哺乳動物細胞培養

Growing Mammalian Cells In Vitro

細胞生長需要複雜的營養混合物，包括糖、氨基酸、白蛋白、維生素、礦物質和生長因子。細胞培養基為體外哺乳類動物細胞培養提供這些必要的營養。哺乳類動物細胞培養是在培養箱中培養，培養箱提供無菌的生長環境，在最佳溫度 (37 °C) 5% CO₂ 下維持與哺乳類動物血液相似的 pH 值。  

除了某些類型的血細胞可以在懸浮狀態下培養之外，大部分來自哺乳類動物組織的細胞都需要附著在表面上才能正常分裂和生長。經處理的聚苯乙烯或玻璃瓶、平板和過濾器可提供細胞培養表面，以利細胞附著。使用合成聚合物（如聚 D-赖氨酸 (PDL)）和細胞外基質蛋白（包括膠原蛋白）可促進細胞附著，為附著提供附著框架。  

哺乳類動物細胞培養的技術

使用無菌技術防止體外培養的細胞受到污染。哺乳類動物細胞培養需要傳代或亞培養（包括稀釋達到融合的細胞和更換耗竭的培養基），以促進細胞健康和繁殖。要傳代黏附的細胞培養物，必須使用酵素方法（如胰蛋白酶化）或機械方法（如刮除）將細胞與培養表面分離，然後轉移至新的培養瓶或平板進行重新黏附。使用血球計數器和自動細胞計數器的細胞計數方法可評估細胞存活率，並有助於確定傳代的接種密度和下游製程的適當細胞密度。培養的細胞可以儲存於液氮中進行低溫保存，當再次需要工作庫存時，可以解凍其中的種子庫存。