Duolink^™In Situ簡易プロトコル－蛍光顕微鏡観察用

1.	ブロッキング サンプルにブロッキング溶液を添加し、 インキュベートします。 • ブロッキング溶液を除去します
2.	一次抗体 適切なバッファーで一次抗体を希釈し、サンプルに添加し、 インキュベートします。 • 適切なバッファーで5分×2回洗浄します。
3.	PLA™プローブ 適切なバッファーで2つのPLA™プローブを1:5に希釈し、サンプルに添加します。 37℃、60分で反応させます。 • 洗浄バッファーAで5分×2回洗浄します。
4.	ライゲーション ライゲーションストック溶液をH2Oで1:5に希釈します。 この溶液でリガーゼを1:40で希釈し、サンプルにこの混合液を添加します。 37℃、30分で反応させます。 •  1x洗浄バッファーAで2分×2回洗浄します。
5．	増幅 増幅ストック溶液をH2Oで1:5に希釈します。この溶液でポリメラーゼを1:80で希釈し、サンプルにこの混合液を添加します。 37℃、100分で反応させます。 • 1x洗浄バッファーBで10分×2回洗浄します。 • 0.01x洗浄バッファーBで1分洗浄します。
6．	イメージングの準備 DAPI含有Duolink™ In Situマウント培地を用いてサンプルを封入します。15分経過後、蛍光顕微鏡または共焦点顕微鏡で解析します。

関連製品

申し訳ございませんが、想定外のエラーが発生しました。

Response not successful: Received status code 500

注記：

• 反応液は、カバースリップなしで液滴がオープンな状態で使用し、インキュベーションはすべて加湿チャンバー内で行ってください。
• 冷凍庫（－20ºC）から酵素を取り出す際には、フリージングブロックを使用してください。 
• 洗浄は、最低でも70 mL入れ、オービタルシェーカー上で穏やかな速度で行ってください。