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Medios y tampones clásicos

Los medios de cultivo celular incluyen el DMEM, el RPMI, el MEM, el Medio 199 y las formulaciones de Ham

Las variaciones en los medios de cultivo celular se han ido refinando en respuesta a la necesidad de entornos fisiológicamente apropiados para diversos cultivos de células de mamífero. Estos medios y sales, junto con sus componentes, han sido calificados aptos para aplicaciones de cultivo celular y se fabrican en nuestras instalaciones de vanguardia. Elija los medios adecuados para su aplicación según los siguientes parámetros:

  • Concentración alta o baja de glucosa
  • L-glutamina o glutamina estable
    enriquecida con (Ala-Gln) o sin glutamina
  • Con o sin el indicador de pH rojo fenol
  • Formatos en polvo o líquido

DMEM (medio Eagle modificado de Dulbecco)

El DMEM (medio Eagle modificado de Dulbecco) es, entre los medios definidos para cultivo celular y de tejidos, el medio más adecuado para muchos fenotipos de células adherentes. La modificación de Dulbecco es una formulación complementaria mejorada que aumenta hasta cuatro veces el contenido de determinados aminoácidos y vitaminas del medio original de Eagle. Nuestra selección abarca una gama de concentraciones de glucosa, así como formulaciones con y sin L-glutamina. Disponemos de productos sin el indicador de pH rojo fenol para aplicaciones sensibles a los estrógenos, y nuestra completa oferta incluye prácticos formatos líquidos listos para usar, así como económicos medios en polvo para facilitar el almacenamiento y prolongar el periodo de validez.

Medios RPMI 1640

Los medios RPMI 1640, que deben su nombre al instituto Roswell Park, donde fueron desarrollados por Moore y cols., están optimizados para cultivar tipos de células no adherentes, como los linfocitos y otras células sanguíneas. La formulación se basa en la serie de medios RPMI 1630 en los que se utiliza un sistema de amortiguación de bicarbonato y alteraciones en las cantidades de aminoácidos y vitaminas. El medio RPMI 1640 se ha utilizado para el cultivo de leucocitos humanos sanos y neoplásicos. Cuando se enriquece de la manera correcta, esta formulación ha demostrado una gran aplicabilidad para propiciar el crecimiento de muchos tipos de células cultivadas, como los linfocitos humanos frescos en el ensayo de estimulación con fitohemaglutinina (PHA) de 72 horas.

Medio con rojo fenol para cultivo celular

Formulaciones de los medios DMEM/ F12

En los últimos años, los investigadores han comunicado el cultivo de una variedad de líneas celulares en medio carente de suero que contenía un suplemento de nutrientes, factores de crecimiento y hormonas en lugar del suero. Mather y Sato (BBRC, 1985) comunicaron el cultivo satisfactorio de células de Leydig y Sertoli en medio carente de suero que contenía insulina, transferrina, factor de crecimiento epidérmico, hormona de leutinización u hormona estimulante de los folículos, somatomedina y hormona de crecimiento. Aunque las hormonas y sus concentraciones son específicas para el tipo de célula en estudio, el medio que resultó óptimo en estos estudios fue una mezcla 1:1 de medio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) y mezcla de nutrientes F-12 de Ham. Puede incluirse en la formulación el tampón HEPES a una concentración final de 15 mM para compensar la pérdida de capacidad amortiguadora que se produce al eliminar el suero.

Medios de cultivo celular esterilizados por filtración en unidades de filtración Stericup

MEM (medio esencial mínimo)

Desarrollado por Harry Eagle cuando trabajaba en los NIH, el medio esencial mínimo (MEM) contiene aminoácidos esenciales universales para los requisitos de varias especies, y es uno de los medios de cultivo celular sintéticos más utilizado. Los primeros intentos de cultivar fibroblastos de mamíferos sanos y ciertos subclones de células HeLA revelaron que tenían requisitos nutricionales específicos que el medio basal de Eagle (BME) no podía satisfacer. Estudios posteriores con éstas y otras células en cultivo indicaron que podrían realizarse adiciones al BME para contribuir al crecimiento de una mayor variedad de células más exigentes. El MEM, que incorpora estas modificaciones, incluye mayores concentraciones de aminoácidos para que el medio se aproxime más a la composición proteica de las células de los mamíferos.

El MEM se ha utilizado para el cultivo de una amplia variedad de células cultivadas en monocapas. El enriquecimiento opcional con aminoácidos no esenciales de las formulaciones que incorporan sales de Hanks o de Earle ha ampliado la utilidad de este medio. La formulación se ha modificado aún más mediante la eliminación opcional del calcio para permitir el crecimiento de células en suspensión.

Formulaciones de los medios F-10 y F-12 de Ham

Las mezclas de nutrientes de Ham se desarrollaron en un principio para reforzar el crecimiento de varios clones de células de ovario de hámster chino (CHO), así como clones de células HeLA y células L de ratón, pero también son adecuadas para cultivo de hepatocitos, fusión vírica y ensayos de toxicidad. Estas mezclas se formularon para utilizarse con o sin enriquecimiento con suero, dependiendo del tipo de célula cultivada.

  • Se ha demostrado que el F-10 de Ham favorece el crecimiento de células diploides humanas, glóbulos blancos y explantes primarios de tejidos de rata, conejo y pollo.
  • El F-12 de Ham se ha utilizado para el crecimiento de hepatocitos primarios de rata y células epiteliales de próstata de rata. Se ha comunicado un ensayo de toxicidad clonal con células CHO utilizando el F-12 de Ham, también disponible con HEPES 25 mM que proporciona una amortiguación más eficaz en el intervalo de pH óptimo de 7,2 - 7,4
  • La modificación de Coon del F-12 de Ham se desarrolló para cultivar células híbridas producidas por fusión vírica. Esta modificación consiste en duplicar la concentración estándar de aminoácidos y piruvato, más la inclusión de ácido ascórbico y concentraciones salinas ajustadas. La fórmula de Coon contiene 0,863 mg/l de sulfato de cinc, lo que puede hacerla inadecuada para el cultivo de células L de ratón.
  • La modificación de Kaighn del F-12 de Ham (también llamado F-12K de Ham) tiene mayores concentraciones de determinados aminoácidos y de piruvato, así como sales modificadas (fórmula de Konigsberg). Este medio fue diseñado para propiciar el crecimiento de células de rata y pollo diferenciadas, así como de hepatocitos humanos primarios.

Medio 199 (M199)

Los primeros medios de cultivo de tejido estaban formulados predominantemente a partir de productos animales o de extractos de tejidos. En 1950, el equipo de Morgan comunicó sus esfuerzos por producir una fuente nutricional estrictamente definida para los cultivos celulares. Sus experimentos, realizados con varias combinaciones de vitaminas, aminoácidos y otros factores, revelaron que podría medirse el crecimiento de tejido explantado en lo que se ha conocido como medio 199 (M199), ahora ampliamente utilizado en virología, producción de vacunas, cultivos de explantes de tejido primarios y el cultivo in vitro de tejido epitelial pancreático de ratón y de cristalino de rata.

Los investigadores encontraron finalmente que el cultivo prolongado de células requería el enriquecimiento del líquido de cultivo con suero. Cuando se enriquece adecuadamente, el medio 199 tiene una amplia aplicabilidad en especies, en particular para el cultivo de células no transformadas.

Sales basales para cultivo celular

D-PBS, formulación de Hanks, de Earle, de Tyrode: encontrará la formulación correcta para su cultivo en la colección más completa disponible de sales equilibradas.

Otros medios clásicos para cultivo celular

Encuentre formulaciones especializadas como las modificaciones de Ames, Iscove y Glasgow, además de las de Click, Fischer, L-15, McCoy, CTC y otras.


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