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분자 복제 및 단백질 발현

이 이미지는 발현 플라스미드에서 시작하여 핵에서의 전사, 번역, 국소화 등의 단계를 거쳐 정제로 마무리되는 표현형으로 이어지는 단백질 발현 과정을 설명하는 다이어그램입니다. 다이어그램은 색상으로 구분되어 있으며, 분홍색은 전체 과정을 나타내고 노란색은 핵을 강조 표시합니다. 여기에는 "발현 플라스미드", "핵", "전사", "mRNA", "번역", "표현형", "국소화", "정제" 등의 레이블이 포함되어 있습니다.

분자 복제의 목적은 복제, 복제 선택 및 단백질 발현을 용이하게 하기 위해 다양한 요소를 포함하는 원형 DNA 조각인 플라스미드 벡터에 관심 유전자(GOI)를 삽입하는 것입니다. 연구자들은 종종 DNA 제한 효소와 리가제를 사용하여 후속 단백질 발현을 위해 발현 벡터 내에 GOI를 인프레임으로 삽입합니다. 그런 다음 이 벡터를 GOI가 코딩한 단백질을 발현할 세포에 삽입하거나 무세포 단백질 합성 시스템을 사용하여 단백질 발현을 수행합니다.

단백질이 발현되면 세포 신호, 형태 또는 세포 내 다른 측면에 영향을 미치는 단백질의 기능을 연구할 수 있습니다. 또는 단백질을 대량으로 발현하고 정제하여 다양한 다운스트림 애플리케이션에 사용할 수 있습니다. 자세한 내용은 곤충, 박테리아 및 포유류 단백질 발현 시스템을 위한 복제 및 발현 워크플로에서 사용할 수 있는 신뢰할 수 있는 시약과 리소스의 포괄적인 제품을 살펴보세요.


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제한 효소와 DNA 변형 효소

분자 복제에서 연구자들은 종종 DNA를 절단하는 제한 효소와 핵산을 변형하는 변형 효소라는 두 가지 일반적인 유형의 효소를 결합 단계 전에 사용합니다. 알칼리성 포스파타제, 프로테아제, T7 RNA 중합효소, 리보뉴클레아제 A 및 T4 DNA 리가제와 같은 다양한 제한 효소와 기타 변형 효소를 살펴보고 모든 연구 요구에 맞는 효소를 찾아보세요.

CMV 프로모터와 FLAG® 태그 기술을 사용한 무세포 발현 시스템 및 발현 벡터

당사의 복제 및 발현 포트폴리오는 간소화된 프로토콜과 복제 키트를 갖춘 다목적 벡터 모음을 제공함으로써 유전 공학을 더 저렴하고 효율적으로 만듭니다. 셀프리 단백질 합성 또는 발현 시스템(예: 차세대 무세포 단백질 발현 키트(밀 배아)ALiCE® 키트와 같은 시스템을 포함합니다. 또한 일시적 또는 안정적 감염 시스템에서 원형질 또는 세포질 발현을 위한 박테리아 및 포유류 FLAG® 발현 벡터를 발견하고 자신 있게 FLAG®을 발현할 수 있습니다.sup>® 또는 3X FLAG® 서열을 N- 또는 C- 말단에 엔테로키나아제(Ek) 절단 부위와 결합하여 필요한 경우 융합 태그를 제거할 수 있습니다.

Novagen® pET 시스템, SnapFast™ Vectors, Simplicon™ 벡터 및 UCOE™ 단백질 발현 시스템

모든 E. 대장균 발현 벡터와 곤충 발현 벡터는 암피실린 내성을 부여하여 양성 형질전환체를 쉽게 선택할 수 있습니다. 박테리아 발현에서 재조합 단백질의 복제 및 발현을 위한 표준인 Novagen® pET 시스템에 대해 알아보십시오. 옥스포드 제네틱스에서 설계한 SnapFast™ 벡터 제품군은 빠르고 쉬운 프로토콜을 제공하여 곤충, 효모, 박테리아 및 포유류 발현 시스템과 호환되는 벡터를 생성하여 SnapFast™ 절단 부위를 사용하여 한 벡터에서 다른 벡터로 GOI를 전송할 수 있습니다. 당사의 유비쿼터스 크로마틴 개방 요소(UCOE™) 발현 벡터 기술을 사용하면 안정적으로 형질 전환된 포유류 세포에서 30일 이내에 그램의 단백질을 얻을 수 있습니다. UCOE™ 발현 기술은 트랜스 유전자 침묵을 방지하고 염색체 통합 부위에 관계없이 기존 벡터보다 최대 20배 높은 수준의 일관되고 안정적이며 높은 수준의 유전자 발현을 제공합니다. Simplicon™ 생체 내 단백질 발현 시스템은 유전체 통합의 위험 없이 여러 유전자의 단백질을 이식된 인간 세포에 즉각적이고 지속적으로 발현시키는 비유전체 통합, 조정 가능, 합성 자가 복제 RNA 기반 발현 시스템입니다..

박테리아 및 효모 형질 전환 시약 및 자원

박테리아 형질 전환은 열 충격 및 전기 천공과 같은 방법을 사용하여 박테리아에 외부 DNA를 삽입하는 과정입니다. 당사의 유능한 세포 포트폴리오는 가장 까다로운 재조합 단백질도 최적의 단백질 발현을 위해 설계되었습니다. 유능 세포 선택 가이드를 검색하여 단백질 발현, 일상적이거나 어려운 복제, 라이브러리 생성 등 다양한 응용 분야를 위한 새로운 세균 유능 세포 중에서 선택해 보시기 바랍니다. 또한, 사카로미세스 세레비지애의 재조합 단백질 발현은 간단한 프로토콜, 기본 시약 사용, 확장성 등 많은 장점을 가지고 있습니다. 단백질 발현 워크플로우의 일부로 효모 형질 전환에 사용할 수 있는 다양한 제품을 살펴보세요. 감염 효율과 플라스미드 보존에 최적화된 당사의 NovaBlue® 유능한 세포는 우수한 라이브러리 준비와 플라스미드 안정성을 지원합니다. 또한, Novagen® 역량 세포는 적절한 단백질 폴딩, 용해도 증가 또는 세포 독성 단백질의 발현을 촉진하도록 설계되었습니다. 가장 인기 있는 브랜드는 Rosetta™, Origami™ 및 Overnight Express™ 시스템입니다.


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