Merck

M9692

Sigma-Aldrich

抗 MAP 激酶,活化(二磷酸化 ERK-1&2)抗体,小鼠单克隆

clone MAPK-YT, purified from hybridoma cell culture

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别名:
单克隆抗 MAP 激酶,活化的(二磷酸 ERK-1 和 2)
NACRES:
NA.44

生物来源

mouse

质量水平

偶联物

unconjugated

抗体形式

purified immunoglobulin

抗体产品类型

primary antibodies

克隆

MAPK-YT, monoclonal

形式

buffered aqueous solution

分子量

antigen ERK-1 44 kDa
antigen ERK-2 42 kDa

种属反应性

human, Caenorhabditis elegans, Xenopus, Drosophila, hamster, rat, bovine, mouse, yeast

包装

antibody small pack of 25 μL

浓度

1.5-2 mg/mL

技术

immunocytochemistry: suitable
immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
indirect ELISA: suitable
microarray: suitable
western blot: 0.5-1 μg/mL using a whole cell extract of RAT-1 cells treated with vanadate and H2O2.

同位素/亚型

IgG1

UniProt登记号

运输

dry ice

储存温度

−20°C

靶向翻译后修饰

unmodified

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相关类别

一般描述

丝裂原激活蛋白激酶 (MAPK) 又称细胞外信号调节激酶 (ERK),分为 ERK1 (MAPK3) 和 ERK2 (MAPK1) 两种亚型。ERK2 对应于人类染色体 22q11.2。ERK1 对应于人类染色体 16p11.2。
小鼠抗 MAP 激酶(活化形式,二磷酸化ERK-1&2)单克隆抗体(小鼠 IgG1 同种型)源自 MAPK-YT 杂交瘤,该杂交瘤是由小鼠骨髓瘤细胞 (NS1) 和来自经免疫接种的 BALB/c 小鼠的脾细胞融合产生的 合成磷酸化肽,含有与磷酸化形式的 ERK 活化环相对应、与 KLH 结合的的氨基酸。通过使用小鼠单克隆抗体同种型试剂(产品号ISO2)和双扩散免疫检测,以确定同种型。

特异性

单克隆抗 MAP 激酶,活化的(二磷酸 ERK-1 和 2)对 MAP 激酶的活性、双磷酸化形式(分别为 ERK-1 和 ERK-2,44 kDa 和 42 kDa)具有特异性。在人、牛、大鼠、小鼠、仓鼠、非洲爪蟾 果蝇 草地贪夜蛾线虫和酵母中观察到了反应性。
抗体与 MAP 激酶的二磷酸化形式(ERK-1 和 ERK-2)发生特异性反应。它不能识别 MAP 激酶的非磷酸化或单磷酸化形式或 JNK 和 p38 MAP 激酶的二磷酸化形式。该抗体识别的表位包含活性 MAP 激酶调控站点内的磷酸化苏氨酸和酪氨酸残基。

免疫原

对应于 ERK 活化环磷酸化形式的合成肽 HTGFLpTEpYVAT。

应用

该抗体可用于培养细胞和组织提取物的免疫印迹应用,工作浓度0.5-1.0 μg/mL。1:80-1:100 的工作稀释度适用于免疫组织化学(福尔马林和甲醛固定切片)。该抗体还可用于免疫细胞化学、免疫沉淀、间接 ELISA 和蛋白质微芯片。
小鼠抗 MAP 激酶单克隆抗体(活化状态,二磷酸化ERK-1&2)可用于检测
  • 使用免疫荧光显微镜观察心肌细胞中的 ERK1/2
  • 人嗜酸性粒细胞中的 ERK1/2(免疫印迹法)
  • 蛋白质芯片检测人支气管上皮细胞 ERK
  • 使用免疫荧光试验和免疫印迹分析人肝细胞系中的 ERK 蛋白
  • 免疫沉淀法测定人胚肾细胞中的 ERK1/2

生化/生理作用

酶的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)超家族参与广泛信号通路。 这一家族成员包括ERK1/2(细胞外信号调节蛋白激酶,又称 p42/p44 MAPK)、JNK 和 p38 MAPK 亚家族。这些酶是信号级联反应中的末端酶,每个激酶都会磷酸化并激活序列中的下一个酶。酪氨酸和苏氨酸的磷酸化对完全激活所有 MAPK 至关重要。几种激酶参与激活 ERK级联反应。这一级联反应由小G蛋白 Ras引发,此蛋白受到刺激后会激活 Raf1激酶。Raf1 通过激活 MEK 继续传递。激活后的 MEK 或是唯一能够特异性磷酸化和激活ERK的激酶。ERK 是一种重要的调节分子,可以磷酸化胞浆中的调节靶标(磷脂酶A2,PLA2),也可以磷酸化转移至细胞核中的底物(ELK1)。ERK 级联反应的激活介导并调节信号转导通路,应对应激,响应有丝分裂信号,在发育和分化、学习、记忆和生存中具有重要意义。
抗 MAP 激酶(活化状态,二磷酸化 ERK-1 和 2)单克隆抗体对活性双磷酸化形式的 MAP 激酶(ERK-1 和 ERK-2,分别为 44 kDa 和 42 kDa)具有特异性。该抗体识别的表位包含活性MAP激酶(ERK-2中的Thr183和Tyr185)调节位点内的磷酸化苏氨酸和酪氨酸残基。它无法识别非磷酸化或单磷酸化形式的 MAP 激酶分子,或二磷酸化形式的Jun 激酶 (JNK) 和 p38 MAP 激酶。
MAPK 介导的信号通路与神经退行性疾病和癌症的发病机制有关。ERK1 基因位点的缺失与 DiGeorge 综合征 (DGS) 和腭心面综合征 (VCFS) 以及先天性心脏缺陷有关。MAPK3 基因位点重排可能参与自闭症谱系障碍和精神分裂症的发病机制。

外形

溶于磷酸盐缓冲液 (pH 7.4) 中,含有 15 mM 叠氮化钠。

储存及稳定性

如需连续使用,可在 2-8°C 下储存长达一个月。若要延长储存时间,请在-20°C 下冷冻工作等分试样。不建议反复冻融或储存在无霜冰柜中。如果延长储存时间后出现轻微浑浊,则在使用前离心澄清溶液。如果未在 12 小时内使用,工作稀释液应丢弃。

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储存分类代码

12 - Non Combustible Liquids

WGK

nwg

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Not applicable

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Not applicable

个人防护装备

Eyeshields, Gloves, multi-purpose combination respirator cartridge (US)


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