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Análisis de fármacos Enzimas

Enzimas β-glucuronidasa y sulfatasa para el análisis de fármacos

La mayoría de los fármacos, hormonas y xenobióticos son metabolizados por el organismo humano y animal en moléculas hidrófilas y luego excretados rápidamente en los fluidos corporales, principalmente en la orina. Estos fármacos y moléculas conjugados se conjugan principalmente con glucurónidos o sulfatos (glucuronogonjugados y sulfoconjugados). En los seres humanos, la glucuronidación es la principal vía metabólica de fase II. Los conjugados son difíciles de detectar y cuantificar mediante instrumentos cromatográficos, cromatografía de gases (GCMS) y cromatografía de líquidos (LCMS). La hidrólisis con betaglucuronidasa y/o sulfatasa rompe los enlaces conjugados y devuelve los fármacos, hormonas y xenobióticos a su forma libre inicial. Los analitos liberados son fácilmente "visibles" y medibles por los instrumentos de laboratorio para el cribado o la cuantificación.  

Las enzimas betaglucuronidasas han estado disponibles para las industrias de las ciencias de la vida y el diagnóstico durante más de cinco décadas, extraídas principalmente de las vísceras de diferentes animales (Helix pomatia o Haliotis rufescens), o de fuentes bacterianas (E. coli). Desde 2015, se ha producido un cambio hacia las betaglucuronidasas recombinantes en toxicología analítica y pruebas rutinarias de drogas en orina. Debido a la mejora de la calidad analítica, la facilidad de preparación de las muestras, la reducción del tiempo de incubación y la capacidad de automatización, nuestras enzimas beta-glucuronidasas recombinantes (SRE0093, SRE0095) se utilizan cada vez más en múltiples campos de aplicación como enzima analítica. 


Productos

aqueous solution (11)

lyophilized powder (7)

aqueous glycerol solution (2)

partially purified powder (2)

solid (2)

solution (2)

enzymes (21)
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ββ-Glucuronidasa from <I>Helix pomatia</I>
G7017

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia

Type HP-2, aqueous solution, ≥100,000 units/mL

ββ-Glucuronidasa
BGALS-RO

ββ-Glucuronidasa

from E. coli K 12

ββ-Glucuronidasa/arilsulfatasa
BGALA-RO

ββ-Glucuronidasa/arilsulfatasa

from Helix pomatia

β-Glucuronidase from <I>Escherichia coli</I>
G7396

β-Glucuronidase from Escherichia coli

Type IX-A, lyophilized powder, 1,000,000-5,000,000 units/g protein (30 min assay)

Sulfatase from <I>Helix pomatia</I>
S9626

Sulfatase from Helix pomatia

Type H-1, sulfatase ≥10,000 units/g solid

ββ-Glucuronidasa from limpets (<I>Patella vulgata</I>)
G8132

ββ-Glucuronidasa from limpets (Patella vulgata)

Type L-II, lyophilized powder, 1,000,000-3,000,000 units/g solid

β-Glucuronidase from <I>Escherichia coli</I>
G7646

β-Glucuronidase from Escherichia coli

Type VII-A, lyophilized powder, 5,000,000-20,000,000 units/g protein, pH 6.8 (30 min assay)

ββ-Glucuronidasa from <I>Helix pomatia</I>
G0876

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia

Type H-2, aqueous solution, ≥85,000 units/mL

ββ-Glucuronidasa from <I>Helix pomatia</I>
G0751

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia

Type H-1, partially purified powder, ≥300,000 units/g solid

β-Glucuronidase from bovine liver
G0251

β-Glucuronidase from bovine liver

Type B-1, ≥1,000,000 units/g solid

Sulfatase from <I>Helix pomatia</I>
S9751

Sulfatase from Helix pomatia

Type H-2, aqueous solution, ≥2,000 units/mL

ββ-Glucuronidasa from <I>Helix pomatia</I>
G1512

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia

Type H-5, lyophilized powder, ≥400,000 units/g solid

ββ-Glucuronidasa from limpets (<I>Patella vulgata</I>)
SRE0095

ββ-Glucuronidasa from limpets (Patella vulgata)

from limpets (Patella Vulgata), aqueous solution

β-Glucuronidase from <I>Escherichia coli</I>
G0799

β-Glucuronidase from Escherichia coli

>20,000,000 units/g protein, recombinant, expressed in E. coli, aqueous glycerol solution

ββ-Glucuronidasa from <I>Helix pomatia</I>
G8885

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia

Type H-3, aqueous solution, ≥90,000 units/mL

ββ-Glucuronidasa from <I>Helix pomatia</I>
G7770

ββ-Glucuronidasa from Helix pomatia

Type HP-2S, aqueous solution, ≥90,000 units/mL

MS β-Glucuronidase
SRE0103

MS β-Glucuronidase

Prebuffered, automation-ready hydrolysis mix

β-Glucuronidase from <I>Escherichia coli</I>
G8295

β-Glucuronidase from Escherichia coli

≥10,000,000 units/g protein (30 min assay), recombinant, expressed in E. coli overproducing strain, lyophilized powder

ββ-Glucuronidasa from limpets (<I>Patella vulgata</I>)
SRE0093

ββ-Glucuronidasa from limpets (Patella vulgata)

aqueous solution

β-Glucuronidase from <I>Escherichia coli</I>
G8420

β-Glucuronidase from Escherichia coli

≥20,000 units/mg protein, recombinant, expressed in E. coli overproducing strain, lyophilized powder

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Campos de Aplicación para Beta-Glucuronidasa y Sulfatasas como Enzimas Analíticas

El Análisis de Drogas en la Orina (UDT) es la principal aplicación rutinaria para la beta-glucuronidasa y la sulfatasa. Las enzimas utilizadas en UDT se aplican a diferentes tipos de pruebas:

  • Pruebas forenses de detección de drogas (justicia penal)
  • Pruebas antidopaje en humanos (deportes de competición)
  • Antidopaje en animales (carreras de competición)
  • Pruebas de exposición a xenobióticos (exposición ambiental)
  • Monitorización de medicamentos de prescripción y terapéuticos (cumplimiento y ensayos complementarios)

HIDRÓLISIS CON ENZIMAS

Rangos óptimos de pH de las enzimas glucuronidasas de fuentes comunes

Figura 1.Intervalos óptimos de pH para una variedad de enzimas glucuronidasas de fuentes comunes.

La hidrólisis eficiente y completa de los metabolitos glucurónido y sulfato es crucial para el análisis de drogas en orina, particularmente cuando se necesita cuantificación. Una larga historia de investigación académica ha encontrado muchas formas de beta-glucuronidasa y sulfatasa en la naturaleza, cada una con propiedades específicas. Uno de los parámetros que más influyen en la actividad enzimática es el pH. Para ayudarle con sus necesidades de selección de enzimas, consulte nuestra tabla de intervalos óptimos de pH con una lista de pH óptimos para la variedad de enzimas glucuronidasas de fuentes comunes.

Nuestras instalaciones llevan fabricando beta-glucuronidasas nativas y recombinantes desde 1960. Todas nuestras beta-glucuronidasas y arilsulfatasas se producen dentro del sistema de calidad ISO9001. Seguimos dedicando nuestro esfuerzo en hacer que la hidrólisis sea más rápida, fácil de implementar y lista para usar.


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