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遺伝子組換え/融合タグタンパク質の精製

タグ特異的アフィニティークロマトグラフィーによる遺伝子組換えタンパク質の精製は、組換えタンパク質を極めて特異的に認識し精製できることが実証された手法です。遺伝子組換えタンパク質の発現・精製・検出には、非常に長い時間と労力を要することがあります。ターゲットとなるタンパク質やその発現系に応じてタンパク質タグを追加することで、一般的手順、例えば発現中のタンパク質溶解、アフィニティークロマトグラフィーによる精製、または単離・精製後の免疫検出などの結果を改善することができます。私たちは、各種融合タグのためのアフィニティーカラムとレジンを、磁気ビーズ、パックカラム、アガロースレジンスラリーなど数多くのフォーマットで提供し、さまざまな規模と幅広いアプリケーションのすべてに対応した製品を取り揃えています。



Cytiva™ Amershamクロマトグラフィーカラム・担体(日本国内取扱いなし)

手動または自動化された方法によりタンパク質を精製するCytiva™ Amershamクロマトグラフィーの担体を各種取り揃えています。プレパック製品には、自然落下クロマトグラフィー用カラム、スピンカラム、96ウェルプレート、自動クロマトグラフィーシステムに用いる充填済カラムがあります。

  • Hisタグ付きタンパク質:固定化金属イオンアフィニティークロマトグラフィー(IMAC)を用いた迅速かつ簡便なヒスチジンタグ付き遺伝子組換えタンパク質の精製。Ni Sepharose担体はニッケルイオン(Ni2+)でプリチャージされており、TALON® Superflow™担体はコバルトイオン(Co2+)でプリチャージされています。
  • GSTタグ付きタンパク質:Glutathione Sepharoseクロマトグラフィー担体は、ラボパック、充填済GSTrapカラムおよびGSPrepカラム、ならびに96ウェルプレートで利用できます。細菌溶解液精製用にGST精製モジュールを提供しています。GST SpinTrapモジュールにはGlutathione Sepharose 4B SpinTrapプレパックカラムのほか、精製に必要なバッファーを同梱しています。RediPack GST精製モジュールには自然落下カラムおよびバッファーを同梱しています。
  • Strep-tag™ IIタグ付きタンパク質Strep-tag IIはStrepTactin™ Sepharose High Performanceレジンに特異的に結合します。このレジンはSepharoseベースマトリックスに固定されたStrepTactinリガンドを含んでおり、標的タンパク質を精製します。
  • MBPタグ付きタンパク質:Dextrin Sepharose High Performanceは、マルトース結合タンパク質(MBP)でタグ付けした組換えタンパク質を精製するためのクロマトグラフィー担体です。

アガロースビーズ・アフィニティーゲル

アガロースビーズとアフィニティーゲルを使えば、アガロースビーズに架橋したリガンドを用いて融合タグ付きタンパク質を精製することができます。小~大規模の非変性条件、変性条件、または穏やかな還元条件での精製に向いており、ビーズおよびゲルが低圧仕様のため、こうしたレジンは自然落下カラムによる精製やバッチ処理での低速遠心分離および低圧クロマトグラフィー法に適しています。EZview™アフィニティーゲルは赤色染料を含んでいるため、ペレットと上清を簡単に識別でき、バッチ精製中のタンパク質の損失を抑えることができます。免疫沈降キットにはアフィニティーゲル、ミニスピンカラム、溶解試薬が含まれ、特に免疫沈殿物から最大量のタンパク質を回収できるよう設計されています。

Superflowアガロース・High-flowアフィニティーゲル

SuperflowアガロースおよびHigh-flowアフィニティーゲルには、標準のアガロースビーズレジンよりも高圧に耐えられる高架橋アガロースビーズを使用しています。このため、高速タンパク質液体クロマトグラフィー(FPLC)精製法に適したレジンになっています。SuperflowアガロースおよびHigh-flowアフィニティーゲルは、大規模精製をする際の担体としてお勧めです。

磁気ビーズ

磁気ビーズは遺伝子組換え融合タグ付きタンパク質の精製に使用され、磁気ラックまたはプラットフォームを用いて洗液および溶出液分画からビーズを分離します。本法により非変性または変性条件下で秒単位の迅速処理ができ、シングルマイクロチューブでのロースループットまたは96ウェルプレートを用いた自動ハイスループットに適しています。

BugBuster®精製キット

BugBuster®精製キットはアフィニティーレジン、洗浄バッファー、溶出バッファー、抽出試薬をセットにしたもので、E. coli由来の可溶性細胞抽出液を簡便に調製でき、タグ付き融合タンパク質をアフィニティー精製することができます。