Analiza HPLC aflatoksyn w paście z orzeszków ziemnych na Ascentis® Express C18 po SPE z użyciem Supel™ Tox AflaZea
Materiały
produkt powiązany
CONDITIONS
sample preparation
Solid Phase Extraction
sample/matrix
raw peanut paste
SPE tube/cartridge
Supel Tox AflaZea, 6 mL (55314-U)
extraction process
suspend 25 g raw peanut paste in 100 mL acetonitrile:water (84:16) extraction solution
sample addition
directly load 2 mL extract onto SPE tube
elution
pull sample through the SPE tube by vacuum at a rate of 8 mL/min
eluate post-treatment
combine 200 μL eluate and 300 μL of water:trifluoroacetic acid:acetic acid (70:20:10 ) derivatization reagent, (heat at 65°C for 25 min, add 500 μL of water to derivatized sample and vortex 30 sec)
column
Ascentis Express C18, 15 cm x 2.1 mm I.D., 2.7 μm particles (53825-U)
mobile phase
[A} acetonitrile; {B} water; (20:80, A:B)
flow rate
0.2 mL/min
column temp.
35 °C
detector
fluorescence, ex 365 nm, em 450 nm
injection
20 μL
sample
B1, G1 (8 ppb), B2, G2 (2 ppb)
Opis
Komentarz do analizy
Aflatoksyny są rakotwórczymi metabolitami wytwarzanymi przez grzyby, które infekują główne produkty rolne. Obecność i stężenie aflatoksyn jest szeroko regulowane. W tym przypadku do analizy derywatyzowanych próbek wyekstrahowanych z surowej pasty z orzeszków ziemnych zastosowano metodę oczyszczania wykorzystującą SPE do usuwania zakłóceń, a następnie analizę za pomocą HPLC z detekcją fluorescencyjną. Metoda HPLC została zoptymalizowana pod kątem wykrywania fluorescencji i ilościowego oznaczania aflatoksyn w stężeniach < 10 ppb.
Inne uwagi
Wstępna obróbka próbki: zawiesić 25 g surowej pasty z orzeszków ziemnych w 100 ml roztworu ekstrakcyjnego acetonitryl:woda (84:16).
Informacje prawne
Ascentis is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Supel is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC