillus sp.増殖用の3,3′,5,5′-テトラメチルベンジジン(TMB)を含有する培地(MRS寒天培地)プレートの成分として使用されています。TMBは、ペルオキシダーゼの発色性基質として作用します。ペルオキシダーゼは乳酸桿菌により産生されたH2O2からO2を発生させ、TMBはO2の存在下でコロニーを青色に染色します。したがって、空気中、5%CO2 下で48時間培養後、MRS寒天培地上でH2O2を産生するコロニーは濃青色に見えます。H2O2非産生コロニーは無色です。ポリビニルアルコールの西洋ワサビペルオキシダーゼへの安定化効果を試験するために使用されています。また、溶液中のグルコース及び過酸化物の測定にも使用されます。
西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)は、西洋ワサビの根(Amoracia rusticana)から単離されます。 ウェスタンブロット、ELISA、および免疫組織化学などの生化学アプリケーションに使用されます。 西洋ワサビペルオキシダーゼは、弱いシグナルを増幅し、タンパク質などのターゲット分子の検出性を向上します。 製品P6782は、VI-A型で、基本的には無塩の凍結乾燥粉末です。 コレステロールおよびコレステロールエステルを定量するため、ならびにハイドロゲルおよびシリコンハイドロゲルコンタクトレンズへのin vitroでの脂質沈着を試験するために使用されます

生物化学的/生理学的作用

HRPは過酸化水素(H2O2)と容易に結合し、その生成物[HRP-H2O2]複合体は幅広い種類の水素供与体を酸化することができます。至適pHは6.0~6.5で、酵素は5.0~9.0のpH範囲で最も安定です。HRPは、グルタルアルデヒド、過ヨウ素酸塩酸化、ジスルフィド結合を含むいくつかの異なる方法で抗体コンジュゲートを形成することが可能であり、アミノ及びチオール架橋剤も使用できます。β-ガラクトシダーゼ及びアルカリホスファターゼ酵素標識よりも小さく安定です。このため最も望ましい標識となっています。また、グリコシル化により非特異的結合がさらに低下します。アジ化ナトリウム、シアン化物、L-シスチン、二クロム酸塩、エチレンチオウレア、ヒドロキシルアミン、硫化物、バナジン酸、p-アミノ安息香酸及びCd2+、Co2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni2+、Pb2+イオンは酵素活性を阻害することが見出されています。
西洋ワサビペルオキシダーゼを基質とインキュベーションすると、標的分子の着色、蛍光又は発光誘導体が生成し定量が可能となります。 西洋ワサビペルオキシダーゼは、cydAB変異体において阻害レベルをわずかに低減させることが示されています。

包装

容量は、固形分の重量(mg)に基づいています。

関連事項

製品番号 P8375と同様の製品です。

単位の定義

1 ABTSユニットは、pH 5.0、25°C、1分間で、1.0 μmolのABTSを酸化する酵素量です。
1ピロガロールユニットは、pH 6.0、20°Cで 20秒あたり1.0 mgのプルプロガリンをピロガロールから生成する酵素量です。

調製ノート

0.1 Mリン酸緩衝液(pH 6.0)に1 mg/mLの濃度で溶解した本製品の溶液は、室温下で2週間以上活性を保ちます。本溶液は、凍結-融解サイクル5回後においても活性状態を維持します。

アナリシスノート

RZ(Reinheitszahl)値は、0.5~1.0 mg/mL脱イオン水溶液で測定したA403/A275の吸光度比です。これはヘミン含量を測定するもので、酵素活性を測定するものではありません。RZ値の高い標品でも酵素活性が低いことがあります。
本製品は、ABTSを用いて定量しているため、他社製品の単位(固体1 mgあたり約1,000 unit)と容易に比較することが可能です。

その他情報

ペルオキシダーゼに関する詳細情は、www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorerをご覧ください。

ピクトグラム

Health hazard

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

注意書き

危険有害性の分類

Resp. Sens. 1

保管分類コード

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

個人用保護具 (PPE)

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)


適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

Jan Code

P6782-100MG:
P6782-50MG:
P6782-BULK:
P6782-5MG:
P6782-25MG:
P6782-10MG:
P6782-VAR:


試験成績書(COA)

製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。

以前この製品を購入いただいたことがある場合

文書ライブラリで、最近購入した製品の文書を検索できます。

文書ライブラリにアクセスする

Rapid and sensitive galactose oxidase-peroxidase biosensor for galactose detection with prolonged stability
Tkac J, et al.
Biotechnol. Tech., 13(12), 931-936 (1999)
Chiara Marabelli et al.
Cell reports, 27(2), 387-399 (2019-04-11)
LSD1 and LSD2 are homologous histone demethylases with opposite biological outcomes related to chromatin silencing and transcription elongation, respectively. Unlike LSD1, LSD2 nucleosome-demethylase activity relies on a specific linker peptide from the multidomain protein NPAC. We used single-particle cryoelectron microscopy (cryo-EM)
Stabilization effect of polyvinyl alcohol on horseradish peroxidase, glucose oxidase, β-galactosidase and alkaline phosphatase.
Boyd S, et al.
Biotechnol. Tech., 10(9), 693- 698 (1996)
Zollner, H.
Handbook of Enzyme Inhibitors, 1993, 367-368 null
From Concept to Product Development
Enzyme Immunoassay, 169-171 (1996)

資料

Discover our peroxidase from horseradish enzymes, products, substrates, and inhibitors for your ELISA, immunoassay, and protein application needs.

プロトコル

Reinheitszahl (RZ) is the ratio of absorbance due to hemin (A403, Soret region) to absorbance due to protein (A275).

To standardize a procedure for the assay of Peroxidase using 2,2'-Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid) as a substrate.

This procedure is for the determination of Peroxidase enzymatic activity using Pyrogallol as the substrate.

2,2'-アジノ-ビス(3-エチルベンズチアゾリン-6-スルホン酸)を基質として用いたペルオキシダーゼのアッセイ手順の標準化

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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