การทดสอบไพโรเจน

เอนโดท็อกซินเป็นสารที่พบในแบคทีเรียแกรมลบ ไพโรเจนที่ไม่ใช่เอนโดท็อกซินเป็นสารจุลินทรีย์อื่นๆรวมถึงสารที่ได้จากแบคทีเรียแกรมบวกหรือไวรัสและไพโรเจนที่มาจากยีสต์และเชื้อรา สารไพโรเจนที่ไม่ใช่จุลินทรีย์ยังสามารถเกิดจากอนุภาคยางอนุภาคพลาสติกขนาดเล็กหรือสารประกอบโลหะในอีลาสโตเมอร์

มีวิธีการทดสอบหลายวิธีสำหรับการตรวจจับไพโรเจน สามารถจำแนกได้ตามประเภทของสารปนเปื้อนที่ตรวจพบและความจำเป็นในการใช้วัสดุจากสัตว์ในการทำการทดสอบตามที่อธิบายไว้ในตารางด้านล่าง:

Rabbit Pyrogen Testing

การทดสอบแอนโดรเจนของกระต่าย (RPT) เกี่ยวข้องกับการวัดอุณหภูมิที่เพิ่มขึ้นของกระต่ายหลังจากการฉีดเข้าเส้นเลือดดำของผลิตภัณฑ์ที่ผ่านการทดสอบ RPT ให้ผลลัพธ์เชิงคุณภาพและความไวค่อนข้างต่ำ ความทนทานของการทดสอบยังจำกัดเนื่องจากการพัฒนาความทนทานต่อแอนโดรเจนในกระต่ายหลังจากการฉีดซ้ำหรือความเครียดจากกระต่ายเมื่อทำการทดสอบ

การทดสอบการเปิดใช้งานโมโนไซต์

Monocyte Activation Test (MAT) เป็นอีกทางเลือกหนึ่งของวิธีการที่ใช้สัตว์ในการตรวจหาทั้งเอนโดท็อกซินและไพโรเจนที่ไม่ใช่เอนโดท็อกซิน การทดสอบการเปิดใช้งานโมโนไซต์จะเลียนแบบปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันของมนุษย์โดยการบ่มโมโนไซต์ด้วยตัวอย่างที่ทดสอบ หากมีไพโรกโมโนไซต์จะถูกกระตุ้นและผลิตโมเลกุลอักเสบไซโตไคน์ซึ่งมีหน้าที่รับผิดชอบในการเกิดปฏิกิริยาไข้ จากนั้นไซโตไคน์จะถูกตรวจจับโดยใช้การวิเคราะห์ทางภูมิคุ้มกัน (ELISA) ที่เกี่ยวข้องกับแอนติบอดีเฉพาะและปฏิกิริยาสีเอนไซม์ 

โปรดทราบ: เภสัชยุโรป (European Pharmacopoeia - Ph. ยูโร) คณะกรรมการตัดสินใจที่จะมีส่วนร่วมในเส้นทางที่ในที่สุดควรนำไปสู่การเปลี่ยนที่สมบูรณ์ของการทดสอบ pyrogen กระต่าย (RPT) ใน pH EUR ภายในประมาณ 5 ปี 
อ่านบทความ และ พูดคุยเพิ่มเติมกับผู้เชี่ยวชาญของเรา เพื่อเริ่มการย้าย 

การทดสอบแบคทีเรีย endotoxin (การทดสอบ LAL)

วิธีที่พบมากที่สุดสำหรับการทดสอบ endotoxin คือการทดสอบ Limulus amoebocyte lysate (การทดสอบ LAL); การทดสอบตาม lysate ของ amoebocytes จากเลือดปูม้า ไลเซทจากเซลล์เม็ดเลือดของปูเกือกม้าจะทำปฏิกิริยากับเอนโดท็อกซินของแบคทีเรียตามธรรมชาติในปฏิกิริยาการแข็งตัวของเลือด วิธีนี้มีความไวสูงสำหรับปริมาณของเอนโดท็อกซินแต่ไม่พบไพโรเจนที่ไม่ใช่เอนโดท็อกซิน

การทดสอบปัจจัย C (r FC) ของรีคอมบิแนนท์

Recombinant Factor C เป็นโปรตีนที่ได้รับการออกแบบทางพันธุกรรมซึ่งปกติจะพบได้ในน้ำตก Limulus amebocyte lysate ในการทดสอบนี้ปัจจัย C จะทำปฏิกิริยากับเอนโดท็อกซินและคู่กับมาร์กเกอร์เพื่อสร้างผลิตภัณฑ์ที่สามารถวัดปริมาณและฟลูออเรสเซนต์ได้ การทดสอบปัจจัย C แบบรีคอมบิแนนท์ใช้หลักการเดียวกันกับการทดสอบ LAL แต่ไม่จำเป็นต้องใช้วัสดุที่ได้จากสัตว์