Merck

DUO92004

Sigma-Aldrich

Sonda para PLA® in situ Duolink® anti-ratón MINUS

Affinity purified Donkey anti-Mouse IgG (H+L)

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Sinónimos:
in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent
NACRES:
NA.32

biological source

donkey (polyclonal)

Quality Level

antibody form

affinity purified immunoglobulin (secondary antibody)

antibody product type

primary antibodies

product line

Duolink®

species reactivity

mouse

technique(s)

immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable

suitability

suitable for brightfield
suitable for fluorescence

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immunofluorescence: suitable, proximity ligation assay: suitable

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General description

La sonda para PLA® in situ Duolink® anti-ratón MINUS contiene IgG (H+L) anti-ratón de burro purificada mediante afinidad, que reacciona con la molécula completa de IgG de ratón y reacciona también con las cadenas ligeras de otras inmunoglobulinas de ratón.

Application

El análisis de ligadura de proximidad DuoLink®(PLA®) permite la detección endógena de interacciones proteicas, modificaciones postraduccionales y niveles de expresión de proteínas a nivel monomolecular en células fijas y muestras de tejido.

Este producto puede aplicarse tanto al protocolo de fluorescencia in situ DuoLink® como al protocolo de campo brillante in situ DuoLink® en función de los reactivos de detección utilizados.

Para realizar un experimento completo de PLA in situ DuoLink® necesitará dos anticuerpos primarios (validados para PLA, IHC, ICC o IF ) que reconozcan dos epítopos específicos. Otros reactivos necesarios son un par de sondas para PLA de diferentes especies (una PLUS y una MINUS), reactivos de detección, disoluciones tampón de lavado y medio de montaje. Nótese que los anticuerpos primarios deben proceder de las mismas especies que las sondas para PLA Duolink®. El análisis se lleva a cabo utilizando un equipo de inmunofluorescencia convencional. También se dispone de HRP para detección en campo brillante.
La sonda para PLA Specificity
anti-ratón reacciona con la molécula completa de IgG de ratón y las cadenas ligeras de otras inmunoglobulinas de ratón. La sonda para PLA anti-ratón puede experimentar reacciones cruzadas con los anticuerpos de rata, pero tiene mínima reactividad cruzada con las proteínas del suero bovino, de pollo, cabra, conejillos de india, hámster sirio, caballo, humano, conejo y oveja. Con este producto debe utilizarse simultáneamente una sonda PLUS de una especie diferente. Consulte nuestra Guía de selección de productos si desea más información.

Nota de aplicación
Se necesitan dos anticuerpos primarios inducidos en diferentes especies. Analice sus anticuerpos primarios (clase IgG, monoclonales o policlonales) en una prueba convencional de inmunofluorescencia (IF), inmunohistoquímica (ICH) o inmunocitoquímica (ICC) para determinar las condiciones óptimas de fijación, bloqueo y valoración. Los reactivos para PLA Duolink® in situ son adecuados para su utilización en células fijadas, células de citoespín, células cultivadas en portaobjetos, fijadas en formol, incluidas en parafina (FFPE) o en tejido (fresco o congelado). No se requiere un número mínimo de células.

Déjenos hacer el trabajo por usted, obtenga más información sobre nuestro Programa de atención al Ciente para acelerar sus proyectos DuoLink®

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Features and Benefits

  • No se requiere sobreexpresión ni manipulación genética
  • Elevada especificidad (menos falsos positivos)
  • Sensibilidad de molécula única debido a amplificación por círculo rodante
  • Posible cuantificación relativa
  • No se precisa un equipo especial
  • Más rápida y sencilla que la FRET
  • Mayor precisión en comparación con la co-IP
  • Resultados listos para publicación

Components

Este producto está compuesto por lo siguiente:
  • 5x Sondas para PLA anti-ratón MINUS - Anticuerpo anti-ratón de burro secundario conjugado con oligonucleótidos MINUS
  • 1x Disolución de bloqueo - Reactivo para bloqueo de la muestra
  • 1x Diluyente del anticuerpo - Para dilución de las sondas de PLA y los anticuerpos primarios
Para más información, consulte la Ficha técnica.

Preparation Note

Almacenamiento y estabilidad: Conservar la sonda para PLA anti-ratón MINUS a 2–8°C. No conservar la disolución de sonda para PLA anti-ratón MINUS diluida.

Legal Information

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

pictograms

Exclamation markEnvironment

signalword

Warning

Hazard Classifications

Aquatic Chronic 2 - Skin Sens. 1

Storage Class

12 - Non Combustible Liquids

wgk_germany

WGK 3

flash_point_f

Not applicable

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Not applicable


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Novel function of ceramide for regulation of mitochondrial ATP release in astrocytes.
Kong J N, et al.
Journal of Lipid Research, M081877-M081877 (2018)
Interaction of the Mouse Polyomavirus Capsid Proteins with Importins Is Required for Efficient Import of Viral DNA into the Cell Nucleus.
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Proximal Ligation Assay (PLA) on Lung Tissue and Cultured Macrophages to Demonstrate Protein-protein Interaction.
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Bio-protocol, 7(21) (2017)
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Science translational medicine, 10(451) (2018-07-27)
Missense mutations in leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) cause familial Parkinson's disease (PD). However, a potential role of wild-type LRRK2 in idiopathic PD (iPD) remains unclear. Here, we developed proximity ligation assays to assess Ser1292 phosphorylation of LRRK2 and, separately
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British journal of cancer, 103(5), 663-667 (2010-08-12)
Protein tyrosine kinase 6 (PTK6; breast tumour kinase) is overexpressed in up to 86% of the invasive breast cancers, and its association with the oncoprotein human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) was shown in vitro by co-precipitation. Furthermore, expression

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Proteins are complex biological molecules essential for cellular structure and functions. The majority of proteins commonly interact with various molecules, including other proteins, in order to exert their functions.

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Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol

Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.

Protocolos

This protocol describes the use of Duolink® PLA reagents for the brightfield detection, visualization, and quantification of individual proteins, protein modifications, and protein interactions in tissue and cell samples.

Protocol for use of Duolink® PLA reagents for the detection of individual proteins, protein modifications, and protein-protein interactions within cell populations by flow cytometry.

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Applications to detect, quantify and visualize protein-protein interactions, post-translational modifications and low expression protein detection using proximity ligation assay

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