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蛋白相互作用

Cold Spring Harbor Protocols

用于来自冷泉港协议中常用协议的产品列表

“蛋白质-蛋白质相互作用:选择方案《分子克隆法》,第2版,“,Erica A. Golemis and Peter D. Adams.

化学交联捕获的蛋白质相互作用:与甲醛一步交联

Owen W. Nadeau和Gerald M. Carlson

蛋白质与蛋白质的相互作用:分子克隆法,第2版

摘要

本协议描述了一种使用甲醛完成化学交联蛋白质的方法。除零长交联剂外,甲醛是交联跨度最短(~2-3 ?)的交联剂,因此使其成为非常可靠地检测特定蛋白质-蛋白质相互作用的理想工具。尽管其化学结构简单(CH2O),甲醛的单一羰基基本上起到同双功能试剂的作用,能够通过两种不同的化学途径共达目标。Mannich反应通常需要高温( 37 C或以上) 2 - 24小时才能获得可接受的收率,在这种反应中,甲醛与胺( 1,2或氨的盐)和具有活性氢的化合物缩合形成稳定的交联。甲醛还与胺反应,形成对含蛋白质亲核试剂(包括巯基、胺、酚和咪唑)具有反应性的高反应性阳离子。后一种反应比前一种反应更快,通常在环境温度下的典型蛋白质交联反应中更占优势。

可用于此协议的产品
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