P8375

ペルオキシダーゼ from horseradish

Type VI, essentially salt-free, lyophilized powder, ≥250 units/mg solid (using pyrogallol)

• 別名: HRP, RT酵素, ペルオキシダーゼ, ドナー:過酸化水素オキシドレダクターゼ, 西洋ワサビペルオキシダーゼ
• CAS番号: 9003-99-0
• Enzyme Commission number: 1.11.1.7 (BRENDA, IUBMB)
• EC Number: 232-668-6
• MDL番号: MFCD00071339
• UNSPSCコード: 12352204
• eCl@ss: 32160410
• NACRES: NA.54

特性

• タイプ: Type VI
• 形状: essentially salt-free, lyophilized powder
• 比活性: ≥250 units/mg solid (using pyrogallol)
• 分子量: ~44 kDa
• 溶解性: 0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0)
• 吸光度比: RZ 2.5-4.0
• アプリケーション: diagnostic assay manufacturing
• 保管温度: 2-8°C
• InChI: 1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H
• InChI Key: JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N

詳細

詳細

西洋ワサビペルオキシダ-ゼは西洋ワサビ(Amoracia rusticana)の根から単離された酵素で、ペルオキシダ-ゼのフェロプロトポルフィリン類に属します。HRPは4個のジスルフィド架橋結合を有する1本のポリペプチドです。18%の糖を含む糖タンパク質です。糖の組成はガラクト-ス、アラビノ-ス、キシロ-ス、フコ-ス、マンノ-ス、マンノサミン、ガラクトサミンからなり、個々のアイソザイムによって異なります。 この酵素の分子量(約44 kDa)には、ポリペプチド鎖(33,890 Da)、ヘミン+Ca²⁺(約700 Da)、糖(約9,400 Da)が含まれます。HRPには少なくとも7種類のアイソザイムが存在します。 西洋ワサビペルオキシダ-ゼアイソザイムの等電点は3.0~9.0です。

アプリケーション

本酵素は、酸化還元-導電ハイドロゲルを通じた、酵素のガラスカーボン電極への架橋および電気的架線による、熱安定性大豆ペルオキシダーゼを使用したバイオセンサーの開発に使用されています。また、低密度リポタンパク質の酸化定量にも使用されています。

西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP）は、西洋ワサビの根（Amoracia rusticana）から分離されたものであり、ペルオキシダーゼのフェロプロトポルフィリングループに属しています。 ウェスタンブロット、ELISA、および免疫組織化学などの生化学アプリケーションに使用されます。 西洋ワサビペルオキシダーゼは、弱いシグナルを増幅し、タンパク質などのターゲット分子の検出性を向上します。 製品 P8375、タイプ VI は、塩を含まない凍結乾燥粉末です。 溶液中のグルコースおよび過酸化物の定量に、一般的に使用されます。 頸髄神経の感覚入力の研究に使用されています。

生物化学的／生理学的作用

HRP は過酸化水素（H₂O₂）と容易に結合し、[HRP-H₂O₂] 複合体が様々な水素ドナーを酸化します。本酵素の至適 pH は 6.0 ～ 6.5 であり、5.0 ～ 9.0 で最も安定です。HRP は、グルタルアルデヒド、過ヨウ素酸酸化、ジスルフィド結合、あるいは、アミノおよびチオールによる架橋剤などの様々な方法によって、抗体と結合させることができます。HRP は、βガラクトシダーゼやアルカリ性ホスファターゼによる酵素標識よりも小さく、安定であるため、最も理想的な標識です。また、そのグリコシル化によって、非特異的結合を低減します。

西洋ワサビペルオキシダーゼは、基質とインキュベートすると、標識化した分子の発色性、蛍光性、または化学発光性の誘導体を生成し、定量を可能にします。 西洋ワサビペルオキシダーゼは、cydAB ミュータントにおける阻害レベルをわずかに低減することが示されています。 報告されている阻害剤は、アジ化ナトリウム、シアン化物、L-シスチン、二クロム酸、エチレンチオウレア、ヒドロキシルアミン、硫化物、バナジン酸、p-アミノ安息香酸、ならびにCd²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺、および Pb²⁺ イオンです。

単位の定義

1ピロガロールユニットは、pH 6.0、20°Cで 20秒あたり1.0 mgのプルプロガリンをピロガロールから生成する酵素量です。

アナリシスノート

RZ(Reinheitszahl)値は、0.5~1.0 mg/mL脱イオン水溶液で測定したA₄₀₃/A₂₇₅の吸光度比です。これはヘミン含量を測定するもので、酵素活性を測定するものではありません。RZ値の高い標品でも酵素活性が低いことがあります。

その他情報

ペルオキシダーゼに関する詳細情は、www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorerをご覧ください。

安全性情報

• ピクトグラム: GHS08
• シグナルワード: Danger
• 危険有害性情報: H334
• 注意書き: P261 - P284 - P501
• 危険有害性の分類: Resp. Sens. 1
• 保管分類コード: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• 個人用保護具 (PPE): Eyeshields, Gloves, type N95 (US)