การทดสอบความปราศจากเชื้อ

กระบวนการทดสอบความเป็นหมันถูกนำไปใช้กับผลิตภัณฑ์ในหลายอุตสาหกรรมรวมถึงผู้ผลิตอาหารและเครื่องดื่มแต่อุตสาหกรรมหลักคือภาคยาและการแพทย์ที่การทดสอบความเป็นหมันของผลิตภัณฑ์ยังคงเป็นงานที่สำคัญและเป็นกิจวัตรสำหรับนักจุลชีววิทยา

• Pharmaceutical Sterility Testing Methods
• วิธีการทดสอบความเป็นหมันสำหรับอุปกรณ์ทางการแพทย์
• Sterility Testing Workflow

Pharmaceutical Sterility Testing Methods

วิธีการที่สอดคล้องกันสำหรับการทดสอบความเป็นหมันของผลิตภัณฑ์ยาต้องมีตัวอย่างที่จะเพาะเลี้ยงในสองสื่อที่แยกต่างหาก สื่อวัฒนธรรมสองประเภทที่แตกต่างกันถูกนำมาใช้ในการทดสอบความเป็นหมันเพื่อส่งเสริมการเจริญเติบโตของแอนแอโรบิกที่เหลือรวมถึงแอโรบิกและเชื้อรา ของเหลว Thioglycolate Medium (FTM) มักใช้ในการเพาะเชื้อแอนแอโรบิกและแบคทีเรียแอโรบิกบางชนิดในขณะที่ตัวกลางการย่อยเคซีนถั่วเหลือง (SCDM) มักใช้ในการเพาะเชื้อเชื้อราและแบคทีเรียแอโรบิก ตัวอย่างจะถูกบ่มเป็นเวลา 14 วันที่อุณหภูมิ 32.5°C และ 22.5°C ตามลำดับก่อนการตรวจ ความขุ่นในอาหารเลี้ยงเชื้ออาจบ่งชี้ถึงการเติบโตและต้องได้รับการตรวจสอบ มีสองวิธีที่แนะนำของการทดสอบความเป็นหมันสำหรับยา: การกรองเมมเบรนและการฉีดวัคซีนโดยตรง

Membrane Filtration Sterility Testing

การทดสอบความเป็นหมันของการกรองเมมเบรนเป็นวิธีการควบคุมของทางเลือกสำหรับผลิตภัณฑ์ยาที่สามารถกรองได้ตามที่อ้างไว้ใน USP < 71 4.06 > EU Pharmacopoeia < 2.6 > และ JP Pharmacopoeia < 1 > ตัวอย่างจะถูกส่งผ่านตัวกรองเมมเบรนขนาด 0.45 μ m ในกระป๋องกรองและสื่อวัฒนธรรมจะถูกเพิ่ม µm รับการบ่ม วิธีการทดสอบความเป็นหมันนี้สามารถให้ความไวที่เพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับวิธีการอื่นๆเป็นตัวอย่างทั้งหมดหรือตัวอย่างคอมโพสิตจะถูกส่งผ่านตัวกรองเดียว การกรองยังช่วยให้สามารถล้างส่วนประกอบในตัวอย่างที่อาจทำให้เกิดความขุ่นหรือยับยั้งการเจริญเติบโตเช่นยาปฏิชีวนะหรือสารกันบูด

Direct Inoculation Sterility Testing

ในการฉีดวัคซีนโดยตรงตัวอย่างปริมาณเล็กน้อยจะถูกลบออกจากหน่วยตัวอย่างโดยไม่ต้องใช้เชื้อและฉีดเข้าไปในปริมาตรที่เหมาะสมของสารที่มีการเจริญเติบโตก่อนการบ่มเชื้อ ในขณะที่ง่ายวิธีการทดสอบนี้อาจมีข้อจำกัดที่สำคัญบางอย่าง สามารถเติมผลิตภัณฑ์ในปริมาณน้อยลงในอาหารเลี้ยงเชื้อเพื่อจำกัดความไวในการทดสอบ หากตัวอย่างมีเมฆมากหรือขุ่นหลังจากการฉีดวัคซีนอาจเป็นเรื่องยากที่จะตรวจจับความขุ่นจากการเติบโตของจุลินทรีย์เมื่อสิ้นสุดช่วงการบ่ม นอกจากนี้หากผลิตภัณฑ์มีคุณสมบัติต้านจุลชีพตัวอย่างจะต้องถูกทำให้เป็นกลางเพื่อไม่ให้การเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ถูกยับยั้ง

วิธีการทดสอบความเป็นหมันสำหรับอุปกรณ์ทางการแพทย์

แนะนำให้ทำการทดสอบความเป็นหมันโดยตรงสำหรับการทดสอบความเป็นหมันของอุปกรณ์ทางการแพทย์ อุปกรณ์ที่จะทดสอบจะสัมผัสโดยตรงกับสื่อทดสอบตลอดช่วงการบ่มซึ่งในระหว่างนั้นจุลินทรีย์ใดๆในหรือบนอุปกรณ์จะเติบโตและเพิ่มขึ้น นอกจากนี้การทดสอบความเป็นหมันในการล้างผลิตภัณฑ์เป็นที่ต้องการสำหรับผลิตภัณฑ์ที่มีหลอดกลวงเช่นการถ่ายเลือดและการประกอบการแช่ซึ่งเส้นทางของเหลวจะถูกระบุว่าเป็นหมัน ลูเมนของผลิตภัณฑ์จะถูกล้างด้วยของเหลวล้างอีลุตจะถูกกรองด้วยเมมเบรนและจะถูกวางไว้ในสื่อที่เหมาะสมสำหรับการบ่ม

Sterility Testing Workflow

1. การเตรียมการทดสอบ - วางท่ออุปกรณ์กรองเมมเบรนลงในปั๊ม

2. การเตรียมตัวกรอง—การเตรียมอุปกรณ์กรองเมมเบรนเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพการกรองและลดผลิตภัณฑ์ที่มีผลผูกพันกับตัวกรอง

3. การกรองตัวอย่าง—กรองผลิตภัณฑ์ในปริมาณที่เท่ากันลงในถังทั้งสอง จุลชีพจะถูกเก็บไว้ด้วยตัวกรองขนาดรู µm 0.45 μ m

4. การล้าง - สารยับยั้งทั้งหมดจะถูกล้างโดยใช้สารละลายล้างที่เหมาะสม

5. Culture Media Filling —อุปกรณ์กรองเมมเบรนที่เต็มไปด้วยสื่อวัฒนธรรมปลอดเชื้อ TSB และ FTM

6. เวลาบ่มเพาะ 14 วัน

7. ผลการทดสอบสุดท้าย - การตรวจสอบความขุ่นของภาพ/ไม่มีความขุ่น