分子克隆與蛋白質表達

分子克隆的目的是將目標基因(GOI)插入質體載體中,質體載體是一種環狀DNA片段,其中含有各種有助於克隆、克隆體篩選及蛋白質表達的元件。 研究人員通常使用 DNA 限制性酶和連接酶,將目標基因以同框方式插入表達載體中,以便後續進行蛋白質表達。隨後,該載體會被導入細胞內,由細胞表達目標基因所編碼的蛋白質;或者透過無細胞蛋白質合成系統來實現蛋白質表達。
一旦蛋白質成功表達,即可研究其功能對細胞訊號傳導、形態或其他細胞內層面的影響。此外,亦可大量表達該蛋白質,經純化後應用於眾多下游研究。欲獲取更多資訊,歡迎探索我們針對昆蟲、細菌及哺乳動物蛋白質表達系統,涵蓋整個克隆與表達工作流程的全面可靠試劑與資源。
產品
RNA 與 DNA 修飾酶
在分子克隆过程中,研究人员经常使用限制性内切酶来切割 DNA,并使用 RNA 和 DNA 修饰酶等其他酶类,对核酸上的化学基团进行添加、去除或修饰。为满足多样化的研究需求,我们提供一系列全面的关键酶类,包括碱性磷酸酶、蛋白酶、T7 RNA 聚合酶、焦磷酸酶、核糖核酸酶 A 以及 T4 DNA 连接酶。 我們的試劑搭配專門配製的緩衝液,有助於確保 DNA 和 RNA 操作的高效率與可靠性。
Novagen® pET 系統、Simplicon® 載體及 UCOE® 蛋白質表達系統
我們的 E. coli、昆蟲及哺乳動物表達載體,能简化陽性轉化體篩選流程。部分重点产品包括:
- Novagen® pET 系統被公認為細菌系統中克隆與表達重組蛋白的黃金標準。
- Simplicon® 體內蛋白質表達系統提供了一種不整合基因組、可調控且基於合成自複製 RNA 的表達系統。Simplicon® 表達技術能在轉染的人類細胞中,立即產生多種基因的高水準且持續的蛋白質表達,且無基因組整合的風險。
- Ubiquitous Chromatin Opening Element UCOE® 表達載體技術,能在穩定轉染的哺乳動物細胞中,於 30 天內產出數克級的蛋白質。UCOE® 表達技術可防止轉基因沉默,並相較於傳統載體,無論染色體整合位點為何,皆能提供更一致、穩定且更高水準(最高可達 20 倍)的基因表達。
細菌與酵母轉化試劑
細菌轉化是透過熱休克或電穿孔等方法,將外源 DNA 導入細菌的過程。我們的感受態細胞產品組合經過工程化設計,即使在嚴苛的實驗條件下,也能實現最佳的質體與蛋白質表達。重點產品包括:
- NovaBlue® 感受體經過優化,兼顧效率與質體保存,有助於製作優質文庫並維持質體穩定性。
- Rosetta™、Origami™ 及 Overnight Express™ 系統可促進蛋白質正確摺疊,並提升細胞毒性蛋白質的溶解度或表達量。
针对酵母转化,我们提供简便的实验流程与可扩展的产品,能无缝整合至蛋白质表达工作流程中。
若需哺乳動物細胞研究相關資訊,請參訪我們的「轉染」頁面以獲取更多選項。
来自 BCCM/GeneCorner 的质体载体
探索我們來自 BCCM/GeneCorner 的擴充質體載體產品線——這是一個獨特的、通過 ISO 認證的質體庫,由根特大學 (UGent) 理學院生物醫學分子生物學系所營運。這套多樣化的收藏包含多種克隆及重組蛋白質表達質體,涵蓋各類目標生物體,支援分子與蛋白質生物學的現代化研究。
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相關資源
- Brochure: Molecular Essentials Guide
Learn how our comprehensive molecular tools and reagents provide precise, ready-to-use solutions for your workflows.
- Article: Cell-Free Protein Synthesis or Expression
Cell-free protein synthesis rapidly produces recombinant proteins without cells, utilizing translation machinery from different cell types for efficiency.
- Article: Competent Cell Selection & E. coli Markers Guide
Select competent cells by application, transformation efficiency, and genotype. We also present a list of E. coli markers for reference.
- Article: Simplicon™ in vivo Protein Expression System
Simplicon: A non-genome integrating, tunable and sustained protein expression system in human cells, based on a single, polycistronic, and self-replicating synthetic RNA.
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