단백질 풀다운 기술

Affinity GST Pull-Down Applications

글루타티온 S-전이 효소(GST)는 대부분의 유기체에서 발견되는 211개의 아미노산으로 구성된 단백질입니다. GST는 종종 E. coli 단백질 발현 시스템 내에서 융합 태그를 생성하기 위해 발현 벡터에 통합됩니다. GST 태그는 약 26kDa의 대형 단백질 태그이며 박테리아, 효모, 포유류, 곤충 세포에 발현될 수 있습니다. GST 태그는 재조합형 단백질을 세포 내 단백질분해효소 절단으로부터 보호해야 할 때, 그리고 태그된 단백질의 용해성을 강화해야 할 때 유리하게 작용합니다. 또한 GST 단백질은 순한 용출 조건에서 수행되는 저렴한 친화성 레진을 이용한 풀다운 분석과 쉬운 정제용 고친화성 태그를 제공합니다.

Co-Immunoprecipitation

풀다운 분석은 특정 단백질의 활성화 상태와 함께 알려지지 않은 단백질-단백질 상호작용을 식별하는 탁월한 방법 및 공동 면역침전법의 결과 검증에 이상적입니다. 친화성 풀다운 분석과 달리 IP는 항체를 사용하여 복잡한 생물학적 샘플에서 항원에 결합하여 분리합니다. 

Co-IP는 다중단백질 복합체에서 항원과 결합하기 위해 항체를 사용하는 것을 뜻합니다. 그런 다음 복합체는 단백질 A 또는 단백질 G 배지를 첨가하여 포획합니다. 단백질 A/G는 다클론 및 단클론 IgG형 항체의 Fc 부위와 높은 친화력을 가지고 있어 관심 단백질 복합체의 정제에 중요한 성분입니다. 단백질 풀다운 분석은 단백질-단백질 상호작용 네트워크를 조사하기 위해 필수적인 방법이지만, 특정 방법의 선택은 연구자의 특정 적용 필요에 의해 결정됩니다.