Análisis de fármacos Enzimas

La mayoría de los fármacos, hormonas y xenobióticos son metabolizados por el organismo humano y animal en moléculas hidrófilas y luego excretados rápidamente en los fluidos corporales, principalmente en la orina. Estos fármacos y moléculas conjugados se conjugan principalmente con glucurónidos o sulfatos (glucuronogonjugados y sulfoconjugados). En los seres humanos, la glucuronidación es la principal vía metabólica de fase II. Los conjugados son difíciles de detectar y cuantificar mediante instrumentos cromatográficos, cromatografía de gases (GCMS) y cromatografía de líquidos (LCMS). La hidrólisis con betaglucuronidasa y/o sulfatasa rompe los enlaces conjugados y devuelve los fármacos, hormonas y xenobióticos a su forma libre inicial. Los analitos liberados son fácilmente "visibles" y medibles por los instrumentos de laboratorio para el cribado o la cuantificación.
Las enzimas betaglucuronidasas han estado disponibles para las industrias de las ciencias de la vida y el diagnóstico durante más de cinco décadas, extraídas principalmente de las vísceras de diferentes animales (Helix pomatia o Haliotis rufescens), o de fuentes bacterianas (E. coli). Desde 2015, se ha producido un cambio hacia las betaglucuronidasas recombinantes en toxicología analítica y pruebas rutinarias de drogas en orina. Debido a la mejora de la calidad analítica, la facilidad de preparación de las muestras, la reducción del tiempo de incubación y la capacidad de automatización, nuestras enzimas beta-glucuronidasas recombinantes (SRE0093, SRE0095) se utilizan cada vez más en múltiples campos de aplicación como enzima analítica.
Productos

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia
Type HP-2, aqueous solution, ≥100,000 units/mL

ββ-Glucuronidasa
from E. coli K 12

ββ-Glucuronidasa/arilsulfatasa
from Helix pomatia

β-Glucuronidase from Escherichia coli
Type IX-A, lyophilized powder, 1,000,000-5,000,000 units/g protein (30 min assay)

Sulfatase from Helix pomatia
Type H-1, sulfatase ≥10,000 units/g solid

ββ-Glucuronidasa from limpets (Patella vulgata)
Type L-II, lyophilized powder, 1,000,000-3,000,000 units/g solid

β-Glucuronidase from Escherichia coli
Type VII-A, lyophilized powder, 5,000,000-20,000,000 units/g protein, pH 6.8 (30 min assay)

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia
Type H-2, aqueous solution, ≥85,000 units/mL

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia
Type H-1, partially purified powder, ≥300,000 units/g solid

β-Glucuronidase from bovine liver
Type B-1, ≥1,000,000 units/g solid

Sulfatase from Helix pomatia
Type H-2, aqueous solution, ≥2,000 units/mL

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia
Type H-5, lyophilized powder, ≥400,000 units/g solid

ββ-Glucuronidasa from limpets (Patella vulgata)
from limpets (Patella Vulgata), aqueous solution

β-Glucuronidase from Escherichia coli
>20,000,000 units/g protein, recombinant, expressed in E. coli, aqueous glycerol solution

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia
Type H-3, aqueous solution, ≥90,000 units/mL

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia
Type HP-2S, aqueous solution, ≥90,000 units/mL

MS β-Glucuronidase
Prebuffered, automation-ready hydrolysis mix

β-Glucuronidase from Escherichia coli
≥10,000,000 units/g protein (30 min assay), recombinant, expressed in E. coli overproducing strain, lyophilized powder

ββ-Glucuronidasa from limpets (Patella vulgata)
aqueous solution

β-Glucuronidase from Escherichia coli
≥20,000 units/mg protein, recombinant, expressed in E. coli overproducing strain, lyophilized powder
Campos de Aplicación para Beta-Glucuronidasa y Sulfatasas como Enzimas Analíticas
El Análisis de Drogas en la Orina (UDT) es la principal aplicación rutinaria para la beta-glucuronidasa y la sulfatasa. Las enzimas utilizadas en UDT se aplican a diferentes tipos de pruebas:
- Pruebas forenses de detección de drogas (justicia penal)
- Pruebas antidopaje en humanos (deportes de competición)
- Antidopaje en animales (carreras de competición)
- Pruebas de exposición a xenobióticos (exposición ambiental)
- Monitorización de medicamentos de prescripción y terapéuticos (cumplimiento y ensayos complementarios)
HIDRÓLISIS CON ENZIMAS

Figura 1.Intervalos óptimos de pH para una variedad de enzimas glucuronidasas de fuentes comunes.
La hidrólisis eficiente y completa de los metabolitos glucurónido y sulfato es crucial para el análisis de drogas en orina, particularmente cuando se necesita cuantificación. Una larga historia de investigación académica ha encontrado muchas formas de beta-glucuronidasa y sulfatasa en la naturaleza, cada una con propiedades específicas. Uno de los parámetros que más influyen en la actividad enzimática es el pH. Para ayudarle con sus necesidades de selección de enzimas, consulte nuestra tabla de intervalos óptimos de pH con una lista de pH óptimos para la variedad de enzimas glucuronidasas de fuentes comunes.
Nuestras instalaciones llevan fabricando beta-glucuronidasas nativas y recombinantes desde 1960. Todas nuestras beta-glucuronidasas y arilsulfatasas se producen dentro del sistema de calidad ISO9001. Seguimos dedicando nuestro esfuerzo en hacer que la hidrólisis sea más rápida, fácil de implementar y lista para usar.
Recursos relacionados
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- Evaluation of Different Enzymes on Hydrolysis Efficiencies of Glucuronide Drug Metabolites in Urine
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