生物製藥特性

生物製劑、生物仿製藥的表征與分析

生物製劑需要高度精密的分析工作流程來進行分析與表征，並著重於 GMP 與法規遵循。無論是原始生物療法或生物仿製藥的開發，都需要進行產品特性研究，以確保生物藥物的穩健性和規範性。

特性

完整分子質量測定

完整分子質量測定通常使用 SEC-MS 和適當的標準來進行，是生物製劑特性分析的必要步驟，從克隆選擇到最終產品的驗證。完整分子質量分析常用於證明蛋白質/肽產品的多樣性，並驗證生物製劑的身份。經過優化後，它還可以確定所有蛋白質產品（包括雙特异性單克隆抗體）的完整分子量。

與其處理大型蛋白質生物製劑不容易處理的完整質量，不如採用蛋白質消化分析方法 ，先將樣品裂解為幾個片段，然後再使用專門的質譜蛋白質體標準進行單獨分離處理。

滴度測量

細胞系提供足量 mAb 的生產力會影響其商業潛力。滴度使用 Protein-A 親和層析技術 (HPLC) 作為基線測量。親和層析 通常使用蛋白 A 配體來測定 mAb 的濃度，並將其純化以進行下游聚集體和電荷變異分析。

氨基酸分析

氨基酸分析 是確定產品特性的常用方法，用於確定 mAb 的氨基酸組成。

氨基酸分析 是確定產品特性的常用方法，用於確定 mAb 的氨基酸組成。它通常與消光係數測量同時進行，消光係數測量是用於確定不同製品之間滴度的常規方法。

肽圖

要獲得 mAb 身份的指示，比較簡單的單酶肽圖可能就足夠了。更詳細的治療性抗體特性分析，包括 N 端或 C 端測序、醣類特性分析，以及抗體製造、分析、純化和分割的其他方面，可以為產品工程提供更好的資訊。

轉譯後修飾

N-糖分析

高度多變的糖基化可能會影響 mAb 的純度並產生多變的功能。單株抗體的骨架上帶有 N-糖基化，可以使用 LC-MS 來釋放這些 N-糖基化，以評估糖基化模式。單株抗體的 N-糖基化 特性分析 是必要的，可以提供所研究分子的完整結構細節。了解這些 N-聚糖途徑非常重要，因為 N-聚糖會影響糖蛋白的許多特性，包括其構象、溶解性、抗原性以及聚糖結合蛋白的辨識。

單株抗體 (mAbs) 高階結構 (HOS) 比較

許多因素會影響 HOS --mAb 的 3D 結構--從選擇生產 mAb 的細胞系到生物處理條件，例如溫度、pH 值和光線照射。氫氚交換質譜法 (HDX-MS) 是一種用來詳細了解 mAb 三層結構的方法。

mAb修飾分析

在 mAb 製造過程中，可能會發生許多不同的翻譯後修飾，這些修飾會受到製程參數 (例如培養基、溫度等) 的很大影響。 修飾分析 包括二硫橋圖，以及 評估聚糖的基本結構。

mAb電荷分佈

由於翻譯後修飾 (PTM) 或化學修飾的結果，電荷變異會對 mAb 的生物活性和藥物動力學造成相當大的影響。電荷變異分析是 mAb 的法規要求，可透過陽離子交換色譜法 (CEX) 和毛細管等電聚焦 (cIEF) 等技術進行評估。

mAb 物理測試&尺寸分佈

mAb物理測試

物理測試用於表徵 mAb 的外觀，例如 pH 值、滲透率和濃度的測量。

HmAb尺寸分佈

雖然我們需要單一的mAb產品，但初始生產材料通常包含尺寸變異，例如聚集體、片段和顯示額外輕鏈的生物大分子。由於這些物質可能會影響免疫原性和效用，因此必須監控它們的存在。尺寸排阻色譜法 (SEC) 是評估尺寸分佈最常用的方法。 

穩定性與雜質

宿主細胞蛋白雜質

存在於生物治療藥物中的 PPM 級別，是主要的免疫原性風險，因為它們會在病患身上引起不可預測的免疫反應。這些雜質的複雜性和多樣性使其難以檢測或監控。雖然大多數 HCP 雜質都能在典型的下游純化製程中有效去除，但一小部分 HCP 卻特別具有挑戰性。為了改善單株抗體製劑中聚山梨醇酯的穩定性，我們開發了一種難以去除的 CHO HCP--脂蛋白脂肪酶的基因敲除物。

製造添加劑監控

在 mAb 開發和製造過程中，必須監控各種製造添加劑，包括 清潔劑、蛋白 A、 轉染試劑、抗生素、消泡劑和生長因子。

mAbs微生物測試

各種 微生物測試程序 是GMP和合規製藥開發和製造所必需的。許多 mAbs 都是在微生物中生產，以受惠於微生物的快速成長率和高產量，因此監控微生物污染物的存在至關重要。革蘭氏陰性細菌細胞壁的一種成分稱為內毒素，會產生從發燒、發冷到致命的敗血性休克等各種反應，這使得 熱原檢測（MAT 體外 測試） 以及隨後從 mAb 中去除內毒素變得至關重要，並成為一項監管要求。 生物負荷測試 應在整個 mAb 製造過程中採用，以監控是否存在潛在的有害微生物污染。 穩定性測試 對於確認 mAb 生產的完整性也至關重要。