วิธีการทดสอบไพโรเจน

ปิโรเจนสามชนิดถูกวาดเป็นสีน้ำเงิน สีฟ้าอมเขียว และสีแดงอมม่วงบนพื้นหลังสีเหลือง

การทดสอบไพโรเจนเป็นการตรวจสอบปริมาณของไพโรเจนในผลิตภัณฑ์ยาหรือยาชีวภาพที่ฉีดเข้าทางหลอดเลือด และได้รับการควบคุมโดยมาตรฐานหลายฉบับจากองค์กรต่างๆ เช่น สำนักงานคณะกรรมการอาหารและยา (FDA) สหรัฐอเมริกา (USP) หรือเภสัชตำรับยุโรป (EP) ความปราศจากเชื้อของผลิตภัณฑ์ไม่ได้หมายความว่าปราศจากไพโรเจน ดังนั้น ยาที่อ้างว่าปราศจากเชื้อจะต้องผ่านการทดสอบไพโรเจนด้วย เพื่อป้องกันการเกิดไข้ในผู้ป่วย

การปนเปื้อนไพโรเจนสามารถเกิดขึ้นได้ระหว่างการผลิตหรือการบริหารยา เวชภัณฑ์ชีวภาพ และอุปกรณ์ทางการแพทย์ แต่การมีอยู่ของไพโรเจนอาจเป็นลักษณะที่มีอยู่โดยธรรมชาติของผลิตภัณฑ์ เช่น สารเสริมฤทธิ์ในวัคซีนหรือไลโปเปปไทด์สังเคราะห์

ขอข้อมูล

หมวดหมู่แนะนำ

ไพโรเจนคือสารที่ก่อให้เกิดไข้ซึ่งมีต้นกำเนิดหลักจากแบคทีเรียหรือจุลินทรีย์อื่น ๆ เช่น ไวรัส หรือยีสต์และเชื้อรา

การทดสอบไพโรเจน

รับรองความปลอดภัย: การทดสอบไพโรเจนในยาด้วยวิธี Monocyte Activation Test (MAT) เพื่อตรวจหาเอนโดทอกซินและไพโรเจนที่ไม่ใช่เอนโดทอกซิน

ช้อปสินค้า

ห้องปฏิบัติการทดสอบความปลอดเชื้อที่ทันสมัย โดยมีเครื่องมือดิจิทัลพร้อมท่อเป็นจุดศูนย์กลาง ล้อมรอบด้วยขวดบรรจุของเหลวหลากหลายชนิดในโทนสีใสและสีเหลืองอำพัน พร้อมจานเพาะเชื้อที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อสีฟ้า สีแดง และใส วางเรียงอยู่บนถาด อีกด้านหนึ่งมีชั้นวางขวดแก้วฝาสีแดงซึ่งน่าจะเป็นตัวอย่างที่เตรียมไว้หรืออาหารเลี้ยงเชื้อ

วัสดุสิ้นเปลืองสำหรับการทดสอบความปราศจากเชื้อ สารอาหาร และเครื่องมือ

เครื่องมือและวัสดุสิ้นเปลืองในห้องปฏิบัติการสำหรับการทดสอบความปราศจากเชื้อในควบคุมคุณภาพทางจุลชีววิทยา: สื่อทดสอบความปราศจากเชื้อ, ปั๊ม, ฮาร์ดแวร์ และอุปกรณ์เสริม

ช้อปสินค้า

ระบบกรองจุลินทรีย์ Millipore พร้อมหน่วยกรองสองชุดอยู่ด้านบนและจานเพาะเชื้อสามจานที่มีตัวอย่างที่เพาะเลี้ยงอยู่ด้านหน้า ระบบมีสีขาวและสีน้ำเงินพร้อมโลโก้ Millipore จานเพาะเชื้อมีอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีสี: หนึ่งสีน้ำเงิน หนึ่งสีชมพู และหนึ่งสีเหลือง

การกรองจุลินทรีย์

เร่งเวลาในการได้ผลลัพธ์ของคุณด้วยการทดสอบจุลินทรีย์อย่างรวดเร็วด้วยระบบกรองเมมเบรนที่ครบชุดของเรา; ใช้ในการทดสอบปริมาณจุลินทรีย์ในผลิตภัณฑ์, การวิเคราะห์อาหารและเครื่องดื่ม, และการทดสอบจุลินทรีย์ในกัญชา

ช้อปสินค้า

A scientist wearing full PPE observes a sample on a microscope.

ไพโรเจนคืออะไร?

ไพโรเจนคือสารที่ทำให้เกิดการเพิ่มขึ้นของอุณหภูมิ (ปฏิกิริยาไข้) ในมนุษย์หรือสัตว์ผ่านการกระตุ้นระบบภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติ สารเหล่านี้เป็นกลุ่มสารปนเปื้อนที่มีความหลากหลาย ประกอบด้วยสารที่มาจากจุลินทรีย์และสารที่ไม่ใช่จุลินทรีย์ ไพโรเจนสามารถจำแนกออกเป็นสองกลุ่ม ได้แก่ เอ็นโดทอกซิน และไพโรเจนที่ไม่ใช่เอ็นโดทอกซิน (NEPs)

เอนโดท็อกซินเป็นสารที่พบในแบคทีเรียแกรมลบ พิโรเจนที่ไม่ใช่เอนโดท็อกซินเป็นสารจุลชีพอื่น ๆ รวมถึงสารที่ได้จากแบคทีเรียแกรมบวกหรือไวรัส และพิโรเจนที่มีต้นกำเนิดจากยีสต์และเชื้อรา สารพิโรเจนที่ไม่ใช่จุลชีพสามารถมีต้นกำเนิดจากอนุภาคยาง อนุภาคพลาสติกขนาดเล็ก หรือสารประกอบโลหะในอีลาสโตเมอร์

มีวิธีการทดสอบหลายวิธีที่สามารถใช้ในการตรวจหาสารพีโรเจนได้ วิธีการเหล่านี้สามารถจำแนกตามประเภทของสารปนเปื้อนที่ตรวจพบและความจำเป็นในการใช้วัสดุจากสัตว์ในการทดสอบ ดังแสดงในตารางด้านล่าง:

การทดสอบไพโรเจนในผลิตภัณฑ์
จากกระต่าย

การทดสอบไพโรเจนในกระต่าย (Rabbit Pyrogen Test: RPT) เป็นการวัดการเพิ่มขึ้นของอุณหภูมิในกระต่ายหลังจากฉีดผลิตภัณฑ์ที่ทดสอบเข้าทางหลอดเลือดดำ ผลที่ได้จากการทดสอบ RPT เป็นเชิงคุณภาพและมีความไวค่อนข้างต่ำ ความทนทานของการทดสอบก็มีข้อจำกัด เนื่องจากกระต่ายอาจพัฒนาความทนทานต่อไพโรเจนหลังจากการฉีดซ้ำหลายครั้ง หรือเกิดความเครียดจากกระบวนการทดสอบ

หมายเหตุ: การทดสอบไพโรเจนในกระต่าย (RPT) ถูกห้ามใช้ในยุโรปแล้ว และขณะนี้การทดสอบการกระตุ้นโมโนไซต์ (MAT) เป็นวิธีที่ได้รับการยอมรับสำหรับการตรวจหาไพโรเจนทั้งชนิดเอนโดทอกซินและไม่ใช่เอนโดทอกซิน

การทดสอบการกระตุ้นโมโนไซต์

การทดสอบการกระตุ้นโมโนไซต์ (Monocyte Activation Test หรือ MAT) เป็นวิธีทางเลือกแทนวิธีการที่ใช้สัตว์ในการตรวจหาสารก่อไข้ทั้งชนิดเอนโดทอกซินและไม่ใช่เอนโดทอกซิน การทดสอบนี้จำลองปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันของมนุษย์โดยการบ่มโมโนไซต์กับตัวอย่างที่ทดสอบ หากมีสารก่อไข้อยู่ โมโนไซต์จะถูกกระตุ้นและผลิตโมเลกุลอักเสบและไซโตไคน์ ซึ่งรับผิดชอบต่อปฏิกิริยาไข้ ไซโตไคน์จะถูกตรวจพบโดยใช้การทดสอบทางภูมิคุ้มกัน (ELISA) ซึ่งเกี่ยวข้องกับแอนติบอดีเฉพาะและปฏิกิริยาทางเอนไซม์ที่ทำให้เกิดสี

หมายเหตุ: ตั้งแต่เดือนกรกฎาคม 2025 คณะกรรมาธิการเภสัชตำรับยุโรป (Ph. Eur.) แนะนำให้ใช้วิธีทดสอบการกระตุ้นโมโนไซต์ (Monocyte Activation Test: MAT) เป็นวิธีที่ต้องการสำหรับการทดสอบสารก่อไข้ โดยวิธีทดสอบสารก่อไข้ในกระต่าย (Rabbit Pyrogen Test: RPT) ถูกห้ามใช้ในยุโรปแล้ว

อ่านบทความและหารือเพิ่มเติมกับผู้เชี่ยวชาญของเราเพื่อดำเนินการไปสู่การตรวจจับ MAT สำหรับเอนโดทอกซินและไพโรเจนที่ไม่ใช่เอนโดทอกซิน และติดตามแนวโน้มด้านกฎระเบียบ

การทดสอบเอนโดทอกซินจากแบคทีเรีย (การทดสอบ LAL)

วิธีที่ใช้กันมากที่สุดในการทดสอบเอนโดทอกซินคือการทดสอบด้วย Limulus amoebocyte lysate (LAL test) ซึ่งเป็นวิธีที่ใช้การทดสอบจากสารสกัดของอะมีโบไซต์จากเลือดของปูม้าลาย (horseshoe crab) สารสกัดจากเซลล์เลือดของปูม้าลายจะเกิดปฏิกิริยาการแข็งตัวเมื่อสัมผัสกับเอนโดทอกซินของแบคทีเรียในธรรมชาติ วิธีนี้มีความไวสูงในการวัดปริมาณเอนโดทอกซิน แต่ไม่สามารถตรวจจับไพโรเจนที่ไม่ใช่เอนโดทอกซินได้

การทดสอบแฟคเตอร์ซีรีคอมบิแนนท์ (rFC)

แฟคเตอร์ C ที่สร้างขึ้นใหม่เป็นโปรตีนที่ถูกดัดแปลงทางพันธุกรรมซึ่งปกติพบในกระบวนการ Cascade ของ Limulus amebocyte lysate ในการทดสอบนี้ แฟคเตอร์ C จะทำปฏิกิริยากับเอนโดทอกซินและจับคู่กับเครื่องหมายเพื่อสร้างผลิตภัณฑ์สุดท้ายที่เรืองแสงและสามารถวัดปริมาณได้ การทดสอบแฟคเตอร์ C ที่สร้างขึ้นใหม่ใช้หลักการเดียวกับ LAL แต่ไม่จำเป็นต้องใช้วัสดุที่มาจากสัตว์

ช้อปสินค้าทั้งหมด