[Przejdź do zawartości](https://www.sigmaaldrich.com#main-content) [![Merck](https://www.sigmaaldrich.com/static/logos/purple/merck.svg)](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl) Produkty Koszyk0 PLPL Produkty ProduktyZastosowaniaUsługiZasobyWsparcie [Zaloguj się / Zarejestruj się](https://www.sigmaaldrich.com/oidc-sign-in) [Wyszukiwanie zamówienia](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/order-lookup) [Szybkie zamówienie](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/quick-order) Koszyk0 [Strona główna](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl)[Chromatografia cienkowarstwowa](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/applications/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography)Wysokowydajna chromatografia cienkowarstwowa: Szybka i wydajna metoda analizy odcisków palców roślin leczniczych # Wysokowydajna chromatografia cienkowarstwowa: Szybka i wydajna metoda analizy odcisków palców roślin leczniczych __Tiên Do, Melanie Broszat, Matthias Nold__ [Artykuł z Analytix Reporter - Wydanie 2](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/collections/analytix-reporter) Ginsenozydy są saponinami triterpenowymi. Większość ginsenozydów składa się ze szkieletu dammaranu (17 węgli w strukturze czteropierścieniowej) z różnymi ugrupowaniami cukrowymi (np. glukozą, ramnozą, ksylozą i arabinozą) przyłączonymi do pozycji C-3 i C-20. Ponad 30 ginsenozydów zostało zidentyfikowanych i sklasyfikowanych w dwóch kategoriach:    - 20(S)- protopanaksadiol (PPD) (Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Rg3, Rh2, Rs1)    - 20(S)-protopanaksatriol (PPT) (Re, Rf, Rg1, Rg2, Rh1). Różnica między PPT      a PPD polega na obecności grupy karboksylowej w pozycji C-6 w PPD. ![Ginsenozydy to saponiny triterpenowe](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/technical-documents/articles/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/ginsenosides-are-triterpene-saponins.png "ginsenosides-are-triterpene-saponins") __Rysunek 1.__ Co więcej, zidentyfikowano również kilka rzadkich ginsenozydów, takich jak saponina ocotillol F11 (24-R-pseudoginsenozyd) i pentacykliczna saponina oleananowa Ro (3,28-o-bisdesmoside). Żeń-szeń azjatycki (Panax ginseng) jest powszechnie znany jako prawdziwy żeń-szeń. W tym artykule przedstawiono metody HPTLC odpowiednie do analizy ginsenozydów przy użyciu sprzętu CAMAG, płytek TLC MilliporeSigma, wzorców analitycznych i materiałów referencyjnych ekstraktu. Materiały referencyjne ekstraktu są produkowane przez HWI Analytik i dystrybuowane wyłącznie przez MilliporeSigma. Wykrywanie ginsenozydów w odcisku palca HPTLC różnych gatunków Panax (korzenie i ekstrakty z korzeni) uzyskuje się zgodnie z metodami HPTLC monografii Ph. Eur. Monografia1 Monografia USP DSC 20152 oraz metoda Stowarzyszenia HPTLC (International Association for the Advancement of HPTLC)3 poprzez porównanie wartości RF i kolorów substancji referencyjnych i pasujących stref w ekstrakcie z korzenia. W zależności od przestrzeganych przepisów można zastosować jedną z trzech metod identyfikacji. ## Zalecane urządzenia CAMAG: Automatyczny próbnik TLC (ATS 4), automatyczna komora wywoływania (ADC 2), wizualizator TLC 2, urządzenie do zanurzania chromatogramów 3, podgrzewacz płytek TLC 3 i visionCATS ## Odczynnik do derywatyzacji: Anizaldehyd1 lub odczynnik kwasu siarkowego2,3 ## Próbka: 0.015 g/mL ekstraktu (ekstrakt HWI) w 70%  metanolu1  *Uwaga: Odchylenie od metod 2 i 3 dla przygotowania próbki* ## Standardy: Standardowe roztwory ginsenozydów przygotowano w stężeniu 0,5 mg/mL w metanolu. *Uwaga: Odchylenie od metody 3 dla objętości aplikacji* ## Chromatografia zgodnie z USP <203> 4: __Faza stacjonarna:__ HPTLC Si 60 F254 20 x 10 cm (MilliporeSigma) __Zastosowanie próbki:__ Po 4 µL roztworu badanego i 2 µL wzorców nanosi się w postaci pasm 8 mm, 8 mm od dolnej krawędzi, 20 mm od lewej krawędzi1, 3 *Uwaga: Odchylenie od metody 3 dla przygotowania próbki i objętości roztworów referencyjnych i testowych* 4 µL roztworu testowego i 4 µL wzorców są nanoszone jako paski 8 mm, 8 mm od dolnej krawędzi, 20 mm od lewej krawędzi2 *Uwaga: Odchylenie od metody 2 dla przygotowania próbki* __Rozpuszczalnik rozwijający:__ Octan etylu - woda - butanol 25:50:100 (*v/v*) - warstwa górna1 Dichlorometan - etanol - woda 70:45:6.5 (*v/v/v*)2 Chloroform - octan etylu - metanol - woda 15:40:22:9 (*v/v/v*)3 __Rozwój:__ W ADC 2 z nienasyconą komorą i po kondycjonowaniu w 33% wilgotności względnej przez 10 min przy użyciu nasyconego roztworu chlorku magnezu1 Rozwijanie jest wykonywane przy użyciu ADC 2, nasyconego przez 20 min rozpuszczalnikiem rozwijającym (bibuła filtracyjna). Przed wywołaniem płytkę kondycjonuje się przez 10 minut do wilgotności względnej 33% (nasyconym roztworem MgCl2).2, 3 __Odległość wywoływania:__ 70 mm (od dolnej krawędzi)1, 2; 80 mm (od dolnej krawędzi)3 __Suszenie płytki:__ 5 min w strumieniu zimnego powietrza __Derywatyzacja:__ Płytkę zanurza się (prędkość zanurzania: 3 cm/s, czas zanurzania: 0 s) w odczynniku anizaldehydowym (mieszanina 0.5 ml *p*-anizaldehydu, 10 ml lodowatego kwasu octowego, 85 ml metanolu i 5 ml kwasu siarkowego) za pomocą urządzenia do zanurzania chromatogramów 3 i ogrzewanego przez 5 minut w temperaturze 105°C.1 Płytkę zanurza się (prędkość zanurzania: 3 cm/s, czas zanurzania: 0 s) w odczynniku kwasu siarkowego (10% w metanolu) za pomocą urządzenia do zanurzania chromatogramów 3 i ogrzewa przez 5 minut w temperaturze 100°C.2, 3 __Ocena:__ Dokumentacja zgodnie z metodą 3 jest prowadzona w świetle białym 100 °C1, 2, 3 i UV 366 nm2, 3 po derywatyzacji za pomocą TLC Visualizer 2 ## Wyniki i dyskusja: ### Chromatogramy HPTLC wzorców ginsenozydów i *Panax ginseng* ekstraktu z korzenia Chromatogramy HPTLC po derywatyzacji. Ścieżki 1-17: ginsenozydy, ścieżka 18: protopanaksadiol, ścieżka 19: *Panax ginseng* ekstrakt z korzenia (nr artykułu: 05115001 partia: HWI01294) ![hptlc-chromatograms-under-white-light-method](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/technical-documents/articles/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/hptlc-chromatograms-under-white-light-method.png "hptlc-chromatograms-under-white-light-method") __Metoda 1:__Według Ph. Eur. Chromatogramy HPTLC w świetle białym po derywatyzacji ![hptlc-chromatograms-under-uv-366-nm](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/technical-documents/articles/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/hptlc-chromatograms-under-uv-366-nm.png "hptlc-chromatograms-under-uv-366-nm") __Metoda 2:__Zgodnie z metodą żeń-szenia Tienshi od Chromatogramy HPTLC przy UV 366 nm i w świetle białym po derywatyzacji ![hptlc-chromatograms-under-uv](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/technical-documents/articles/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/hptlc-chromatograms-under-uv.png "hptlc-chromatograms-under-uv") __Metoda 3:__Według Stowarzyszenia HPTLC Chromatogramy HPTLC pod UV 366 nm i w świetle białym po derywatyzacji. ## Chromatogramy HPTLC roślin zawierających ginsenozydy (różne gatunki Panax) *P. ginseng, P. quinquefolium, P. notoginseng, P. japonicus, P. vietnamensis*  ekstrakty z korzeni i korzeni zostały zebrane i przeanalizowane. Ekstrakt z korzenia P. ginseng (nr artykułu: 0511-50-01 partia: HWI01294) został użyty jako botaniczny materiał referencyjny do identyfikacji żeń-szenia azjatyckiego (ginsenozyd Rf powinien być obecny, a F11 nieobecny). ![hptlc-chromatogramy w świetle białym](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/technical-documents/articles/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/hptlc-chromatograms-under-white-light.png "hptlc-chromatograms-under-white-light") __Metoda 1:__ Według Ph. Eur. Chromatogram HPTLC w świetle białym po derywatyzacji. __Ścieżka 1:__ ginsenozyd Rf (zielona strzałka); __2:__ ginsenozyd F11 (czerwona strzałka); __3:__ *P. ginseng* ekstrakt z korzenia (nr artykułu: 0511-50-01, partia: HWI01294, ginsenozyd Rf wyróżniony zieloną strzałką); __4:__ P. ginseng root (ginsenoside Rf wyróżniony zieloną strzałką); __5:__ *P. quinquefolium* ekstrakt z korzenia (żeń-szeń amerykański, ginsenozyd F11 zaznaczony czerwoną strzałką); __6:__ *P quinquefolium* korzeń (żeń-szeń amerykański, ginsenozyd F11 wyróżniony czerwoną strzałką);  __7:__ *P. notoginseng* ekstrakt z korzenia; __8:__ *P. notoginseng* korzeń; __9:__ *P. japonicas* korzeń; __10:__ *P. vietnamensis* korzeń; __11:__ dziki wietnamski korzeń żeń-szenia. . ![hptlc-chromatograms-under-uv-366-nm-method](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/technical-documents/articles/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/hptlc-chromatograms-under-uv-366-nm-method.png "hptlc-chromatograms-under-uv-366-nm-method") __Metoda 2:__Zgodnie z metodą żeń-szenia Tienshi od Chromatogramy HPTLC przy UV 366 nm i w świetle białym po derywatyzacji ![hptlc-chromatogramy](https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/cms-commons/sigmaaldrich/marketing/global/images/technical-documents/articles/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/hptlc-chromatograms.png "hptlc-chromatograms") __Metoda 3:__Według Stowarzyszenia HPTLC Chromatogramy HPTLC w świetle UV 366 nm i w świetle białym po derywatyzacji. ## Metoda 2 & 3 Parametr: Chromatogramy HPTLC w świetle białym i UV 366 nm po derywatyzacji ginsenozydem Rf (zielone strzałki) i ginsenozydem F11 (czerwone strzałki). __Ścieżka 1: P. ginseng__ ekstrakt z korzenia (nr artykułu: 05115001 partia: HWI01294, ginsenozyd Rf zaznaczony zielonymi strzałkami); __Ścieżka 2:__ *P. ginseng* root (ginsenoside Rf wyróżniony zielonymi strzałkami); __3: P. quinquefolium__ ekstrakt z korzenia (żeń-szeń amerykański, ginsenozyd F11 zaznaczony czerwonymi strzałkami); __4:__ *P quinquefolium* korzeń (żeń-szeń amerykański, ginsenozyd F11  wyróżniony czerwonymi strzałkami); __5: P.notoginseng__ root  extract; __6:__ *P. notoginseng* korzeń; __7:__ *P. japonicas* korzeń; __8:__ *P. vietnamensis* korzeń; __9:__ dziki wietnamski korzeń żeń-szenia. Wszystkie przedstawione metodologie są odpowiednie do wykrywania ginsenozydów w różnych gatunkach Panax. Ginsenozyd Rf jest unikalny dla żeń-szenia azjatyckiego, podczas gdy F11 występuje wyłącznie w żeń-szeniu amerykańskim. Tak więc stosunek Rf/F11 jest używany jako marker fitochemiczny do odróżnienia żeń-szenia amerykańskiego od azjatyckiego. W zastosowanym botanicznym materiale referencyjnym (*Panax ginseng* ekstrakt z korzenia, nr artykułu: 0511-50-01) obecność Rf i brak F11 można było potwierdzić wszystkimi metodami i dlatego nadaje się on do identyfikacji żeń-szenia azjatyckiego. Metody 1 i 2 mają tę zaletę, że są zgodne z oficjalnymi monografiami w farmakopeach (Ph. Eur. resp. USP). Metoda 3 jest alternatywną metodą dostarczoną przez Stowarzyszenie HPTLC. Metoda została ulepszona w celu oddzielenia Rf i F11, aby lepiej odróżnić żeń-szeń amerykański od azjatyckiego. Derywatyzacja odczynnikiem kwasu siarkowego (metody 2 i 3) prowadzi do różnych kolorowych stref pod UV 366 nm, przydatnych do identyfikacji. ## Materiały Przepraszamy, wystąpił nieoczekiwany błąd Response not successful: Received status code 500 ### Referencje 1\. 2008\. Ginseng root: Monograph in Ph. Eur. 8.0. European Directorate for the Quality of Medicines and HealthCare.. 01. Strasbourg: France. 2\. 2017\. Tienchi Ginseng Root and Rhizome Dry Extract: Monograph in USP 40-NF35. United States Pharmacopeial Convention. USA: Rockville, MD. 3\. 2016\. HPTLC identification method for Panax ginseng, HPTLC Association (www.hptlc-association.org). 4\. 2016\. High-Performance Thin-Layer Chromatography Procedure for Identification of Articles of Botanical Origin in USP 39-NF34. United States Pharmacopeial Convention.. USA: Rockville, MD. __Powiązane artykuły__ - [Identyfikacja olejów stałych metodą chromatografii cienkowarstwowej](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/identification-of-fixed-oils-by-thin-layer-chromatography) - [Wskazówki i porady dotyczące chromatografii cienkowarstwowej](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/tips-n-tricks-for-thin-layer-chromatography) - [Płytki TLC Silica Gel 60 G z gipsem](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/tlc-silica-gel-60g-plates-with-gypsum) - [Oznaczanie kwasu askorbinowego i kwasu dehydroaskorbinowego w różnych produktach spożywczych i suplementach - proste podejście oparte na HPTLC](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/technical-documents/technical-article/food-and-beverage-testing-and-manufacturing/chemical-analysis-for-food-and-beverage/determination-of-ascorbic-and-dehydroascorbic-acid) - [Analysis of Catechins in Green Tea by TLC](https://www.sigmaaldrich.com/PL/en/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/analysis-of-catechins-in-green-tea-by-tlc) - [High Performance Thin Layer Chromatography Plates](https://www.sigmaaldrich.com/PL/en/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/high-performance-thin-layer-chromatography-plates) - [Identification of Glycyrrhizic Acid in Licorice](https://www.sigmaaldrich.com/PL/en/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/identification-of-glycyrrhizic-acid-in-licorice) - [History of Thin-Layer Chromatography](https://www.sigmaaldrich.com/PL/en/technical-documents/technical-article/analytical-chemistry/thin-layer-chromatography/tlc-history) - [Zobacz więcej](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/search/facet-search?focus=sitecontent&term=facet-search) __Powiązane kategorie produktów__ - [Standardy fitochemiczne](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/products/analytical-chemistry/reference-materials/phytochemical-standards) - [Normy dotyczące składników żywności i kosmetyków](https://www.sigmaaldrich.com/PL/pl/products/analytical-chemistry/reference-materials/food-and-cosmetic-component-standards) Góra __Zaloguj się, aby kontynuować__ Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować. Zaloguj się__Nie masz konta użytkownika?__Zarejestruj Dla wygody naszych klientów ta strona została przetłumaczona maszynowo. Dołożyliśmy starań, aby zapewnić dokładne tłumaczenie maszynowe. Tłumaczenie maszynowe nie jest jednak doskonałe. Jeśli tłumaczenie maszynowe nie spełnia Twoich oczekiwań, przejdź do wersji w języku angielskim. An unknown error has occured.