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P8340

Sigma-Aldrich

プロテアーゼインヒビターカクテル

for use with mammalian cell and tissue extracts, DMSO solution

MDL番号:
NACRES:
NA.77

品質水準

300

由来生物

bovine lung

形態

DMSO solution

保管温度

−20°C

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特異性

セリン、システイン、および酸性プロテアーゼ、ならびにアミノペプチダーゼを阻害します。

アプリケーション

プロテアーゼ阻害剤カクテルは以下に使用されています:
  • GST(グルタチオン S-トランスフェラーゼ)プルダウンアッセイにおける、GFP(緑色蛍光タンパク質)-ハンチンチン-導入 HEK 293 細胞のソニケーション用バッファーの成分
  • 可溶化バッファーの成分
  • 放射性免疫沈降アッセイ用バッファー(RIPA)の成分

包装

1, 5 mL in serum bottle

生物化学的/生理学的作用

本混合物は、104 mM の AEBSF、80 μM のアプロチニン、 4 mM のべスタチン、1.4 mM の E-64、2 mM のロイペプチン、および 1.5 mM のペプスタチン A などの個々の成分を含みます。各成分は、特異的な阻害特性を持っています。 AEBSF およびアプロチニンは、トリプシン、キモトリプシン、およびプラスミンなどのセリンプロテアーゼを阻害します。 べスタチンはアミノペプチダーゼを阻害します。 E-64 はシステインプロテアーゼに対して作用します。 ロイペプチンは、セリンプロテアーゼおよびシステインプロテアーゼの両方に対して作用します。 ぺプスタチン A は、酸性プロテアーゼを阻害します。

構成

AEBSF
アプロチニン
べスタチン
E-64
ロイペプチン
ぺプスタチン A

注意

本カクテルは、 -20°Cで保存してください。

調製ノート

本カクテル溶液 1 mL は、20 g のウシ肝臓に由来する100 mLのライセート 、または、10 mLのCHO 細胞由来ライセート中の内在性酵素の阻害に使用できます。 本製品は、DMSO 溶液として提供されます。

保管分類コード

10 - Combustible liquids

WGK

WGK 2

引火点(°F)

188.6 °F - closed cup

引火点(℃)

87 °C - closed cup

試験成績書(COA)

原産地証明書(COO)

  1. Is there anything in Product P8340, Protease Inhibitor Cocktail, that will cause downstream problems with RT-PCR?

    While the product should not cause any downstream problems with RT-PCR, we would advise to clean up the reaction with either DMN10 (GenElute Direct mRNA Miniprep Kit) or T9424 (TRI Reagent®) for  purification.

  2. Can Product P8340, Protease Inhibitor Cocktail, be used with RIPA buffer and how much should be used?

    Yes, this product can be used with RIPA buffer at 100 μl/ml concentration.

  3. How much Product P8340, Protease Inhibitor Cocktail, should I use?

    One mL of the cocktail solution is recommended for the inhibition of endogenous enzymes found in 100 mL of lysate from 20 g (wet weight) of bovine liver or 10 mL of cell lysate obtained from CHO cells at a cell density of 100 million (108) cells per mL. CHO cells were grown on DMEM with 10% FCS (heat inactivated).  Note: Not all lysates contain the same levels of endogenous enzymes, and it may be necessary to adjust the volume of cocktail required.

  4. What is the concentration of inhibitors in Product P8340, Protease Inhibitor Cocktail?

    The concentration of inhibitors in this product is the following:AEBSF, 104 mMAprotinin, 0.085 mMBestatin, 4 mME-64, 1.4 mMLeupeptin, 2 mMPepstain A, 1.5 mM.

  5. Does Product P8340, Protease Inhibitor Cocktail, contain any chelators or EDTA?

    This product does not contain any metal chelators.

  6. Can Product P8340, Protease Inhibitor Cocktail, be used with Ezview Protein A and Anti FLAG M2 affinity gels.

    Yes, this product can be used with both Ezview Protein A and Anti FLAG M2 affinity gels.

  7. Which document(s) contains shelf-life or expiration date information for a given product?

    If available for a given product, the recommended re-test date or the expiration date can be found on the Certificate of Analysis.

  8. How do I get lot-specific information or a Certificate of Analysis?

    The lot specific COA document can be found by entering the lot number above under the "Documents" section.

  9. How do I find price and availability?

    There are several ways to find pricing and availability for our products. Once you log onto our website, you will find the price and availability displayed on the product detail page. You can contact any of our Customer Sales and Service offices to receive a quote.  USA customers:  1-800-325-3010 or view local office numbers.

  10. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product. 

  11. My question is not addressed here, how can I contact Technical Service for assistance?

    Ask a Scientist here.

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