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Purificación de proteínas recombinantes o de fusión etiquetadas

La purificación de proteínas recombinantes mediante cromatografía por afinidad específica de etiqueta es una tecnología probada que produce un reconocimiento y purificación muy específicos de las proteínas recombinantes. La expresión, purificación y detección de las proteínas recombinantes pueden resultar un empeño largo y laborioso. Dependiendo de la proteína de interés y del sistema de expresión, pueden añadirse etiquetas proteicas para mejorar el resultado de etapas comunes, como la solubilidad de la proteína durante la expresión, la purificación mediante cromatografía de afinidad o la inmunodetección después del aislamiento y la purificación. Ofrecemos columnas y resinas de afinidad para varias etiquetas de fusión en numerosos formatos, como microesferas magnéticas, columnas cargadas y pastas de resina de agarosa, lo que garantiza que tenemos productos para todas las escalas y aplicaciones.


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Columnas y medios de cromatografía Cytiva™ Amersham

Disponemos de una amplia gama de medios de cromatografía Cytiva™ Amersham para purificar proteínas utilizando métodos manuales o automáticos. Los formatos precargados abarcan las columnas de gravedad, las columnas de centrifugación, las placas de 96 pocillos y las columnas precargados para utilizar con sistemas de cromatografía automatizados.

  • Proteínas etiquetadas con His: Purificación rápida y cómoda de proteínas recombinantes marcadas con histidina utilizando cromatografía de afinidad por iones metálicos inmovilizados (IMAC). Los medios de Ni sefarosa están precargados con iones níquel (Ni2+); el medio TALON®Superflow™ está precargado con iones cobalto (CO2+).
  • Proteínas etiquetadas con GST: Los medios de cromatografía de glutatión sefarosa están disponibles en paquetes de laboratorio, columnas GSTrap y GSPrep precargadas y placas de 96 pocillos. Se ofrecen módulos de purificación de GST para la purificación de lisados bacterianos. Los módulos GST SpinTrap incluyen columnas de glutatión sefarosa 4B SpinTrap precargadas, así como los tampones necesarios para la purificación. Los módulos de purificación RediPack GST incluyen columnas de flujo por gravedad y tampón.
  • Proteínas etiquetadas con Strep-tag™ II: Strep-tag II se une específicamente a la resina de alto rendimiento de sefarosa StrepTactin™, que tiene inmovilizado el ligando StrepTactin en una matriz de sefarosa para producir la proteína deseada pura.
  • Proteínas etiquetadas con MBP: El medio cromatográfico de alto rendimiento de dextrina sefarosa purifica las proteínas recombinantes etiquetadas con la proteína de unión a la maltosa (MBP).

Microesferas de agarosa y geles de afinidad

Las microesferas de agarosa y los geles de afinidad permiten la purificación de proteínas de fusión etiquetadas utilizando ligandos reticulados con agarosa granulada. Estas resinas, buenas para la purificación a pequeña o gran escala en condiciones nativas, desnaturalizantes o suavemente reductoras, son adecuadas para la purificación en columna de flujo por gravedad, la centrifugación a baja velocidad en el procesamiento por lotes y los procedimientos de cromatografía de baja presión, ya que las microesferas y los geles están diseñados para presiones más bajas. Los geles de afinidad EZView™ incorporan un colorante rojo que permite al usuario diferenciar fácilmente los sedimentos del sobrenadante, lo que produce una menor pérdida de proteínas durante la purificación por lotes. Los kits de inmunoprecipitación constan de geles de afinidad, columnas de mini-giro y reactivo de lisis, y están diseñados en especial para permitir la recuperación máxima de proteínas de los inmunoprecipitados.

Geles de agarosa Superflow y de afinidad de flujo elevado

Los geles de agarosa Superflow y de afinidad de flujo elevado utilizan microesferas de agarosa muy entrecruzadas que pueden soportar presiones más elevadas en comparación con las resinas de microesferas de agarosa convencionales. Esto hace que estas resinas sean adecuadas para los métodos de purificación mediante cromatografía líquida de proteínas a gran velocidad (FPLC). Se recomienda el uso de geles de afinidad de flujo alto y de agarosa Superflow para la purificación a escala de media a grande.

Microesferas magnéticas

Las microesferas magnéticas se utilizan para purificar proteínas de fusión recombinante etiquetadas utilizando una gradilla o plataforma magnética para separar las microesferas de las fracciones de lavado y elución. Este procedimiento permite un procesamiento rápido en condiciones nativas o desnaturalizantes en cuestión de segundos, y es adecuado para un bajo rendimiento utilizando tubos individuales de microcentrífuga o un mayor rendimiento utilizando placas de 96 pocillos y automatización.

Kits de purificación BugBuster®

Los kits de purificación BugBuster® combinan resina de afinidad, tampones de lavado, tampones de elución y reactivo de extracción para una preparación cómoda de extractos celulares solubles y purificación por afinidad de proteínas de fusión etiquetadas de E. coli.




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