二抗

蛋白質 A、G 和 L

蛋白質 A 源自金黃色葡萄球菌。蛋白質 G 源自某種鏈球菌。兩者均具有結合哺乳動物 IgG Fc 片段的位點。這些蛋白質對 IgG 的親和力因動物物種而異。蛋白質 G 對大鼠、山羊、綿羊及牛的 IgG 親和力較高，對小鼠 IgG1 及人類 IgG3 亦然。 蛋白質 A 對貓和天竺鼠的 IgG 親和力較高（表 1）。除了 IgG Fc 結合位點外，天然蛋白質 G 還含有白蛋白、Ig 的 Fab 區以及膜結合區的結合位點，這可能導致非特異性染色。透過製造該蛋白質的重組形式，已解決了這些問題。 經基因工程改造的重組蛋白G已去除白蛋白結合區域；而重組蛋白G′則是一種截短蛋白，其缺乏白蛋白、Fab及膜結合位點，同時保留Fc結合位點，使其相較於天然形式對IgG的特異性更高。

源自巨链球菌（Peptostreptococcus magnus）的蛋白 L 对各种物种的 kappa 轻链具有亲和力（表 2）。它可检测单克隆或多克隆的 IgG、IgA 和 IgM，以及含有 kappa 轻链的 Fab、F(ab′)2 和重组单链 Fv（scFv）片段。它亦会与鸡 IgG 结合。 註：牛、山羊、綿羊及馬等物種的免疫球蛋白幾乎完全由λ鏈組成，因此與蛋白質L的結合效果不佳，甚至可能完全無法結合。

檢測試劑

蛋白質 A 和 G 可用作通用、非物種特異性的試劑，用於結合哺乳動物組織中的初級抗體或表面 IgG。 蛋白質 G 適用於大多數物種，包括小鼠和大鼠。蛋白質 A 則適用於貓和天竺鼠。兩者均不建議用於檢測 IgA 或 IgM、Fab 片段，或禽類 IgG。當結合至琼脂糖等樹脂時，蛋白質 A 和蛋白質 G 可用於從血清或腹水中親和純化免疫球蛋白。

蛋白質 L 作為通用試劑，可用於結合哺乳動物或鳥類的一級抗體，或所有類別的表面免疫球蛋白。特別適用於檢測 Fab、F(ab′)₂ 片段及重組 scFv 片段，檢測結合於 Fc 受體免疫球蛋白，或在存在牛免疫球蛋白的情況下檢測單克隆抗體。其用途僅限於檢測攜帶 kappa 輕鏈的免疫球蛋白。

樹脂

蛋白質 A 和蛋白質 G 具有結合哺乳動物 IgG Fc 片段的位點。這些蛋白質對 IgG 的結合能力因物種而異。一般而言，IgG 對蛋白質 G 的親和力高於蛋白質 A，且蛋白質 G 能結合更多物種的 IgG。 各種 IgG 亞類（尤其是小鼠和人類來源）對蛋白質 A 的親和力變異程度，較之蛋白質 G 更為顯著。因此，蛋白質 A 可用於從某些物種中製備同型純化的 IgG。蛋白質 L 適用於從細胞培養上清液中分離小鼠單克隆抗體，且不會受到牛 IgG 的污染。