微生物培養基製備

微生物培養基的製備是將營養素、緩衝和維持滲透平衡的物質以及選擇性抑制劑或指示劑混合,製成支持微生物生長和分化的瓊脂或肉湯的過程。微生物培養基的製備 是微生物檢測中定期監測腐敗和致病微生物的例行工作。
特色類別
培養基類型
微生物培養基應為所有或特定類型的微生物提供最佳生長條件。培養基的精確成分取決於培養的物種和應用目標。培養基的 pH 值需要根據微生物的情況進行調整。微生物培養基是根據幾個參數來分類的,例如化學成分、物理性質和功能。
微生物培養基的化學成分分類
合成(定義)培養基是具有定義化學成分的培養基,常用於培養光能自養生物,如藍藻和光合原生生物。
複合培養基是含有非定義化學成分的培養基,如蛋白胨、肉萃取物、酵母萃取物等,以滿足不同微生物的營養需求。它用於培養營養需求複雜的快速微生物。
基於物理性質的微生物培養基
固體培養基使用 1-7% 的瓊脂-瓊脂或 10-20% 的明膠來固化液體肉湯。固體培養基可用於分離不同的微生物、建立純培養、製作瓊脂斜面和瓊脂刺針。
液體培養基不含任何凝固劑。接種和培養後,細胞會以小塊或肉湯模糊的形式顯現出來。
基於制備方法的微生物培養基
即用型培養基是以板、瓶、管或其他容器提供的固體或液體培養基,以即用型或重熔和補充後的即用型形式提供。
由商業脫水配方製備的培養基是乾燥形式的培養基,使用前需要重新水化和處理,形成完整的培養基或使用前添加補充劑的不完整培養基。
由個別成分製備的培養基是微生物實驗室完全由個別成分製成的培養基。
按需培養基是由一個系統生產的,該系統可在實驗室中保持高濃度、無菌的培養基數天。
微生物培養基的製備
使用脫水的商業配方製備培養基應該按照製造商的說明進行。基本成分(如蛋白胨、酵母提取物、瓊脂、緩衝物質和抗生素)的配方經過改良,以達到培養基的一致性。將所需數量的脫水培養基或個別成份溶解於蒸餾水中,持續攪拌後加熱(必要時)。含有瓊脂的培養基加熱前應適當攪拌充分浸泡。必須調整 pH 值,然後將培養基分裝到適當的容器中,以高壓滅菌器進行濕熱滅菌。對熱敏感的物質(如蛋白質、酵素)則使用膜過濾器進行滅菌。
培養基必須在指定溫度下儲存,以防止成分改變,且儲存時間不得超過產品保質期。無菌製備和儲存對於保護培養基免受微生物感染至關重要。可透過不透水包裝及/或 5 °C ± 3 °C 儲存,將儲存過程中的水分流失降至最低。化學降解,如氧化或抗菌劑的損失,可透過避光、避熱和脫水來延緩。
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