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主页裂解和蛋白提取使用Stabilyser™试剂稳定组织提取物中的RNA和蛋白质

使用Stabilyser™试剂稳定组织提取物中的RNA和蛋白质

简介

使用Stabilyser™试剂维持核酸和功能蛋白质的稳定性,它是在一种均一裂解物混合物中保护核酸和活性蛋白完整性的唯一一种试剂。现在,您能够稳定完全、均匀的组织匀浆,从而使样品与样品之间具有可比性。

方便的一体化Stabilyser™配方可在裂解时保护分析物,并在长期储存期间提供防冻融循环保护,以满足未来的检测需求:

  • 保持来自相同组织样品的功能活性蛋白质和核酸
  • 能长期储存,并且提供防冻融循环保护,以满足未来的检测需求
  • 如果将来需要改变分析物,可将组织样本备案
  • 与蛋白印迹实验方案、功能蛋白质活性测定和qPCR等核酸应用兼容


操作程序:RNA稳定化和/或蛋白质稳定化

需要添加到组织中的Stabilyser™试剂体积,取决于组织类型和所需的蛋白质或核酸的浓度。

通常,建议每mg组织使用20 μL Stabilyser™试剂开始进行优化。

为获得最佳效果,建议使用收获后立即直接制备的新鲜或速冻的组织样品。速冻的组织应一直保持冷冻,直至加入到Stabilyser™试剂中,并用精选的机械匀浆器均化。

对有些应用,在4 °C下裂解,并添加蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂可能是有利的。

  1. 确定组织重量,并将适当体积的Stabilyser™试剂等分到与所需试剂体积相配的干净试管中,并在破坏组织的过程中用机械均浆器搅拌。
  2. 将新鲜或速冻的组织加入预先等分的Stabilyser™试剂中,并立即对组织进行机械均化。
  3. 将均化的样品以12,000-20,000 x g离心15分钟以沉淀碎片。
  4. 将澄清的上清液移至干净的管中。
  5. 如要长期储存,建议将裂解液储存于-70°C。
使用Stabilyzer试剂稳定的蛋白质,即使在室温下放置一天后也能保持酶活性。

使用Stabilyser™试剂稳定的蛋白质,即使在室温下放置一天后也能保持酶活性。

RNA稳定:即使在室温下放置24小时后,GAPDH当量的CT值也是如此。

RNA稳定:即使在室温下放置24小时后,GAPDH当量的CT值也是如此。

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材料
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