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首頁應用蛋白質生物學(ELISA)酵素聯免疫吸附分析法

(ELISA)酵素聯免疫吸附分析法

ELISA通常在多孔微孔板中進行,是一種分子生物學測試,常用於檢測和定量各種分子,包括肽、蛋白質和抗體。此類檢驗可在 pg/mL 的水準檢測到感興趣的分子,對於基礎研究和疾病研究的應用需求都非常重要。

ELISA 檢驗:抗體與抗原的互動

ELISA 的基本分子元件通常包括使用與酵素結合的抗體、固定的相關分子和檢測底物。決定 ELISA 成功與否以及所得資料品質的關鍵,取決於抗體與抗原互作的親和力與特異性。抗原-抗體的互作會受到許多因素的影響,包括 pH 值、溫度和離子強度。



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ELISA 檢測形式

使用直接檢測方法的 ELISA 需要將固定的抗原直接結合到檢測板的表面,或透過擷取抗體間接結合抗原,接著是與酵素結合的抗原特異性第一抗體,以及檢測底物。

較常使用的間接檢測形式同時結合了未結合的一抗,接著是結合了特異性檢測一抗的二抗。間接檢測的優點在於與目標抗原的免疫活性增加,因為結合的酵素元素只存在於第二抗體上。

除了直接和間接檢測方法外,捕獲或 「夾心 」檢測使用額外的抗原捕獲抗體,該抗體首先附著在微孔板表面,然後同時使用一抗和酶結合的二抗,類似於之前描述的間接方法。

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