FLAG® 정화

FLAG® 태그는 재조합 융합 단백질의 탁월한 검출과 강력한 정제를 가능하게 하며, 결합 및 활성 분석에서 구조 분석에 이르는 다양한 다운스트림 응용 분야에서 그 유용성이 입증되었습니다. FLAG® 에피토프 태그는 엔테로키나제(EK)에 의해 쉽게 절단되는 짧은 친수성 8아미노산 펩타이드(DYKDDDDK 태그)입니다. 작은 크기와 친수성 특성으로 인해 FLAG® 태그는 일반적으로 융합 단백질의 표면에 존재하여 융합 단백질의 기능, 분비 또는 수송에 미치는 영향을 최소화합니다. 최종 응용 분야에 관계없이, 당사는 FLAG® 융합 단백질을 발현, 정제 및 검출하는 데 필요한 도구를 보유하고 있습니다.
제품

ANTI-FLAG® M2 antibody, Mouse monoclonal
1 mg/mL, clone M2, affinity isolated antibody, buffered aqueous solution (50% glycerol, 10 mM sodium phosphate, and 150 mM NaCl, pH 7.4)

ANTI-FLAG® M2 Affinity Gel
purified immunoglobulin, buffered aqueous glycerol solution

Anti-FLAG® M2 Magnetic Beads
affinity isolated antibody

ANTI-FLAG® M2 antibody, Mouse monoclonal
clone M2, purified immunoglobulin (Purified IgG1 subclass), buffered aqueous solution (10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH 7.4, containing 0.02% sodium azide)

3xFLAG™ Peptide
≥90% (HPLC/MS), lyophilized powder

ANTI-FLAG® M2-Peroxidase (HRP) antibody, Mouse monoclonal
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous glycerol solution

ANTI-FLAG® antibody produced in rabbit
affinity isolated antibody, buffered aqueous solution

FLAG® Peptide
≥85% (HPLC), lyophilized powder

EZview™ Red ANTI-FLAG® M2 Affinity Gel
clone M2

ANTI-FLAG® M2-FITC antibody, Mouse monoclonal
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous solution

ANTI-FLAG® M2 antibody, Mouse monoclonal
Clone M2, purified from hybridoma cell culture in bioreactor

ANTI-FLAG® BioM2 antibody, Mouse monoclonal
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous glycerol solution

ANTI-FLAG® M1 Agarose Affinity Gel

FLAG® Immunoprecipitation Kit

Monoclonal ANTI-FLAG® antibody produced in rabbit
clone SIG1-25, ascites fluid

Monoclonal ANTI-FLAG® M1 antibody
clone M1, purified immunoglobulin, buffered aqueous solution

Monoclonal ANTI-FLAG® M2-Cy3 antibody, Mouse monoclonal
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous solution (Supplied as a solution in 10 mM sodium phosphate)

Monoclonal ANTI-FLAG® M2-Alkaline Phosphatase antibody produced in mouse
clone M2, purified immunoglobulin, buffered aqueous glycerol solution

Anti-FLAG Tag antibody produced in rabbit
affinity isolated antibody

FLAG® HA Tandem Affinity Purification Kit

FLAG® 태그 단백질 발현
박테리아 및 포유류 시스템에서 재조합 융합 단백질의 효율적인 발현을 위한 벡터를 포함하는 당사의 FLAG® 태그 단백질 발현 포트폴리오에는 박테리아 및 포유류 시스템에서 재조합 융합 단백질의 효율적인 발현을 위한 벡터가 포함됩니다. SnapFast™ 벡터 기술을 사용하면 관심 있는 유전자를 한 벡터에서 다른 벡터로 쉽게 이동하여 보다 효율적이고 비용 효율적인 복제를 수행할 수 있습니다.
- 표준 FLAG® 펩타이드(서열: DYKDDDDK)는 단백질 용해성에 대한 입체 간섭이나 부정적인 영향을 최소화하면서 통합할 수 있는 작은 태그입니다.
- 3xFLAG 태그 서열은 융합 단백질의 향상된(최대 200배) 검출을 위해 세 개의 탠덤 FLAG® 에피토프를 융합합니다.

FLAG® 태그 단백질 정제
FLAG® 태그 단백질의 분리 및 정제를 위한 다양한 아가로스 친화성 정제 젤, 마그네틱 비드, 정제 키트 및 코팅 플레이트를 제공합니다.
- 아가로스 친화성 겔은 비드 아가로즈에 교차 결합된 항-FLAG® 항체를 사용하여 융합 태그 단백질 정제가 가능하며 소규모에서 대규모 정제에 적합하고 중력 흐름 컬럼 정제에 적합한 수지입니다.
- Anti-FLAG® M2 마그네틱 비드는 자기 랙 또는 플랫폼을 사용하여 재조합 융합 태그 단백질 정제에 사용되며, 비드를 분리하고 신속한 처리를 위해 단백질을 분리하는 데 사용됩니다.
- Anti-FLAG® 고감도 M2 코팅 96웰 플레이트는 발현 스크리닝, 단백질-단백질 상호작용 연구 및 ELISA 분석에 적합합니다.

FLAG® 태그 탐지
FLAG® 및 3xFLAG™ 태그에는 고도로 특이적인 항-FLAG® 단클론 항체뿐만 아니라 ELISA, 블로팅 응용, 면역 형광, 면역 세포 화학, 면역 조직 화학(IHC), 블로팅 및 유세포 분석용 다클론 항체 및 컨쥬게이트에 대한 결합 부위를 포함합니다.
- M2 항 FLAG® 항체는 N-말단 FLAG®, C-말단 FLAG® 및 Met-FLAG® 융합 단백질에 결합합니다.
- M1 항 FLAG® 항체 결합은 칼슘 의존적이며 FLAG® 태그의 N-말단에 특이적으로 결합합니다.
- M5 항 FLAG® 항체는 N-말단 FLAG® 및 Met-FLAG® 융합 단백질에 결합합니다.
FLAG® 항체 선택 가이드
| 단클론 항체 FLAG® | 단클론 항 FLAG® 마우스에서 생산된 M2 항체 | 단클론 항 FLAG® M2 항체/sup> 마우스에서 생산된 M5 항체 | ||
|---|---|---|---|---|
| 카탈로그 번호 | F3040 | F1804 | F3165 | F4042 |
| 클론 | M1 | M2 | M2 | M5 |
| 형태 | 완충 수용액 | 완충된 글리세롤 수용액(아자이드 나트륨 없음) | 완충된 수용액(아자이드 나트륨 함유) | 완충 수용액 |
| 면역원 서열 | DYKDDDDK | DYKDDDDK | DYKDDDDK | DYKDDDDK |
| 항체 정제 방법 | 단백질 A 세파로스에서 정제 | 독점적인 FLAG®에서 정제 펩타이드-아가로오스 | 단백질 A 세파로스 정제 | 단백질 A 세파로스 정제 |
| KD | 53.4 nM | 9.3 nM | 9.3 nM | 사용 불가 |
| 특이성 | 고도로 특이적입니다. 자유 N-말단에 위치할 때 FLAG® 에피토프만 인식합니다. | N-말단, Met-N-말단, C-말단 또는 융합 단백질의 모든 내부 부위에서 FLAG® 서열을 인식합니다. | 메트-N FLAG® 융합 단백질에 대한 강력한 인식. N- 또는 C-말단 융합 단백질과의 결합은 약함. | |
| 감도 | 도트 블롯에서 1ng의 FLAG-BAP™ 융합 단백질 검출 | 도트 블롯에서 2ng의 단백질 검출 | 도트 블롯에서 1ng의 Met-FLAG® 융합 단백질 검출 | |
| 추천 대상: | 포유류, 식물 및 박테리아 발현 시스템에서 FLAG® 융합 단백질의 검출에 권장됩니다. 친화성 정제에 매우 유용합니다. 세포질 발현 단백질의 검출에는 권장되지 않습니다. | 표적 단백질의 웨스턴 블롯 검출은 E. coli, 식물 또는 포유류 세포 용해물에서 발현되는 표적 단백질의 웨스턴 블롯 검출 | 포유류 및 초파리 세포 용해물에서 발현되는 표적 단백질의 웨스턴 블롯 검출. 세포질에서 발현되는 Met-FLAG 융합 단백질의 검출에 특히 유용합니다. 대장균에서 발현되는 융합 단백질의 검출에는 권장되지 않습니다. coli | |
| 응용 분야* | IP, IC, WB, EIA | IP, IC, WB, EIA | IP, IC, WB, EIA | WB |
| 특별 요구사항 | 결합에는 칼슘이 필요합니다. (칼슘 이온이 없으면 복합체가 해리됨) | 해당 없음 | 해당 없음 | 해당 없음 |
FLAG® 항체 결합 특성
관련 리소스
- Brochure: Refine Protein Preparation
Today, researchers are challenged to create high quality samples for meaningful protein analysis, often using cumbersome traditional sample preparation methods. With over 50 years of experience in developing protein sample preparation technologies, Merck is constantly innovating new tools to offer you rapid and efficient solutions that can be smoothly integrated into your workflow.
- User Guide: FLAG - Proven System for Detection and Purification of Proteins
The FLAG Expression System is an established way to express, purify, and detect recombinant fusion proteins. FLAG and 3×FLAG® have proven utility in numerous applications such as Western blotting, immunocytochemistry, immunoprecipitation, flow cytometry, protein purification, and in the study of protein-protein interactions, cell ultrastructure, and protein localization. These small hydrophilic tags facilitate superior detection and purification of recombinant fusion proteins when using our highly specific and sensitive ANTI-FLAG® antibodies.
- Application Note: EZview™ Red Protein A and ANTI-FLAG® M2 Affinity Gels - Immunoprecipitation with Enhanced Visibility Affinity Beads
The strength and specificity of interactions between biomolecules have been exploited for years in biochemical research. Affinity-based protein purification techniques have been used extensively to isolate and purify specific proteins or classes of proteins from complex biochemical mixtures, such as cell lysates..
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