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Purificación de proteínas recombinantes/etiquetadas por fusión

La purificación de proteínas recombinantes mediante cromatografía de afinidad específica de etiquetas es una tecnología de eficacia probada que permite el reconocimiento y la purificación altamente específicos de proteínas recombinantes. La expresión, purificación y detección de proteínas recombinantes puede ser una tarea larga y laboriosa. Dependiendo de la proteína de interés y del sistema de expresión, pueden añadirse etiquetas proteínicas para mejorar el resultado de pasos comunes como la solubilidad de la proteína durante la expresión, la purificación por cromatografía de afinidad o la inmunodetección tras el aislamiento y la purificación. Ofrecemos columnas y resinas de afinidad para múltiples etiquetas de fusión en numerosos formatos, como perlas magnéticas, columnas empaquetadas y lechadas de resina de agarosa, lo que garantiza que disponemos de productos para todas las escalas y aplicaciones.


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Cytiva™ Amersham Chromatography Columns and Media

Una amplia gama de medios de cromatografía Cytiva™ Amersham está disponible para purificar proteínas utilizando métodos manuales o automatizados. Los formatos preenvasados incluyen columnas de gravedad, columnas de centrifugación, placas de 96 pocillos y columnas preenvasadas para su uso con sistemas de cromatografía automatizados.

  • Proteínas marcadas con histidina: Purificación rápida y cómoda de proteínas recombinantes marcadas con histidina mediante cromatografía de afinidad de iones metálicos inmovilizados (IMAC). El medio Ni Sepharose está precargado con iones de níquel (Ni2+); el medio TALON® Superflow™ está precargado con iones de cobalto (Co2+).
  • Proteínas marcadas con GST: Los medios de cromatografía Glutathione Sepharose están disponibles en paquetes de laboratorio, columnas GSTrap y GSPrep preenvasadas y placas de 96 pocillos. Se ofrecen módulos de purificación de GST para la purificación de lisados bacterianos. Los módulos GST SpinTrap incluyen columnas preenvasadas Glutathione Sepharose 4B SpinTrap, así como los tampones necesarios para la purificación. Los módulos de purificación RediPack GST incluyen columnas de flujo por gravedad y tampón.
  • Proteínas etiquetadas con Strep-tag™ IIStrep-tag II se une específicamente a StrepTactin™ resina Sepharose High Performance, que tiene StrepTactin ligando inmovilizado en una matriz de base Sepharose para producir proteína diana pura.
  • Proteínas marcadas con MBP: El medio de cromatografía de alto rendimiento Dextrin Sepharose purifica proteínas recombinantes marcadas con proteína de unión a maltosa (MBP).

Granos de agarosa y geles de afinidad

Las microesferas de agarosa y los geles de afinidad permiten la purificación de proteínas marcadas por fusión utilizando ligandos reticulados a la agarosa en microesferas. Buenas para la purificación a pequeña y gran escala en condiciones nativas, desnaturalizantes o ligeramente reductoras, estas resinas son adecuadas para la purificación en columna de flujo por gravedad, la centrifugación a baja velocidad en el procesamiento por lotes y los procedimientos de cromatografía a baja presión, ya que las perlas y los geles están diseñados para presiones más bajas. Los geles de afinidad EZview™ incorporan un colorante rojo que permite al usuario diferenciar fácilmente el pellet del sobrenadante, lo que se traduce en una menor pérdida de proteínas durante la purificación por lotes. Los kits de inmunoprecipitación incluyen geles de afinidad, minicolumnas y reactivo de lisis y están especialmente diseñados para permitir la máxima recuperación de proteínas a partir de inmunoprecipitados.

Superflow Agarose and High-flow Affinity Gels

Superflow agarose and High-flow affinity gels utilizan perlas de agarosa altamente reticuladas que pueden soportar presiones más altas en comparación con las resinas de perlas de agarosa estándar. Esto hace que estas resinas sean adecuadas para los métodos de purificación por cromatografía líquida rápida de proteínas (FPLC). La agarosa Superflow y los geles de afinidad de alto flujo se recomiendan para la purificación a media y gran escala.

Magnetic Beads

Las microesferas magnéticas se utilizan para purificar proteínas recombinantes marcadas con fusión utilizando una gradilla o plataforma magnética para separar las microesferas de las fracciones de lavado y elución. Este procedimiento permite un procesamiento rápido en condiciones nativas o desnaturalizantes en cuestión de segundos, y es adecuado para un bajo rendimiento utilizando tubos de microcentrífuga individuales o un mayor rendimiento utilizando placas de 96 pocillos y automatización.

Kits de purificación BugBuster®

Los kits de purificación BugBuster® combinan resina de afinidad, tampones de lavado, tampones de elución y reactivos de extracción para una preparación cómoda de extractos celulares solubles y purificación por afinidad de proteínas de fusión marcadas a partir de E. coli.


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