Merck

DUO92008

Sigma-Aldrich

Reactivos rojos para detección in situ Duolink®

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Sinónimos:
in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent
NACRES:
NA.32

product line

Duolink®

Quality Level

technique(s)

proximity ligation assay: suitable

fluorescence

λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®, Zeiss Filter set 31)

suitability

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DUO92007DUO92013DUO92014
fluorescence

λex 594 nm; λem 624 nm (Texas Red®, Zeiss Filter set 31)

fluorescence

λex 554 nm; λem 576 nm (Cyanine 3; Zeiss Filter set 20)

fluorescence

λex 644 nm; λem 669 nm (Cyanine 5, Zeiss Filter set 50)

fluorescence

λex 495 nm; λem 527 nm (green) (FITC (Cyanine 2), Zeiss Filter set 38)

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suitable for fluorescence

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Application

El ensayo de ligadura de proximidad (PLA®) Duolink® permite la detección endógena de interacciones proteicas, modificaciones postraduccionales y niveles de expresión de proteínas al nivel de molécula única en células y muestras de tejido fijas.

Siga el protocolo de fluorescencia in situ Duolink® para usar este producto También se dispone de un conjunto de instrucciones cortas.

Visite nuestro Centro de recursos de PLA Duolink® si desea información sobre cómo realizar un experimento Duolink®, las aplicaciones, la resolución de problemas y más.

Para realizar un experimento de PLA Duolink® in situ se necesitan dos anticuerpos primarios (PLA, IHC, ICC o IF validados) que reconozcan dos epítopos específicos. Otros reactivos necesarios son un par de sondas de PLA de diferentes especies (una MAS y una MENOS), reactivos de detección, disoluciones tampón de lavado y medio de montaje. Nótese que los anticuerpos primarios deben proceder de las mismas especies que las sondas para PLA Duolink®. El análisis se lleva a cabo utilizando un equipo de inmunofluorescencia estándar.

Especificidad
A menudo se utilizan reactivos de detección de fluorescencia roja con el filtro Texas Red®.

Nota de aplicación
Se necesitan dos anticuerpos primarios producidos en especies diferentes. Analice sus anticuerpos primarios (clase IgG, monoclonal o policlonal) en inmunofluorescencia (IF), inmunohistoquímica (ICH) o inmunocitoquímica (ICC) convencionales para determinar las condiciones de fijación, bloqueo y valoración. Los reactivos Duolink® in situ son adecuados para su utilización en células fijadas, células de cytospin, células cultivadas en portaobjetos, fijadas en formalina o incluidas en parafina (FFPE), o en tejido (fresco o congelado). No se requiere un número mínimo de células.

Déjenos hacer el trabajo por usted, obtenga más información sobre nuestro Programa de atención al Cliente para acelerar sus proyectos Duolink®.

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Especificidad
Los reactivos de detección de fluorescencia roja suelen utilizarse con el filtroTexas Red® .

Nota de aplicación
Two primary antibodies raised in different species are needed. Analice sus anticuerpos primarios (clase IgG, monoclonales o policlonales) en una prueba convencional de inmunofluorescencia (IF), inmunohistoquímica (ICH) o inmunocitoquímica (ICC) para determinar las condiciones óptimas de fijación, bloqueo y valoración. Los reactivos Duolink® in situ son adecuados para su utilización en células fijadas, células de citoespín, células cultivadas en portaobjetos, fijadas en formol o incluidas en parafina (FFPE), o en tejido (fresco o congelado). No se requiere un número mínimo de células.

Déjenos hacer el trabajo por usted, obtenga más información sobre nuestro Programa de atención al Ciente para acelerar sus proyectos DuoLink®

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Features and Benefits

  • No se requiere sobreexpresión ni manipulación genética
  • Elevada especificidad (menos falsos positivos)
  • Sensibilidad de molécula única debido a amplificación por círculo rodante
  • Posible cuantificación relativa
  • No se precisa un equipo especial
  • Más rápida y sencilla que la FRET
  • Mayor precisión en comparación con la co-IP
  • Resultados listos para publicación

Components

Este producto está compuesto de lo siguiente:
  • 5X ligadura - Contiene oligonucleótidos que hibridan con las sondas PLA y todos los componentes necesarios para la ligadura, salvo la ligasa
  • 1x Ligasa (1 unidad/μl)
  • 1 x Polimerasa (10 unidades/μl)
5x Amplificación Rojo - Contiene todos los componentes necesarios para la amplificación por circulo rodante (RCA) excepto la polimerasa.. Contiene también sondas de oligonucleótidos marcadas con un fluoróforo que híbrida con el producto de la RCA.
Véase la ficha de datos para más información.

No incluido en el kit de detección:

Anticuerpos primarios, sondas para PLA, disoluciones tampón de lavado, medio de montaje

Legal Information

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Texas Red is a registered trademark of Life Technologies

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Descripción
Precios

Storage Class

10 - Combustible liquids

wgk_germany

WGK 2


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H J Wright et al.
Oncogene, 35(36), 4762-4772 (2016-02-16)
Triple-negative breast cancer (TNBC) is a highly aggressive and metastatic form of breast cancer that lacks the estrogen, progesterone and HER2 receptors and is resistant to targeted and hormone therapies. TNBCs express high levels of the transmembrane glycoprotein, complement C1r/C1s
Francesca Gabanella et al.
Journal of cell science, 129(4), 804-816 (2016-01-09)
Disconnection between membrane signalling and actin networks can have catastrophic effects depending on cell size and polarity. The survival motor neuron (SMN) protein is ubiquitously involved in assembly of spliceosomal small nuclear ribonucleoprotein particles. Other SMN functions could, however, affect
Hyun Jik Lee et al.
Cell death and differentiation, 26(9), 1716-1734 (2018-11-23)
Hypoxia inducible factor 1α (HIF1α) is a master regulator leading to metabolic adaptation, an essential physiological process to maintain the survival of stem cells under hypoxia. However, it is poorly understood how HIF1α translocates into the nucleus in stem cells
Laura Poillet-Perez et al.
Oncotarget, 8(34), 55998-56020 (2017-09-17)
The GABARAPL1 protein belongs to the ATG8 family whose members are involved in autophagy. Our laboratory previously demonstrated that GABARAPL1 associates with autophagic vesicles, regulates autophagic flux and acts as a tumor suppressor protein in breast cancer. In this study
Takashi Miyamoto et al.
The Journal of biological chemistry, 291(4), 1719-1734 (2015-11-22)
Diverse lines of evidence suggest that amyloid-β (Aβ) peptides causally contribute to the pathogenesis of Alzheimer disease (AD), the most frequent neurodegenerative disorder. However, the mechanisms by which Aβ impairs neuronal functions remain to be fully elucidated. Previous studies showed

Artículos

Proteins are complex biological molecules essential for cellular structure and functions. The majority of proteins commonly interact with various molecules, including other proteins, in order to exert their functions.

Learn how Proximity Ligation Assay technology works and how the protein-protein interaction control kit can confirm in situ detection of EGF-induced EGFR-HER2 dimerization.

Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol

Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.

Protocolos

This protocol describes how to perform immunofluorescent detection of proteins in cells and tissue.

This page details the Duolink® In Situ Short Protocol for fluorescence detection

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