세포 배양 문제 해결

세포주 오식별

최근 연구에 따르면 오식별은 사용 중인 모든 세포주의 최대 1/3에 영향을 미칠 수 있는 것으로 추정됩니다. 이러한 발견은 세포주 모델의 결과를 기반으로 생물학적 시스템에 대해 발표된 연구 결과에 의문을 제기할 수 있는 잠재력을 가지고 있습니다. 세포주 오식별/교차 오염을 유발하는 요인은 다음과 같습니다.

• 공격적인 세포주에 의한 오염: 아이소엔자임 분석에 따르면 많은 세포주가 희귀한 효소 이소폼을 HeLa 세포와 공유하는 것으로 나타났습니다. HeLa는 이후 배양 스톡에서 가장 흔한 침습성 세포주로 밝혀졌습니다.
• 문서화 및 라벨링 관행: 세포 배양 플라스크, 플레이트, 냉동 바이알, 냉동고에 명확하게 라벨을 부착하고 액체 질소 보관 지도를 엄격하게 유지하여 세포주의 추가, 인출, 재배치를 반영해야 합니다.
• 세포주 대여: 세포주를 대여할 수 있습니다: 이웃 실험실 간에 세포를 공유하는 것은 세포주 신원 오류를 초래하는 일반적인 관행입니다. 세포주는 영국 공중보건국의 유럽 인증 세포 배양 컬렉션인 ECACC와 같은 평판이 좋은 세포 저장소에서만 얻어야 합니다.

세포주 교차 오염의 일반적인 원인과 그 결과로부터 작업을 보호하는 방법에 대해 알아보세요.

세포 배양의 미생물 오염

세포 배양 배지와 배양 조건은 박테리아, 곰팡이, 바이러스 오염 물질뿐만 아니라 세포에 이상적인 환경을 제공합니다. 무균 배양 기술을 철저하게 준수하려면 배양액을 정기적으로 현미경으로 검사하여 박테리아 및 곰팡이 침입의 증거가 있는지 확인해야 합니다. 전체 배양의 최대 30%가 마이코플라즈마에 오염된 것으로 추정되기 때문에 일부 유비쿼터스 미생물 오염 물질은 육안 탐지를 피할 수 있습니다. 눈에 보이지 않는 마이코플라스마를 검출하기 위해 고안된 시약과 키트는 바이러스 오염 물질을 검출하는 데에도 사용할 수 있는 PCR 증폭을 기반으로 하는 경우가 많습니다.

생물학적 및 화학적 오염 물질이 없는 배양을 유지하는 방법에 대해 알아보세요.

세포 성장 불량

건강해 보이는 배양 세포가 합쳐지지 않는다면 실망스러울 수 있습니다. 오염 물질을 배제했을 때, 건강한 세포 증식을 방해하는 몇 가지 가능한 장벽은 다음과 같습니다:

• 배양/동결 배지 상태 및 품질
• 보충제의 품질 및 적용 적합성
• 동결 또는 통과 중 부정확한 세포 열거

세포가 생존 가능한 것처럼 보이지만 확장되지 않을 때, 액체 질소로 돌아가기 전에 최적의 성장을 위해 배양 조건을 개선하기 위해 무엇을 할 수 있는지 알아보세요.

부착 세포 표현형의 분리

부착 세포는 배양에서 단독으로 또는 시트 단위로 자연적으로 분리될 수 있습니다. 부착성 배양이 그렇게 유지되지 않는 경우, 확인할 사항과 배양에서 응집력을 복원하는 방법을 알아보세요.

세포 응집

현탁액 상태의 세포는 생체 내 상태를 단일 세포로 모방합니다. 세포가 뭉치기 시작하는 것은 배양에 스트레스를 받을 때 배지에 존재하는 끈적끈적한 핵산 때문일 수 있습니다. 배지에 무엇이 숨어 있어 세포가 뭉칠 수 있을까요? 배양에서 덩어리를 없애는 방법에 대해 여기에서 자세히 읽어보세요

배양 중 세포 사멸

배양 중 세포가 사멸할 때는 먼저 미생물에 의한 오염을 배제해야 합니다. 세포의 건강 상태가 좋지 않거나 표현형과 일치하지 않는 행동에 기여할 수 있는 다른 요인은 다음과 같습니다:

• 냉동 보관 조건
• 세포 통과 수/과잉 유입
• 환경 스트레스
• 해리 효소에 의한 과소화

적절한 장비, 검증된 시약, 전문가 프로토콜은 예상치 못한 세포 배양 결과 해결.

배양 배지의 침전물

오염이 아닌 경우 배지 내 미립자는 종종 무기물에 대한 설명이 있습니다. 균형 잡힌 완충액과 배지 구성 성분을 이해하고, 배지 구성 성분을 현탁 상태로 유지하는 방법에 대해 자세히 알아보세요.