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Enzimas para análisis farmacológico

Enzimas β-glucuronidasa y sulfatasa para análisis farmacológicos

La mayoría de los medicamentos, hormonas y xenobióticos son metabolizados por los organismos humanos y animales en moléculas hidrófilas y luego rápidamente excretados en los líquidos corporales, principalmente la orina. Esos fármacos y moléculas conjugados se conjugan principalmente con glucurónidos o sulfatos (glucuronoconjugados y sulfoconjugados). En los seres humanos, la glucuronidación es la principal vía metabólica de fase II. Los conjugados son difíciles de detectar y cuantificar mediante instrumentos cromatográficos, cromatografía de gases (GCMS) y cromatografía de líquidos (LCMS). La hidrólisis con beta-glucuronidasa o sulfatasa rompe los enlaces conjugados y revierte los fármacos, las hormonas y los xenobióticos de nuevo a su forma libre inicial. Los analitos liberados son fácilmente “visibles” y medibles con los instrumentos de laboratorio para su cribado o cuantificación.

Las enzimas beta-glucuronidasas han estado disponibles para las industrias de las ciencias de la vida y de diagnóstico durante más de cinco décadas, extraídas principalmente de las entrañas de diferentes animales (Helix pomatia o Haliotis rufescens) o de fuentes bacterianas (E. coli). Desde 2015, se ha producido un cambio a beta-glucuronidasas recombinantes en la toxicología analítica y en los análisis sistemáticos de medicamentos y drogas en orina. Debido a la mejora de la calidad analítica, la facilidad de preparación de las muestras, la reducción del tiempo de incubación y la capacidad de automatización, nuestras enzimas beta-glucuronidasas recombinantes (SRE0093, SRE0095) se utilizan cada vez más en múltiples campos de aplicación como enzima analítica.

Campos de aplicación de la beta-glucuronidasa y las sulfatasas como enzimas analíticas

El análisis de medicamentos o drogas en orina (UDT) es la principal aplicación sistemática para la beta-glucuronidasa y las sulfatasas. Las enzimas utilizadas en el UDT se aplican a diferentes tipos de análisis:

  • Análisis forenses de drogas (justicia penal)
  • Pruebas antidopaje humanas (deportes competitivos)
  • Antidopaje animal (carreras competitivas)
  • Análisis de drogas en el lugar de trabajo (nuevos empleados)
  • Pruebas de exposición a xenobióticos (exposición medioambiental)
  • Control de medicamentos de venta con receta y terapéuticos (ensayos de cumplimiento y complementarios)

HIDRÓLISIS CON ENZIMAS

Intervalos de pH óptimos de las glucuronidasas de fuentes comunes

Figura 1.Rangos óptimos de pH para una variedad de glucuronidasas de fuentes comunes.

La hidrólisis eficaz y completa de los metabolitos glucurónido y sulfato es crucial para el análisis de drogas en orina, especialmente cuando se necesita cuantificación. Una larga historia de investigación académica ha encontrado muchas formas de beta-glucuronidasa y sulfatasa en la naturaleza, cada una con propiedades específicas. Uno de los parámetros más impactantes relacionados con la actividad enzimática es el pH. Para ayudarle con sus necesidades de selección de enzimas, consulte nuestra tabla de intervalos de pH óptimos con una lista de pH óptimos para la variedad de glucuronidasas de fuentes comunes.

Nuestras instalaciones llevan fabricando beta-glucuronidasas nativas y recombinantes desde 1960. Todas nuestras beta-glucuronidasas y arilsulfatasas se producen dentro del sistema de calidad ISO9001-1. Seguimos dedicando nuestro esfuerzo a hacer la hidrólisis más rápida, fácil de ejecutar y lista para usar.


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